促生长激素分泌剂的制作方法

专利名称：促生长激素分泌剂的制作方法
背景技术：
生长激素是动物脑垂体的分泌蛋白，它对有机体的发育具有广泛的影响。已经证明，人工操纵生长激素水平具有有效的治疗作用。已经显示，补充人生长激素可有效地治疗人体生长激素不足及其相关疾病状态。除了本发明之外，各研究不包括生长激素新的、有效的特性，即它对控制激素水平的能力提供进一步的重要性。例如，最近的临床研究指出，补充生长激素在抗人类老化疾病方面可能是有用的。已经显示，动物生长激素水平提高引起瘦肌肉块增加。后者的一个应用是可能产生更大量瘦肉产品或者产生更大和/或更强壮的动物。
尽管生长激素是由脑垂体自然产生的，但生长激素分泌到血流中是受第二种蛋白质，即生长激素释放因子(GRF)的控制。本领域通常也已知该激素称作somatocrinin即生长激素释放激素(GHRH)和生长释放激素(GRH)。
有两条途径来解决生长激素循环水平增加的问题(1)直接增加有机体内人生长激素的水平或(2)增加有机体自然产生生长激素的趋势。后一策略可通过补充GRF获得。已经证明，GRF在体外增加生长激素的循环水平(Rivier等人，Nature(伦敦)，300276(1982))。GRF包括其结构类似物对生长激素产生的影响已经被广泛地研究。使用GRF作为直接补充剂的主要障碍是其体外使用期限短。L.A.Frohman等人，Journal of clinical Investigation，78906(1986)。因此需要更有效的和/或更长使用期限的GRF分子来开发有效的人治疗剂或动物饲养剂。
GRF的结构已经通过很多方法改变，由此得到更长试用期限和/或更有效的GRF类似物。已经证明，N-端开始的29个氨基酸足以保留全部GRF活性。Speiss等人，Biochemistry，216037(1982)。一个策略是在GRF分子的不同区域并入新的D-氨基酸残基。V.A.Lance等人，Biochemical and Biophysical Research Communications，119265(1984)；D.H.Coy等人，Peptides，8(suppl.1)49(1986)。另一策略是通过在N-端区并入肽键电子等排物来改变GRF的肽主链。D.Tourwe，Janssen.Chim.Acta，33(1985)；S.J.Hocart等人，Journal of Medicinal Chemistry，331954-58(1990)。在1992年10月28日出版的欧洲专利出版物511,003中描述了一系列活性GHRH类似物。
除了GHRH的作用外，有各种已知的释放生长激素的途径。例如，化学制剂如精氨酸、L-3，4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)、胰高血糖素、加压素和胰岛素引起的低血糖以及活动如睡眠和锻炼通过以某种方式作用于下丘脑直接引起生长激素从脑垂体释放，该作用或者减少生长抑素的分泌或者增加GHRH的分泌。
在需要增加生长激素水平的情况下，所述问题通常通过提供外原性生长激素或通过给予GHRH或刺激生长激素产生或释放的相关肽基化合物来解决。在任一情况下，化合物肽基的性质要求必须通过注射给药。
已经开发出其他刺激内源性生长激素释放的化合物，如与GHRH有关的类似的肽基化合物。这些肽与生长激素相比尽管非常小，但仍然易受代谢不稳定性的影响。
在很多物种包括人，给予六肽生长激素释放肽-6(GHRP)引起生长激素分泌。该肽是一系列合成肽中的一种，其结构以五肽(Metenkephalin)为基础。已显示，GHRP特定地与脑垂体结合，尽管该结合不涉及鸦片样物质、GHRH或生长抑素受体。
在近些年来，开发该系列化合物的非肽基类似物作出了有意义的成就。这些化合物(称作生长激素促分泌剂)口服可被生物利用，诱导产生或释放生长激素，并且与GHRH一同或协同起作用。
代表性的生长激素促分泌剂公开在美国专利3239345；美国专利4036979；美国专利4411890；美国专利5206235；美国专利5248841；美国专利5310737；美国专利5310017；欧洲专利公开144230；欧洲专利公开513974；国际专利公开WO94/07486；国际专利公开WO94/08583；国际专利公开WO94/13696；1996年8月20日提交的美国申请08/704494；1996年8月20日提交的美国申请08/700206和科学(Science)，2601640-1643(1993)。
美国专利5206235(出版于1993年4月27日)描述了一系列由下列结构表示的苯并内酰胺化合物 这些化合物表明具有升高人生长激素分泌水平的临床活性。B.J.Gertz，Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism，771393-1397(1993)。
在国际专利公开WO94/13696(出版于1994年6约23日)中描述了另外一组生长激素促分泌剂。这些化合物用下列两个结构式来表示 本发明提供一系列具有作为生长激素促分泌剂活性的化合物。这些化合物实际上没有肽基，因此在代谢上比生长激素、生长激素释放激素或这些蛋白质之一的类似物更稳定。本发明所采用的化合物优选用作人用药物，也可兽医使用如用于牛、猪、羊、家禽和鱼。
发明概述本发明涉及下式I所示化合物或其可药用盐或溶剂化物 其中R1为C6H5CH2OCH2-、C6H5(CH2)3-或吲哚-3-基甲基；Y是吡咯烷-1-基、4-C1-C6烷基哌啶-1-基或NR2R2；R2各自独立地为C1到C6烷基；R3是2-萘基或对位由W取代的苯基；W是H、F、CF3、C1-C6烷氧基或苯基；并且R4是H或CH3。
本发明还涉及药用制剂，该制剂含有单一形式的或与其它生长激素促分泌剂化合物组合的和/或与合适的骨抗吸收剂组合的式I化合物，并涉及所述化合物和/或制剂至少用于增加哺乳动物生长激素的内源水平。
本发明进一步还涉及用于治疗或预防可通过增加内源生长激素调节的生理疾病的方法，该方法包括给予需要所述治疗的动物治疗有效量的式I化合物。
本发明还涉及制备式I化合物的方法。发明详述在优选的实施方案中，本发明的化合物是R3为甲基的式I化合物。
在另一优选实施方案中，本发明化合物是Y为4-甲基哌啶-1-基的式I化合物。
式I化合物两个手性中心的立体化学为(R，R)也是优选的。
