一种治疗动脉粥样硬化的组合物及其制备方法

专利名称：：一种治疗动脉粥样硬化的组合物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物组合物及其制备方法，尤其是一种由传统中药组成的组合物及其制备方法。
背景技术：
：动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是动脉硬化中最常见和重要的类型；是动脉壁细胞、细胞外基质、血液成分(特别是单核细胞、血小板、和低密度脂蛋白)、局部血流动力学、环境和遗传等诸多因素综合作用的结果；是许多心、脑血管缺血性疾病的病理学基础和主要病因。AS的病理特点是受累动脉内膜有类脂质沉着，复合糖类积聚，既而纤维组织增生和钙沉着，并伴有动脉中层病变。主要累及大中型肌弹力动脉，常导致管腔闭塞或管壁破裂、出血等严重后果。发病机制目前尚未完全清楚，主要有脂肪浸润学说、损伤应答学说，炎症感染学说等。AS是严重危害人类健康的常见病、多发病之一。我国近年有明显增长趋势，并随年龄增长而增，例如在40-49的人群中，检出率分别为58.36%和88.31%。高脂血症是指血浆TC和/或TG水平升高，实际是某一类或某几类脂蛋白异常的表现，包括LDL-C的升高和HDL-C水平过低；HDL-C中胆固醇酯与极低密度脂蛋白内的TG交换增多，使HDL-C下降，从而使HDL-C与高脂血症呈负相关，故HDL-C比重降低时会促进AS病变发展。病理学研究发现AS斑块主要由脂质积聚而成，诸多研究也表明，控制AS、降低狭窄率的首要目标就是改善血脂。NO是体内最重要的血管舒张因子之一，具有强大的扩张血管作用，可抑制血小板聚集、血管平滑肌细胞增殖、单核细胞黏附和黏附分子表达，从而防止AS的发生和血栓形成，是衡量内皮细胞功能的一个重要指标。各种原因导致的内皮功能损伤均可导致NO分泌能力下降，N0/ET-1平衡失调，加速AS的发展。ET-1是目甜已知的由血管内皮细胞分泌的最强的血管收縮因子，是NO的反向调节物，能促进血小板、炎细胞的积聚，是血栓形成、炎症发生的重要细胞因子。研究表明血浆ET-1水平与AS的严重程度呈明的TH相关关系。当ET-1增高到一定程度时，引起冠状动脉痉挛从而损害内皮细胞，促进AS的形成，并通过刺激平滑肌细胞增殖的作用，进一步加重AS的发展。中医学认为，动脉粥样硬化疾病病在血脉，根在脏腑，属本虚标实，以气血阴阳亏虚为本，血瘀、痰浊阻滞为标。目前，治疗本病的化学药物具有一定的疗效，但副作用大；治疗本病的中医方药安全有效，但往往组方庞大，剂型落后，质量可控性差，不方便使用。
发明内容3本发明所要解决的问题是提供一种治疗动脉粥样硬化的组合物，使其组方精简，安全有效，质量可控。本发明所要解决的另一个技术问题是提供一种组合物的制备方法，将其制成现代制剂，方便使用。为了解决上述技术问题，本发明提出了下述技术方案一种治疗动脉粥样硬化的组合物，其特征在于所述的组合物由下列重量份数的原料制成-杜仲3-10份，牛膝3-10份，猕猴桃10-30份，虎杖5-15份，昆布5-15份。组方优选为杜仲9份，牛膝9份，猕猴桃20份，虎杖10份，昆布10份。杜仲为杜仲科植物杜仲^/cofflfflj'aW/HoicfeOliv.的干燥树皮。牛膝为苋科植物牛膝点AFra/f力"We/te"BL.的干燥根。猕猴桃为猕猴桃科植物猕猴桃力"i'/7J'必sc/^7朋w'sPlanch.的果实。虎杖为蓼科植物虎杖/W/卵/7柳c^Dit/st咖Sieb.etZucc.的干燥根茎和根昆布为海带科植物海带Za/ffi/7arz'sJa;o/7icaAresch.或翅藻科植物昆布AcAJo/7J'aA〃ro/BeOkam.的干燥叶状体。方中杜仲补肝肾，牛膝补肝肾、逐瘀通经，猕猴桃生津除热，虎杖散瘀定痛，昆布软坚散结，消痰利水，诸药合用，共奏滋补肝肾、散瘀消痰、软坚散结之功，针对动脉粥样硬化本虚标实的特点，可有效治疗该病。本发明所述中药组合物治疗动脉粥样硬化的技术效果可通过下列试验体现。试验例、本发明组合物对实验性动脉粥样硬化兔的影响1、材料动物健康新西兰兔，体重2.0-2.5kg，雌雄各半，5月龄，由中国药科大学实验动物中心提供。药物与试剂本发明组合物，按实施例ll方法自制。辛伐他汀片，广州南新制药有限公司。甘油三酯(TG)测定试剂盒、总胆固醇(TC)测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定试剂盒、N0测定试剂盒，南京建成生物工程研究所；ET-1测定试剂盒，北京东亚免疫技术研究所。仪器LX20自动生化分析仪；酶标仪，日本BI0-R0D550;石蜡切片机，德国莱卡LD2150。2、方法家兔AS模型的建立取健康新西兰兔，雌雄各半，颗粒饲料平衡喂养1周后，随机取10只作为正常对照组，用普通饲料喂养，其余为高脂造模组，给予高脂饲料喂养(按1%胆固醇、5%猪油、10%蛋黄粉、84%普通饲料比例制作)，各组每兔每天进食总量相等，限制为150g，自由饮水。12周后高脂造模组取2只实验家兔处死，光镜下观察主动脉内膜明显增厚，伴有大量泡沫细胞，内皮细胞排列紊乱、不连续，大量平滑肌细胞迁移内膜，视为造模成功。动物分组及给药将高脂造模组家兔随机分组，每组10只模型组、本发明组合物高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常对照组仍然喂养普通词料外，其余各组喂养上述高脂饲料。本发明组合物组分别灌胃给予1.2、2.3、4.6g生药/Kg;辛伐他汀组灌胃给予给予辛伐他汀2.2mg/Kg;其余组给予相应量生理盐水。所有动物自由饮水，每天给药1次给药共8周。