在本文实例中使用的术语和缩写具有其通常的意思，除非另外指定。例如“℃”指摄氏度；“N”指正常或常态；“mmol”指微摩尔；“g”指克；“ml”意指毫升；“M”指摩尔浓度；“MS”指质谱；“UV”指紫外光谱；“IR”指红外光谱；并且“NMR”指核磁共振谱。
本文中，术语“C1-C6烷基”指直链或支链的、单价的、饱和的脂肪族链1到6个碳原子，并且包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基和己基。术语“C1-C6烷基”包括在术语“C1-C4烷基”的定义范围内。
“C1-C6烷氧基”代表连接到氧原子上，具有1-6个碳原子的直链或支链的烷基链。典型的C1-C6烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基等等。术语“C1-C6烷氧基”包括在术语“C1-C4烷氧基”的定义范围内。
在本文中，术语“羧基保护基”指当化合物上其它官能团进行反应时，通常用于阻断或保护羧基官能团的羧基取代基。该保护基的实例包括甲基、乙基、对硝基苄基、对甲基苄基、对甲氧基苄基、3，4-二甲氧基苄基、2，4-二甲氧基苄基、2，4，6-三甲氧基苄基、2，4，6-三甲基苄基、五甲基苄基、3，4-亚甲基-二氧基苄基、二苯甲基、4，4’-二甲氧基-二苯甲基、2，2’，4，4’-四甲氧基二苯甲基、叔丁基、叔戊基、三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4，4’-二甲氧基三苯甲基、4，4’，4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、苯甲酰甲基、2，2，2-三氯乙基、2-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰基乙基、4-硝基苯甲磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等等。
在本发明中，优选的羧基保护基是甲基或乙基。这些基团的其它实例可在E.Haslam，supra，第5章和T.W.Greene等人，supra，第5章中得到。
在本文中，术语“氨基保护基”指当化合物上其它官能团进行反应时，通常用于阻断或保护氨基官能团的氨基取代基。该氨基保护基的实例包括甲酰基、三苯甲基、苯二甲酰亚氨基、三氯乙酰基、氯乙酰基、溴乙酰基、碘乙酰基和氨基甲酸乙酯类保护基团如苄氧基羰基、4-苯基苄氧基羰基、2-甲基苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、4-氟苄氧基羰基、4-氯苄氧基羰基、3-氯苄氧基羰基、2-氯苄氧基羰基、2，4-二氯苄氧基羰基、4-溴苄氧基羰基、3-溴苄氧基羰基、4-硝基苄氧基羰基、4-氰基苄氧基羰基、正丁氧基羰基、(NBoc)叔丁氧基羰基、1，1-二苯基乙-1-基氧基羰基、1，1-二苯基丙-1-基氧基羰基、2-苯基丙-2-基氧基羰基、2-(对甲苯甲酰基)-丙-2-基氧基羰基、环戊烷基氧基羰基、1-甲基环戊烷基氧基羰基、环己烷基氧基羰基、1-甲基环己烷基氧基羰基、2-甲基环己烷基氧基羰基、2-(4-甲苯甲酰磺酰基)乙氧基羰基、2-(甲磺酰基)乙氧基羰基、2-(三苯基膦基)乙氧基羰基、芴基甲氧基羰基(FMOC)、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基、烯丙基氧基羰基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯基氧基羰基、5-苯并isoxalyl甲氧基羰基、4-乙酰氧基苄氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、2-乙炔基-2-丙氧基羰基、环丙基甲氧基羰基、4-(癸氧基)-苄氧基羰基、异龙脑基氧基羰基、1-哌啶基氧基羰基等；苯甲酰基甲基磺酰基基团、2-硝基苯基亚磺酰基、二苯基膦氧化物等氨基保护基。
所采用的氨基保护基通常不是关键的只要衍生的氨基随后在中间体分子的其它部位上反应时稳定，并且可在合适时选择性地去除而不影响分子的剩余部分(包括然后其它氨基保护基)。本发明操作过程中优选的氨基保护基是叔丁氧羰基(NBoc)。在下列文献中描述了上述术语所指基团的进一步实例E.Haslam，Protective Groups inOrganic Chemistry，(J.G.W.McOmie，ed.1973)第2章；和T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in OrganicSynthesis(1991)第7章。
术语“离去基团”(Q)指亲核取代反应中亲核试剂攻击碳原子而置换的一组原子。合适的离去基团包括溴、氯和碘、苯磺酰基氧基、甲磺酰基氧基和甲苯磺酰基氧基。术语“离去基团”(Q)包括活化的基团。
本文所使用的术语“活化的基团”指离去基团，当被攻击的基团由羰基(-C＝O)产生时，该离去基团更象是参与酰化反应而不同于不存在该基团却存在游离酸时的那样。这些活化基团是本领域技术人员公知的并且可以是如琥珀酰亚胺基氧基、苯二甲酰亚氨基氧基、苯并三唑基氧基、叠氮基或-O-CO-(C4-C7烷基)。
本发明的方法所使用的化合物具有两个手性中心。由于这些手性中心，本发明化合物以非对映体和非对映异构体混合物的形式产生。所有非对称形式、各个异构体及其组合物都在本发明的范围之中。
本文所使用的术语“R”和“S”如同有机化学中常用那样来表示手性中心的特异构型。术语“R”(rectus)指沿键由大基团向小基团观察时手性中心具有顺时针基团关系(最大到次之)的构型。术语“S”(sinister)指沿键由大基团向小基团观察时手性中心具有逆时针基团关系(最大到次之)的构型。基团的顺序基于其原子序数(按原子序数递减为序)。在Nomenclature of Organic CompoundsPrinciplesand Practice(J.H.Fletcher等人编辑，1974)103-120页中包含了次序的部分列表和立体化学的讨论。
除了(R)-(S)体系外，本文中也使用老的D-L体系以表示绝对构型，特别是涉及氨基酸时。在该体系中，费歇尔投影式按主链1号碳原子为顶部来定向。词头“D”用来表示功能基(决定基)在手性中心碳原子右侧的异构体绝对构型而“L”是在左侧的异构体构型。
为了与其对映体相比优先制备一种光学异构体，可使用各种途径。例如，可制备对映体混合物，然后可以将两种对映体分离。用于将外消旋混合物(或对映体混合物)拆分为各个对映体的方法首先是通过与光学活性酸或碱形成盐来将对映体转化为非对映体。然后采用不同的溶解性、分级结晶、色谱层析等方法，可将非对映体分开。在J.Jacques等人，Enantiomers，Racemates，and Resolution，(1991)中找到有关对映体混合物拆分的进一步详细描述。
在下列合成的任何过程中，保护所涉及任何分子上的敏感或有反应活性的基团是需要的或理想的。这可以通过采用上文所述的常规保护基团来完成。
本发明化合物可以通过各种途径来制备，其中许多途径对本领域技术人员来说是已知的。合成式I化合物所采用步骤的特定顺序取决于所合成的化合物、所采用的起始材料和各种取代部分的相对不稳定性。这些合成途径的例子可以在下文的合成方案I-IV以及实施例中找到。
在下列合成方案IA-IC中提供一种本发明化合物的合成途径。式IV’和IV化合物是可以商购获得的，或者可以使用本领域已知的技术来制备。式IV化合物可以用式IV’化合物经中间体酰氯来制备，酰氯又用亚硫酰氯或草酰氯通过常规方法来制备。所得酰氯用溴源如N-溴琥珀酰亚胺处理，然后用乙醇使酰氯骤冷，获得式IV化合物。可以理解式IV化合物上的溴基团实际上可以是任何本文定义的合适的离去基团(Q)。该制备过程显示在下文合成方案IA中合成方案IA 其中R表示上文式I化合物中定义的E。
如合成方案IB所示，起始材料进一步包括式V化合物，该化合物可商购获得或可按本领域方便已知的技术来合成。式IV化合物可与式V化合物(4-硝基咪唑)通过本领域已知的方法偶合产生式IIb’化合物。在这些化合物偶合中使用的合适的试剂包括用有机或无机碱处理式IV化合物，然后与式IV溴化合物反应。常规的有机碱包括三烷基胺、六甲基二硅叠氮(disilazide)钾、六甲基二硅叠氮锂、二异丙基酰胺锂、碳酸钾等等。本发明存在中优选使用溶解在二甲基甲酰胺中的氢化钠或碳酸钾。
然后将式IIb’化合物用氢氧化锂脱保护以产生式IIb化合物，但在该反应中可以使用其它脱保护剂。这些脱保护剂包括常规的皂化剂如氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化锂。
实质上，式IIb化合物的纯(R)对映体也可通过美国专利5344937和5380866中提供的方法来合成，这两篇专利文献引入本文供参考。
然后，在适宜的条件下，将式IIb化合物用式VI化合物转化为相应的酰胺，产生式IIa化合物。通常，可通过本领域已知的许多方法，其中包括激活酸形成更好的离去基团将式VI伯胺或仲胺酰胺化。适宜的激活剂也是本领域已知的并且包括二环己基碳化二亚胺(DCC)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-以及碳化二亚胺盐酸盐(EDC)和羟基苯并三唑(HOBT)、草酰氯、亚硫酰氯、PyBOP(苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷-膦)六氟磷酸盐等等。实施本发明优选羟基苯并三唑(HOBT)。然后，可用任何适宜的方法，用适宜的还原剂将所得到的式IIa化合物上的硝基还原为氨基。实施本发明优选使用氢和5％披钯碳进行催化还原。通过该还原反应产生式II化合物。
在这些反应中，优选使用的反应温度范围为-40-150℃，并且最优选的范围为10-40℃。这些反应可现场进行，不必在制备特定化合物后将其分离出来。
在下文合成方案IB中提供这些反应的实例，其中R代表先前所定义的E，并且R2R1N是先前所定义的R6。
合成方案IB
在下文合成方案IC中提供式I化合物总合成的第二部分。
在该合成中，有代表性的起始物质是式IIIb’化合物，它是化学保护形式的氨基酸O-丝氨酸。通过化学方法保护是指将氨基-和羧基-官能团都适宜地保护起来以便于进一步与该分子反应。所述保护反应是本领域技术人员公知的，并且可用于其它适宜的起始物质。式IIIb’的中间体可通过商业渠道获得，或者可通过标准的氨基酸合成方法制备。所述合成方法是本领域普通技术人员公知的并且如Chemistryand Biochemistry of Amino Acids(G.C.Chapman ed.，1985)中所述。保护的氨基可以用三氟乙酸和二氯甲烷特异性脱保护以便于进一步与该氨基官能团反应。该脱保护反应产生式IIIb化合物。
然后，可将式IIIb化合物用氨基保护的式X化合物进行N-乙酰化产生式IIIa’化合物。在该N-乙酰化反应中，适宜的激活剂是本领域已知的并且包括DCC、HOBT、EDC和草酰氯。实施本发明优选HOBT。式X化合物可通过商业渠道获得或者可以很容易地从适宜的可获得的起始物质制备。然后典型地用氢氧化锂将式IIIa’化合物上保护的羧基选择性地脱保护，产生式III化合物。也可以按照合成方案IC中所描述的途径制备是III化合物，其中起始物质IIIb’是2-Nboc-氨基戊酸甲酯。
然后，将式III化合物与通过偶联反应，用氢和披钯催化剂还原IIb’制备的化合物偶联，产生式Ia化合物。在该N-乙酰化反应中，有代表性的试剂是本领域已知的并且包括DCC和HOBT，这是实施本发明优选的偶联方法。然后，选择性地将式Ia化合物的羧基脱保护，并在该部位与式VI化合物偶联，然后进一步将氨基脱保护，产生式Ia化合物。在这些脱保护和偶联反应中使用的适宜的试剂在下文中讨论并且是本领域已知的。式Ia化合物包含在式I中并且是具有可药用活性的。
在这些反应中所使用的优选的温度范围为-40-150℃，并且最优选的范围为10-40℃。这些反应可现场进行，不必在制备特定化合物后将其分离出来。
或者，可将式IIa化合物与式III化合物偶联产生可脱保护得到式Ia化合物的中间体。
在下文合成方案IC中提供有代表性的反应，其中R是先前所定义的E，并且R2R1N是先前所定义的R6。
合成方案IC
合成方案IC，续
除了本文所描述的上述合成方案外，可使用具有对映异构特异性的合成方案来制备式I化合物。典型地，选择将起始物质中所存在手性中心保持在所需要取向的合成反应方案。优选的反应方案是那些在所产生的化合物中，通常95％以上产物是所需要对映异构体的方案。在下列合成方案II中，R-取代的苯基代表在上述式I化合物中所提供的E取代基。