所有动物在给药8周后空腹抽取耳静脉血5mL，供检测各组家兔血清TC、TG、LDL、HDL、NO、ET-1使用；抽血结束后以空气栓塞法处死所有实验动物，无菌取出主动脉根部至主动脉穿膈肌处动脉段作为标本，清除外膜附着组织，沿动脉长轴剪开，取斑块最显著部位动脉段lcm，置于10%福尔马林溶液中浸泡固定后修剪成约lcmXO.15cmX0.15cm的组织块，用于病理组织学观察。检测指标及测定方法采用酶法测定血清TC、TG、LDL、HDL水平；NO测定采用硝酸还原酶法；ET-1采用放射免疫分析法。测量斑块面积病理组织块经切片机按4nm的厚度切割，采用HE染色制作病理切片，计算斑块面积占整条主动脉面积的百分比。按以下规定进行病变分级①0级无病变；②I级病变占卜25%;③1I级病变占26-50%;④m级病变占51-75%;⑤IV级病变占76_100%。记分方法①0级计O分；②I级计l分；③n级计2分；④HI级计3分；⑤IV级计4分。3、数据处理计量资料以5土S表示。试验数据进行组间t检验。4、结果4.1对AS模型兔血脂的影响试验结果见表l，结果表明，与空白组相比，模型组的TC、TG、LDL明显升高(P〈0.01)、HDL明显降低(P〈0.01)，表明造模成功。与模型组相比，阳性对照组、本发明组合物各剂量组能显著降低AS模型兔血中TC、TG、LDL水平(P<0.05、0.01);升高AS模型兔血中HDL水平(P<0.05、0.01)。表1本发明组合物对AS模型兔血脂的影响(x±S，n=10)组别剂呈(g/Kg)TC(mmol/L)TG(mmol/L)LDL(mmol/L)HDL(mmol/L)空白组—2.79±0.39**1.62±0.17林4.35±0.29**1.01±0.16**模荆组—19.34±2.223.17±0.7218.34±2,510.37±0.09隱2.2X10'112.68±2.31林1.79±0.68**13.35±1.48**0.72±0.11**低剂呈组1.216.36±3.15*2.47±0.59*15.67±2.25*0.47±0.07*中剂iA组2.315.45±2.66林2.18±0.56**14.78±2.38**0.49±0.13*高剂量组4.614.57±1.79**1.86±0.61**13.72±1.97**0,60±0.10**与模型组比较*P〈0.05，**P〈0.01(下表同)4.2对AS模型兔NO、ET-l的影响试验结果见表2，结果表明，与模型组相比，阳性对照组、本发明组合物各剂量组能显著降低AS模型兔血中ET-1水平，提高NO水平，且均具有显著性意义(P<0.05、0.01)。表2本发明组合物对AS模型兔NO、ET-1的影响(S±S,n=10)5<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>4.3对AS模型兔动脉斑块的影响试验结果见表3，结果表明，与模型组相比，阳性对照组、本发明组合物各剂量组能显著降低AS模型兔斑块面积(P〈0.05、0.01)。表3本发明组合物对AS模型兔动脉斑块的影响(x±S，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>综上所述，本发明组合物能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-1含量，并抑制斑块进展，上述作用是其治疗动脉粥样硬化的药理学基础。本发明组合物的制备方法为取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓縮至稠膏状，加入辅料，制成药学可接受的制剂。本发明组合物的剂型采用口服剂型，选自颗粒、片、胶囊、滴丸、软胶囊中的一种。本发明所述中药组合物用于治疗动脉粥样硬化时，根据病情和使用方式的不同，日用生药量为10-100g。为了更好的说明本发明的技术方案，下文将对其具体实施方式做进一歩的表述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式实施例l处方杜仲397g，牛膝1324g，猕猴桃3973g，虎杖1986g，昆布1986g(相当于3:10:30:15:15)。制法取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓缩至稠膏状，加入淀粉、羧甲基纤维素钠适量，制颗粒，灌胶囊，制成IOOO粒。用法每闩3次，每次2粒药理试验参照前文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为2.3g生药/kg，试验结果见下表表4本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(5±S，n=10)组别剂量(g/Kg)TC(隱ol/L)TG(腿ol/L)斑块记分空白组—2.79±0.39**1.62±0.17**—模型组—19.34±2.223.17±0.723.2±0.79阳性2.2X10—:i12.68±2.31**1.79±0.68**1.0±0.67**实施12.316.15±3.43*2.52±0.58*2.2±J.03*结果表明，与模型组相比，实施例l所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P<0.05)。实施例2处方杜仲1768g，牛膝530g，猕猴桃1768g，虎杖884g，昆布884g(相当于10:3:10:5:5)。制法同实施例l。