合成方案II
在合成方案II中，可按照标准方法，通过将式III化合物用碱如氢化钠烷基化，然后用亲电子试剂如碘甲烷处理制备式IV化合物。在该反应中，优选的碱包括六甲基二硅烷化钠、锂或钾、二异丙基酰胺锂和氢化钠。优选的甲基化剂包括卤代甲烷或任何具有适宜取代的离去基团如甲苯磺酸根、甲磺酸根等的甲基。
式V化合物可通过在本领域已知的标准皂化条件下水解式IV化合物制备。在该转化中，适宜的试剂包括氢氧化钠或氢氧化锂。所得到的羧酸可按照标准方法，用亚硫酰氯或者优选用草酰氯转化为酰基氯。任何可将该酰基氯与手性助剂如(4R，5S)-(+)-4-甲基-5-苯基-2-oxazolidinone的锂盐反应，得到式V和VI化合物，它们通过硅胶色谱层析很容易分离。
式VII化合物可通过在碱性条件如在氢氧化锂下除去手性助剂制备。在除去oxazolidinone类手性助剂中，可使用本领域已知的其它试剂进行该转化。这些包括氢氧化锂/过氧化氢条件，还原/氧化方案，烷基硫取代和氨基转移。
式VIII化合物可按照本领域已知的标准方法从式VII化合物制备。通过用草酰氯或亚硫酰氯形成酰基氯，然后与适宜的取代胺(NR2)反应提供式VIII化合物。
式IX化合物可通过用氢和披钯碳还原式VIII化合物制备。本领域已知的可用于还原硝基的其它方法包括使用氯化亚锡(II)，铁的酸性溶液，硫酸亚铁和碱的水溶液，活性铝土，和亚硫酸钠。然后，所得到的式VIIa 4-氨基咪唑化合物在标准肽偶联条件下直接与适宜的二肽酸(式IIX化合物)反应，包括形成二肽活性酯，然后与胺VIIa反应。适用于酰胺形成的条件包括DCC、EDC和HOBT。式IIX化合物可从非天然D-氨基酸如本领域已知的D-苄氧基丝氨酸、D-色氨酸和D-2-氨基-5-苯基-戊酸等的甲酯来制备。标准偶联方案包括使用DCC/HOBT形成氨基酸活性酯、然后与N-Boc-氨基异丁酸反应，此方案提供式IIX二肽酸。
在标准酸性条件下如盐酸与乙酸或乙酸乙酯、三氟乙酸、四甲基碘代硅烷、氯化铝、硫酸与二氧六环和甲磺酸，可除去式IX化合物的Boc保护基。
制备式I化合物非对映体的另一种方法包括使用有手性相的色谱柱。在下文实施例部分6中可以找到该制备方法的例子。
下文合成方案IIIA和IIIB中提供了产生手性中间体的另外两种合成方案。如合成方案IIIA所述，通过与合适的保护基如Boc反应可保护光学纯芳基甘氨酸氨基酸的氨基部位。Boc保护的中间体与标准甲基化试剂如甲基碘化物的反应可产生相应的酚的甲基醚。通过采用标准偶合技术用胺如二甲基胺、吡咯烷或4-甲基哌啶偶合可制备酰胺(carboxamide)。本发明优选的偶合剂是二乙基氰基正膦(DECP)、三乙基胺和0℃的胺。在标准酸性条件下可除去Boc保护基，用三氟乙酸是优选的。通过游离胺与1，4-二硝基咪唑反应可制备所需4-硝基咪唑化合物以获得光学纯化合物(经手性HPLC测定可知)。这些手性中间体按合成方案I和II中所描述的方法来制备以提供非对映体纯的产品。例如，合成方案IIIA或IIIB中所述的手性硝基咪唑可在标准条件下还原，如用钯催化剂氢化以提供相应的手性氨基中间体II。这些中间体随后与上文合成方案II中的式III化合物偶合产生手性中间体，它可被脱保护为非对映体纯的式Ia化合物。
合成方案IIIA手性合成D-苯基甘氨酸咪唑亚单位 合成方案IIIB手性合成L-苯基甘氨酸咪唑
在下文实施方案IV中提供制备本发明化合物的其它方法和相应的合成方案合成方案IV 可方便地筛选式I化合物的生长激素促分泌活性。典型的分析可使用在培养基中移植生长的脑垂体细胞，使其与各种式I化合物接触，然后相应地测定生长激素水平。生长水平可以用本领域技术人员已知的各种放射性免疫分析技术计算。筛选化合物生长激素促分泌活性可方便地按比例放大后用于大规模筛选。
本发明进一步包括使用由式I定义的化合物可药用盐的方法。尽管通常是中性的，但本发明化合物可能具有充足的酸性、充足的碱性或两性官能团，并因此可与许多无机碱和无机及有机酸反应形成可药用盐。
在本文中，术语“可药用盐”指对活生物体基本上无毒的式I化合物的盐。有代表性的可药用盐包括那些通过将本发明化合物与可药用无机或有机酸或无机碱反应制备的盐。已知所述盐称作酸加成盐和碱加成盐。
通常用于形成酸加成盐的酸是无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸等等和有机酸如对甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸、乙酸等等。所述可药用盐的实例为硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、酸式亚硫酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、富马酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、羟乙酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐、mesylate等。优选的可药用酸加成盐是那些与无机酸如盐酸和氢溴酸形成的盐和那些与有机酸如马来酸和甲磺酸形成的盐。
胺盐也可以包括其中氨基携带适宜的有机基团如烷基、链烯基、链炔基或芳烷基部分的季铵盐。
碱加成盐包括那些由无机碱如铵或碱金属或碱土金属的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等产生的盐。因此，用于制备本发明盐的碱包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙、碳酸钙等。钾盐和钠盐形式是特别优选的。
应该承认，形成本发明任何盐部分的特定反离子(counterion)不是关键性的，只要盐整体是可药用的并且只要反离子不使盐整体产生不需要的特性。
本发明进一步包含使用式I化合物可药用溶剂化物的方法。很多式I化合物可以与溶剂如水、甲醇、乙醇和乙腈结合形成可药用溶剂化物如相应的水合物、甲醇化物、乙醇化物和乙腈化物。
本发明也包含使用式I化合物可药用前体药的方法。前体药物是一种经过化学修饰并且在其作用部位可能不具有生物活性，但是可通过一种或多种酶或其它体内方法降解或改变为母体化合物的生物活性形式的药物。所述前体药物应该具有与母体不同的药动学特性，因此能够更容易地透过粘膜上皮吸收、更好地成盐或溶解或改善系统稳定性(例如，血浆半衰期增加)。
典型地，所述化学修饰包括1)、可通过酯酶或脂肪酶裂解的酯或酰胺衍生物；2)、可通过特异性或非特异性蛋白酶识别的肽；或3)、通过膜对前体药物形式或被修饰前体药物形式的选择而在作用部位蓄积的衍生物；或上述1-3的组合。例如，在H，Bundaard，Design of Prodrugs，(1985)中描述了选择和制备适宜的前体药物衍生物的常规方法。
在本文中，术语“有效量”指能够通过降低内源性生长激素水平抑制、减轻、改善、治疗或预防哺乳动物包括人其它症状的本发明化合物的量。
“可药用制剂”指载体、稀释剂、赋形剂和盐，它们必须是可与制剂中活性组分(式I化合物)相容的，并且是对其受体无害的。药物制剂可通过本领域已知的方法制备。例如，本发明化合物可与普通赋形剂、稀释剂或载体一起配制并制成片剂、胶囊剂等。适用于该制剂的赋形剂、稀释剂和载体的实例包括下列物质填充剂和填料如淀粉、糖、甘露糖醇和硅的衍生物；粘合剂如羧甲基纤维素和其它纤维素衍生物，藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；润湿剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；延迟溶解剂如石蜡；促吸收剂如季铵化合物；表面活性剂如鲸蜡醇、甘油单硬脂酸酯；吸附载体如高岭土和膨润土；和润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、和固态聚乙二醇。最后的药物形式可以是丸剂、片剂、粉剂、锭剂、糖浆剂、气雾剂、小药袋、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳浊液、软膏、栓剂、灭菌注射液或灭菌粉针剂等，这依赖于所使用的赋形剂的类型。
因此，本发明化合物非常适用于配制成持续释放的剂型。所配制的剂型也可以制成仅仅或优选过一段时间后在特定部位的肠道释放活性组分。所配制的制剂应当包括包衣、包封或保护材料，这些材料可由聚合物或蜡制得。
另外，本文公开的生长激素促分泌化合物可以与本领域已知的其它生长激素促分泌剂一起，和/或与合适的骨抗吸收剂一起给予需要治疗的病人来预防或治疗骨质疏松和/或肌力丧失。所述合适的骨抗吸收剂包括选择性的雌激素受体调节剂、二磷酸酯(bisphophonate)、降钙素、激素替代治疗剂。另外，PTH可以与所述生长激素促分泌剂一起给药。所述组合治疗可以同时给药或先后给药。
式I化合物的合适剂量范围包括0.01μg/kg/天至60mg/kg/天。
本发明也涉及用于调节心功能的方法，该方法包括包括给予式I化合物。
本发明进一步涉及通过给予需要治疗动物有效量的式I化合物来治疗或预防充血性心衰的方法。
本发明另外还涉及含有单一生长激素促分泌剂或与其它可用于治疗或预防充血性心衰的治疗剂组合的药物制剂。
1998年8月19日申请的标题为“用生长激素促分泌剂治疗充血性心衰”的未决美国专利申请09/137255中描述了应用生长激素促分泌剂化合物来调节心功能和治疗或预防充血性心衰，该文献全文引入本文供参考。
本发明治疗、抑制或预防哺乳动物包括人充血性心衰症状或疾病所需要的化合物的特定剂量将依赖于特定疾病、症状和严重性。剂量、给药途径和给药频率最好由主治医师决定。通常，公认并有效的剂量为15mg-1000mg，并更优选15mg-80mg。该剂量将以每天1-3次或发挥功效所需要次数给予需要治疗的病人。
下面提供包含式I化合物的有代表性药物制剂。提供下列制剂的目的是为了说明并不打算以任何方式限制本发明。制剂中总活性组分占该制剂质量的0.1％-99.9％。术语“活性组分”指式I化合物。制剂1制备包含下列组分的硬胶囊量组分 (mg/胶囊)活性组分30.0淀粉305.0硬脂酸镁5.0将上述组分混合并以340mg的剂量填充到硬明胶胶囊中。
制剂2用下列组分制备片剂量组分(mg/片剂)活性组分 25.0微晶纤维素 200.0胶态二氧化硅 10.0硬脂酸 5.0将各组分混合并压片，每片重240mg。
制剂3制备包含下列组分的干粉吸入剂组分 重量％活性组分5乳糖95将活性组分与乳糖混合并将该混合物加到干粉吸入器中。
制剂4制备如下各包含30mg活性组分的片剂量组分(mg/片剂)活性组分 30.0mg淀粉 45.0mg微晶纤维素35.0mg聚乙烯吡咯烷酮(10％的水溶液)4.0mg羧甲基淀粉钠 4.5mg硬脂酸镁 0.5mg滑石粉1.0mg总量 120mg
活性组分、淀粉和纤维素通过20目美国筛并完全混合。聚乙烯吡咯烷酮溶液与所得到的粉末混合，然后通过16美国目筛。将如此制备的颗粒在50-60℃下干燥并通过16目美国筛。羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉线通过30目美国筛，然后加到上述颗粒中，混合后，在压片机上压片，得到每片重120mg的片剂。
制剂5制备如下各包含40mg药物的胶囊剂量组分 (mg/胶囊)活性组分 40.0mg淀粉 109.0mg硬脂酸镁 1.0mg总量 150.0mg将活性组分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合，通过20目美国筛并以150mg的剂量填充到硬明胶胶囊中。
制剂6制备如下各包含25mg活性组分的栓剂组分 量活性组分 25mg饱和脂肪酸甘油酯 2000mg活性组分通过60目美国筛并悬浮在预先用必要的微热熔化的饱和组分甘油酯中。然后将该混合物倾入标示2.0g容积的栓剂模子中并放置冷却。
制剂7如下制备每5.0ml剂量各自含有50mg药物的悬浮剂组分量活性组分 50.0mg黄原胶 4.0mg羧甲基纤维素钠(11％)微晶纤维素(89％) 50.0mg蔗糖 1.75mg苯甲酸钠 10.0mg香料和着色剂 适量纯水 加到5.0ml将药物、蔗糖和黄原胶混合，过10号筛目的美国筛并与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素水溶液混合。用一部分水稀释苯甲酸钠、香料和着色剂并在搅拌下加入。然后加入足量的水以产生所需体积。