用法每R3次，每次2粒药理试验参照前文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为1.4g生药/kg，试验结果见下表表5本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(x±S，n=10)组别剂量(g/Kg)TC(誦1/L)TG(腿ol/L)斑块记分空白组—2.79±0.39**1.62±0.17**-模型组一19.34±2.223.17±0.723.2±0.79阳性2.2X10—312.68±2.31**1.79±0.68**1.0±0.67**实施21.416.74±2.76*2.39±0.87*2.2±0.92*结果表明，与模型组相比，实施例2所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P〈0.05)。实施例3处方杜仲1484g，牛膝445g,猕猴桃4452g，虎杖2226g，昆布2226g(相当于10:3:30:15:15)。制法同实施例l。用法每闩3次，每次2粒药理试验参照前文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为2.6g生药/kg，试验结果见下表表6本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(S±S，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结果表明，与模型组相比，实施例3所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P<0.05)。实施例4处方杜仲485g，牛膝1616g，猕猴桃1616g，虎杖808g，昆布808g(相当于3:10:10:5:5)。制法同实施例l。用法每R3次，每次2粒药理试验参照甜文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为1.3g生药/kg，试验结果见下表表7本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(S±S,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结果表明，与模型组相比，实施例4所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P<0.05)。实施例5处方杜仲1250g，牛膝1250g，猕猴桃1250g，虎杖1875g，昆布1875g(相当于10:10:10:15:15)。制法同实施例l。用法每闩3次，每次2粒药理试验参照前文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为1.8g生药/kg，试验结果见下表表8本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(5±S,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结果表明，与模型组相比，实施例5所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P〈0.05)。实施例6处方杜仲870g，牛膝870g，猕猴桃8696g，虎杖1449g，昆布1449g(相当于3:3:30:5:5)。制法同实施例l。用法每闩3次，每次2粒药理试验参照甜文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为3.2g生药/kg，试验结果见下表表9本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(x±S，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结果表明，与模型组相比，实施例6所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P<0.01)。实施例7处方杜仲1881g，牛膝1881g，猕猴桃5643g，虎杖940g，昆布2821g(相当于10:10:30:5:15)。制法同实施例l。用法每闩3次，每次2粒药理试验参照前文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为3.2g生药/kg，试验结果见下表表IO本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(x±S，n=10)组别剂量(g/Kg)TC(鹏ol/L)TG(誦ol/L)斑块记分空白组一2.79±0.39林1.62±0.17**—模型组—19.34±2.223,17±0.723.2±0.79阳性2.2X1(T12.68±2.31**1.79±0.68**1.0±0.67**实施73.216.09±2.54**2.30±0.83*1.9±0.74**结果表明，与模型组相比，实施例7所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P〈0.05、0.01)。实施例8处方杜仲556g，牛膝556g，猕猴桃1852g，虎杖2778g，昆布926g(相当于3:3:10:15:5)。制法同实施例l。用法每FI3次，每次2粒药理试验参照甜文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为1.6g生药/kg，试验结果见下表案ll本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(5±S，n=10)组别剂量(g/Kg)TC(誦ol/L)TG(誦ol/L)斑块记分空白组—2.79±0.39林1.62±0.17**—模型组—19.34±2.223.17±0.723.2±0.79阳性2.2X10—312.68±2.31**1.79±0.68**1.0±0.67**实施81.617.00±2.55*2.43±0.79*2.3±0.95*结果表明，与模型组相比，实施例8所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P<0.05)。