制剂8如下制备各自含有15mg药物的胶囊组分 量(mg/胶囊)活性组分 15.0mg淀粉 407.0mg硬脂酸镁 3.0mg总量 425.0mg将活性组分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合，过20号筛目的美国筛并填充到425mg量的硬明胶胶囊中。
制剂9可如下制备静脉注射制剂组分 量活性组分250.0mg等渗盐水1000ml
制剂10可如下制备局部使用的制剂组分 量活性组分1-10g乳化蜡 30g液体石蜡20g白色软的石蜡加到100g加热白色软石蜡使其熔化。与液体石蜡和乳化蜡并搅拌溶解。加入活性组分并继续搅拌直到分散。然后冷却混合物直到固化。
制剂11可如下制备各自含有10mg活性组分的舌下片或颊含片组分量/片活性组分 10.0mg甘油 210.5mg水 143.0mg柠檬酸钠 4.5mg聚乙烯醇 26.5mg聚乙烯吡咯烷酮 15.5mg总量 410.0mg通过连续搅拌并保持在约90℃的温度使甘油、水、柠檬酸钠、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮混合在一起。聚合物已经加入溶液中时，将溶液冷却到约50-55℃并慢慢混合药物。将均匀混合物倾入由惰性材料制备的模具中以产生含有药物的扩散基料，其厚度约2-4mm。然后，将该基料切成有合适尺寸的单个片剂。
本发明方法中采用的另一种制剂是透皮释放装置或贴剂。可使用此透皮贴剂以控制量来连续或断续输入本发明化合物。用于释放药物活性剂的透皮贴的制备和使用在本领域中是公知的。如参见美国专利5023252，其中所公开的内容引入本文供参考。此贴剂可以制成连续、脉动或按需释放药物活性剂的。
一般来说，将药物组合物直接或间接引入脑中是理想的或需要的。直接技术通常包括将药物释放导管置于主体脑室系统以绕过血脑屏障。美国专利5011472中描述了一种可植入的释放系统，用于将生物因子转运到人体的特定解剖区域，所述文献公开的内容引入本文供参考。
间接技术(一般来说是优选的)通常包括将亲水药物转化为脂溶性药物或药物前体来配制使药物潜伏化的组合物。潜伏化通常是通过阻滞存在于药物上的羟基、羰基、硫酸根和伯胺基团以使药物更为脂溶并可转运过血脑屏障来完成的。另外，通过动脉内输注高渗溶液增强亲水药物的释放，高渗溶液可瞬间打开血脑屏障。
下列实施例和制备例用来举例说明本发明化合物合成中所使用的方法。如同本领域技术人员理解的那样，其它合成方案可用于制备本发明的化合物。实施例实施例1制备化学中间体实施例1A制备例1A 在室温并在搅拌下，向叔丁氧基羰基-O-苄基(boc-OBz)-D-Ser-OH(25.0g，84.7mmol)的无水N，N-二甲基甲酰胺(500ml)中加入碳酸氢钠(14.2g，169mmol)，然后加入碘甲烷(26.4ml，424mmol)。18小时后，浓缩反应混合物至大约100ml。加入乙酸乙酯并用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤该反应混合物。将有机提取液干燥并浓缩得到上述产物(25g，96％)的淡黄色油状物1H NMR(300MHz，CDCl3)d1.45(s，9H)，3.70(m，1H)，3.75(s，3H)，3.85(m，1H)，4.50(m，3H)，7.30(m，5H)；MS(FD)m/e 310；分析计算值C16H23NO5C，62.12；H，7.49；N，4.53.实测值C，62.31；H，7.49；N，4.43.
制备例1B 在0℃并在搅拌下，向制备例1A化合物(5.0g，16mmol)的二氯甲烷(25ml)[或者40ml？]和苯甲醚(1ml)溶液中加入三氟乙酸。在室温下4小时后，加入饱和碳酸氢钠溶液并用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤合并的有机提取液，用硫酸钠干燥并浓缩。上述粗品不必进一步纯化即可在下一步中使用。
制备例1C 在0℃并在搅拌下，向制备例1B中化合物(65.4mmol)、boc-α-氨基异丁酸(13.2g，65.4mmol)、1-羟基苯并三唑(8.8g，65.4mmol)和N，N-二异丙基乙胺(22.8ml，130.7mmol)的二氯甲烷(500ml)溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(12.3g，71.9mmol)。18小时后，然后加入乙酸乙酯和饱和氯化铵并用氯化铵、碳酸氢钠和盐水提取该混合物。将有机提取液用硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶色谱层析(25％乙酸乙酯/己烷)纯化得到上述产物(21.6g，83％)的白色油状物1H NMR(300MHz，CDCl3)d 1.39(s，9H)，1.48(s，6H)，3.62(dd，J＝3.4，9.1Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.85(dd，J＝3.4，9.1Hz，1H)，4.48(dd，J＝12.5，22.7Hz，2H)，4.75(m，1H)，4.92(s，1H)，7.11(d，J＝8.6Hz，1H)，7.35(m，5H)；MS(FD)m/e 395；分析计算值C20H30N2O6C，60.90；H，7.67 ；N，7.10.实测值C，61.02 ；H，7.78；N，7.10.
制备例1 在室温并搅拌下，向制备例1C化合物(5.30g，13.4)的二噁烷(100ml)/水(50ml)溶液中加入氢氧化锂(2.80g，67.3mmol)。18小时后，加入水并浓缩溶液。用乙醚提取所得到的混合物。将氯化钠加到水层并用1N HCl调至pH3.5。用乙酸乙酯提取所得到的混合物并用硫酸钠干燥合并的有机提取物，然后浓缩得到上述产物(4.40g，86％)的白色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)d 1.39(s，9H)，1.45(s，3H)，1.47(s，3H)，3.68(m，1H)，3.95(m，1H)，4.54(s，2H)，4.70(m，1H)，5.51(bs，1H)，7.18(d，J＝9.1Hz，1H)，7.25(m，5H)，9.90(bs，1H)；MS(FD)m/e 381；分析计算值C19H28N2O6C，59.99；H，7.42；N，7.36.实测值C，59.74；H，7.26；N，7.30.
实施例1B制备例2A 通过在3小时内，将钠金属(52.89g，2.3007mol)加到乙醇(1500ml)中产生乙醇钠溶液。在室温下，向乙醇钠溶液中加入溶解在乙醇(225ml)中的二乙基乙酰丙二酸酯(499.75g，2.3007mol)溶液。将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。然后用15分钟的时间加入1-溴-3-苯基丙烷(458.07g，2.3007mol)并将反应混合物回流直至通过HPLC测定反应结束(16小时)。将反应混合物浓缩至干并将残渣在乙酸乙酯(1×1500ml和2×500ml)和水(1500ml)之间分配。合并乙酸乙酯层，用饱和氯化钠溶液(4×500ml)洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩得到752.1g(98％)上述产物的淡黄色固体将1.0g样品从己烷∶乙酸乙酯(19∶1，v/v)中重结晶得到mp84-86℃。1H nmr(CDCl3)δ1.18-1.23(t，6H)，1.37-1.50(m，2H)，2.02(s，3H)，2.34-2.41(m，2H)，2.58-2.62(t，2H)，4.16-4.24(q，4H)，6.76(s，宽峰，1H)，7.11-7.28(m，5H).13C nmr(CDCl3)δ13.95，23.03，25.67，31.85，35.45，62.46，66.49，125.40，125.90，128.27，128.35，141.77，168.11，168.94.MS(FIA)m/z 336.3([M+H]+).IR(KBr，cm-1)1645.98(酰胺)，1744.76(C＝O).分析计算值C18H25NO5C，64.46；H，7.51；N，4.17.实测值C，64.60；H，7.37；N，4.39.
制备例2B 将制备例2A产物(249.15g，0.7428mol)和2.5N氢氧化钠溶液组成的淤桨在100℃下加热3小时。将反应混合物冷却至30℃并且如果需要，用浓盐酸保持pH在5.0直至通过HPLC测定反应结束。将溶液趁热通过硅藻土过滤。滤液冷却至5-10℃并且用浓盐酸调至pH1.0。将所得到的淤桨在5℃下搅拌1小时、过滤并在50℃下真空干燥，得到160.34g(92％)上述产物(DL)-N-乙酰基-2-氨基-5-苯戊酸的白色粉末，mp145-148℃。
1H nmr(DMSO-d6)δ1.60-1.71(m，4H)，1.86(s，3H)，2.56-2.59(m，2H)，4.19-4.23(m，1H)，7.16-7.30(m，5H)，8.14(d，1H).13C nmr(DMSO-d6)δ23.17，28.25，31.55，35.51，52.55，126.60，129.14，142.64，170.25，174.65.MS(FIA)m/z 236.2(M+).IR(KBr，cm-1)1609.17(酰胺)，1741.12(C＝O).分析计算值C13H17NO3C，66.36；H，7.28；N，5.95.实测值C，66.41；H，7.15；N，5.96.
制备例2C 将(DL)-N-乙酰基-2-氨基-5-苯戊酸(制备例2B)(438.0g，1.862mol)、氯化钴(1.10g)、2N氢氧化钾溶液(931ml，1.862mol)和水(8000ml)的组成溶液通过加入2N氢氧化钾溶液调至pH8.0。向该反应混合物中加入酰基转移酶I(aspergillus melleus，39.42g)，然后在40℃下剧烈搅拌24小时，同时通过加入2N氢氧化钾保持pH8.0。过滤所得到的淤桨。调节滤液至pH2.0得到粘稠的淤桨。通过过滤分离产物，用己烷(2000ml)洗涤并在50℃下真空干燥，得到188.52g(43％)上述产物，(D)-N-乙酰基-2-氨基-5-苯戊酸1H nmr(DMSO-d6)δ1.59-1.74(m，4H)，1.86(s，3H)，2.57-2.60(m，2H)，4.22-4.26(m，1H)，7.16-7.30(m，5H)，8.02(d，1H)，12.39(s，宽峰，1H).13C nmr(DMSO-d6)δ23.18，28.13，31.66，35.54，52.58，126.56，129.10，142.67，170.12，174.48.MS(FIA)m/z 236.1(M+).IR(KBr，cm-1)1625.08(酰胺)，1700.24(C＝O).分析计算值C13H17NO3C，66.36；H，7.28；N，5.95.实测值C，66.49；H，7.00；N，6.03.
制备例2D 将(D)-N-乙酰基-2-氨基-5-苯戊酸(制备例2C)(188.8g，0.8024mol)、乙醇(535ml)和浓盐酸(268ml，3.21mol)组成的溶液温热至85℃。在14.5小时时，通过HPLC测定反应未结束，然后再加入浓盐酸(50ml)。在22.5小时后，通过HPLC测定该反应结束。随后，通过连续加入和蒸馏8000ml乙醇，从反应物中共沸蒸馏出水。通过连续加入和蒸馏乙酸乙酯(2000ml)，从反应物中共沸蒸馏出乙醇。当溶液冷却至0℃时，产物结晶。将包含产物的溶液在0℃下搅拌1小时、过滤并将滤饼在40℃下真空干燥，得到199.0g(96％)上述产物，2-氨基-5-苯戊酸乙酯盐酸盐(mp117-121℃)。
1H nmr(DMSO-d6)δ1.15-1.21(t，3H)，1.50-1.89(m，4H)，2.48-2.67(m，2H)，3.92-3.98(t，1H)，4.08-4.25(m，2H)，7.12-7.29(m，5H)，8.76(s，宽峰，3H).13C nmr(DMSO-d6)δ13.90，25.97，29.52，34.41，51.71，61.56，124.91，125.81，128.24，141.27，169.35.MS(FIA)m/z 222.3(M+).IR(KBr，cm-1)1741.14(C＝O).[α]20D＝-11.17(c＝30.62mg/3mL，MeOH).分析计算值C13H20NO2ClC，60.58；H，7.82；N，5.43.实测值C，60.45；H，7.67 ；N，5.55.