实施例9处方杜仲1429g，牛膝1429g，猕猴桃4286g，虎杖2143g，昆布714g(相当于10:10:30:15:5)。制法同实施例l。用法每闩3次，每次2粒药理试验参照前文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为2.4g生药/kg，试验结果见下表表12本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(x±S,n=10)组别剂量(g/Kg)TC(鹏ol/L)TG(,1/L)斑块记分空白组一2.79±0.39**1.62±0.17**-模型组一19.34±2,223.17±0.723.2±0.79阳性2.2X1(T'12.68±2.31**1.79±0.68**1.0±0.67**实施92.416.92±2.25*2.38±0.84*2.1±0.99*结果表明，与模型组相比，实施例9所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P<0.05)。实施例IO处方杜仲417g，牛膝417g，猕猴桃1389g，虎杖694g，昆布2083g(相当于3:3:10:5:15)。制法同实施例l。用法每闩3次，每次2粒药理试验参照甜文所述试验方法，本实施例组合物给药剂量为1.2g生药/kg，试验结果见下表表13本发明组合物对AS模型兔血脂及动脉斑块的影响(x±S,n=10)组别剂量(g/Kg)TC(腿ol/L)TG(mmol/L)斑块记分空白组—2.79±0.39**1.62±0.17**—模型组—19.34±2.223.17±0.723.2±0.79阳性2.2X10—312.68±2.31林1.79±0.68**1.0±0.67**实施101.216.25±3.24*2.52±0.52*2.3±0.82*结果表明，与模型组相比，实施例10所得组合物能降低AS模型兔血脂并抑制动脉斑块进展(P<0.05)。实施例ll处方杜仲1500g，牛膝1500g，猕猴桃3333g，虎杖1667g，昆布1667g(相当于9:9:20:10:10)。制法同实施例l。用法每闩3次，每次2粒。实施例12处方杜仲1500g，牛膝1500g，猕猴桃3333g，虎杖1667g，昆布1667g(相当于9:9:20:10:10)。制法取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓縮至稠膏状，加入淀粉、羧甲基纤维素钠适量，制颗粒，压片，制成iooo片。.用法每R3次，每次2片。实施例13处方杜仲1500g，牛膝1500g，猕猴桃3333g，虎杖1667g，昆布1667g(相当于9:9:20:10:10)。制法取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓縮至稠膏状，加入淀粉，制颗粒，制成1000g。用法每闩3次，每次2g。实施例14处方杜仲1500g，牛膝1500g，猕猴桃3333g，虎杖1667g，昆布1667g(相当于9:9:20:10:10)。制法取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓縮至稠膏状，加入聚乙二醇适量，混匀，滴制滴丸成3000粒。用法每FI3次，每次6粒。实施例15处方杜仲1500g，牛膝1500g，猕猴桃3333g，虎杖1667g，昆布1667g(相当于9:9:20:10:10)。制法取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓縮至稠膏状，加入大豆油、石蜡适量，混匀，压制软胶囊成iooo粒。用法每日3次，每次2粒。权利要求1、一种治疗动脉粥样硬化的组合物，其特征在于所述的组合物由下列重量份数的原料制成杜仲3-10份，牛膝3-10份，猕猴桃10-30份，虎杖5-15份，昆布5-15份。2、根据权利要求l所述治疗动脉粥样硬化的组合物，其特征在于该组合物由下列重量份数的原料制成杜仲9份，牛膝9份，猕猴桃20份，虎杖10份，昆布10份。3、权利要求l所述治疗动脉粥样硬化的组合物的制备方法，其特征在于所述的方法包括下列步骤取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓縮至稠膏状，加入辅料，制成药学可接受的制剂。4、根据权利要求3所述治疗动脉粥样硬化的组合物的制备方法，其特征在于所述的制剂的剂型采用口服剂型。5、根据权利要求4所述治疗动脉粥样硬化的组合物的制备方法，其特征在于所述的口服剂型选自颗粒、片、胶囊、滴丸、软胶囊中的一种。全文摘要本发明涉及一种能治疗动脉粥样硬化的组合物，该组合物由下列重量份数的原料制成杜仲3-10份，牛膝3-10份，猕猴桃10-30份，虎杖5-15份，昆布5-15份。本组合物组方精简，治疗动脉粥样硬化疗效确切。本发明还涉及上述组合物的制备方法取杜仲等5味药材，混匀，加入其重量10倍量体积的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，浓缩至稠膏状，加入辅料，制成药学可接受的制剂。采用该方法制备，能保证本组合物方便使用、质量可控。文档编号A61K36/185GK101658558SQ20091018356公开日2010年3月3日申请日期2009年9月23日优先权日2009年9月23日发明者琳王,范淦彬申请人:苏州派腾生物医药科技有限公司