制备例2E 将N-t-BOC-α-氨基异丁酸(90.64g，0.446mol)、2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(75.9g，0.425mol)、N-甲基吗啉(88.13g，0.87lmol)和乙醚(1000ml)组成的淤桨在室温下搅拌直至通过HPLC测定反应结束(3小时)。加入D-2-氨基-5-苯戊酸乙酯盐酸盐(制备例2D)(109.55g，0.425mol)并将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物在10％柠檬酸溶液(1000ml)和乙酸乙酯(3×500ml)之间分配。用10％柠檬酸溶液(3×500ml)、饱和碳酸氢钠溶液(3×500ml)、水(1×500ml)洗涤有机相，用硫酸钠干燥并浓缩至干。将残渣从己烷(3000ml)中重结晶，得到155.11g上述产物mp 97-99℃。1H nmr(CDCl3)δ1.25-1.28(t，3H)，1.43(s，9H)，1.48(s，3H)，1.50(s，3H)，1.70-1.73(m，3H)，1.87-1.93(m，1H)，2.62-2.67(m，2H)，4.16-4.21(m，2H)，4.57-4.62(m，1H)，4.95(s，1H)，6.96(s，宽峰，1H)，7.16-7.19(m，3H)，7.26-7.33(m，2H).13C nmr(CDCl3)δ14.53，26.32，27.17，28.67，32.47，35.73，52.54，57.17，61.62，126.21，128.69，128.79，142.12，154.99，172.81，174.69.MS(FIA)m/z 407.5([M+H]+).IR(KBr，cm-1)1652.75，1685.52(酰胺)，1741.73(C＝O).[α]20D＝7.83(c＝10.22 mg/1mL，MeOH).UV(0.1％三氟乙酸水溶液∶乙腈)λmax215.6 nm.分析计算值 C22H34N2O5C，65.00；H，8.43；N，6.89.实测值C，65.23；H，8.34；N，6.94.
制备例2 将制备例2E产物(152.53g，0.3752mol)和四氢呋喃(884ml)组成的溶液冷却至5℃。将氢氧化锂(26.96g，1.126mol)和水(1419ml)组成的溶液用10分钟的时间滴加到该反应物中，同时保持温度在5-10℃。加入乙醇(183ml)并将该反应物在5-10℃下搅拌直至通过HPLC测定反应结束(2小时)。然后用6N盐酸溶液调节反应混合物至pH2.0同时保持5-10℃。用乙酸乙酯(3×500ml)从溶液中提取产物。合并乙酸乙酯提取液，用硫酸钠干燥并浓缩至干，得到141.51g(100％)上述产物1H nmr(DMSO-d6)δ1.32-1.37(m，15H)，1.57-1.75(m，4H)，2.51-2.58(m，2H)，4.23-4.27(m，1H)，6.85(s，宽峰，1H)，7.15-7.28(m，5H)，7.42(d，1H)，12.5(s，broad，1H).13C nmr(DMSO-d6)δ26.31，27.85，29.00，31.86，35.60，52.53，56.60，78.95，126.52，129.05，129.10，142.69，155.06，174.40，175.17.MS(FIA)m/z379.5([M+H]+).IR(KBr，cm-1)1641.98，1692.22(酰胺)，1719.72(C＝O). [α]20D＝-5.73(c＝10.48mg/1mL，MeOH).分析计算值C20H30N2O5C，63.47；H，7.99； N，7.40.
实测值C，63.25；H，7.84； N，7.46.
实施例1C制备例3A 在室温并搅拌下，向α-溴苯乙酸(100g，466mmol)的无水乙醇(500ml)溶液中加入对甲苯磺酸一水合物(10g，53mmol)。将该溶液加热回流并在8小时后浓缩至干。所得到的残渣溶解在乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到77g(68％)上述产物的橙色油状物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)241.9，243.9。
制备例3 在搅拌下，向氢化钠(60％矿物油的分散体l3.6g，341mmol)的N，N-二甲基亚砜(240ml)淤桨中小心地加入4-硝基咪唑(38.6g，341mmol)，在加入过程中保持温度低于40℃。将所得到的该淤桨搅拌1小时，然后冷却至5℃。以使反应温度保持在低于20℃的速度向该反应混合物中缓慢加入制备例3A(76g，310mmol)。4小时后，将反应物浓缩并随后用乙酸乙酯提取。将合并的有机提取液过滤，用水。盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得到的残渣通过硅胶色谱层析纯化(甲醇/氯仿梯度)，得到60.1g(70％)上述产物的白色固体1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)275(M+)；分析计算值C，56.73；H，4.73；N，15.27。实测值C，56.48；H，4.78；N，15.08。
实施例1D制备例4A 向4-甲氧基苯乙酸(98g，590mmol)的无水乙醇(300ml)溶液中加入对甲苯磺酸盐(20g，105mmol)。将该反应混合物加热回流并在该温度下保持5小时，然后冷却至室温并浓缩至干。所得到的油状物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，20％乙酸乙酯/己烷)，得到102g(89％)上述产物的无色油状物
1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝8.7Hz，3H)，3.56(s，2H)，3.73(s，3H)，4.05(q，J＝7.2Hz，2H)，6.87(d，J＝8.7Hz，2H)，7.17(d，8.7Hz，2H)；MS(离子色谱)195.3(M+1)；分析计算值C11H14O3C，68.02；H，7.27.实测值C，67.95，7.17.
制备例4B 向制备例4A产物(40g，200mmol)的四氯化碳(500ml)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(37g，206mmol)和氢溴酸(4滴48％的水溶液)。将反应混合物加热至回流并在该温度下保持5小时，然后冷却至室温，过滤并浓缩。所得到的油状物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿)，得到51.1g(94％)上述产物的无色油状物1H-NMR(d，DMSO)1.19(t，J＝8.4Hz，3H)，3.77(s，3H)，4.18(m，2H)，5.88(s，1H)，6.95(d，J＝8.4Hz，2H)，7.50(d，J＝8.4Hz，2H)； MS(FD)272，274(M+)；分析计算值C11H13BrO3C，48.37；H，4.80.实测值C，48.52，4.77.
制备例4
在室温并搅拌下，向制备例4B产物(49.5g，181mmol)的二甲基亚砜(500ml)溶液中加入4-硝基咪唑(20.5g，181mmol)和碳酸钾(75g，543mmol)。16小时后，将反应混合物过滤并浓缩。将所得到的油状物在乙酸乙酯和水之间分配并用乙酸乙酯提取。合并的淤桨提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得到的油状物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，30-70％乙酸乙酯/己烷梯度)，得到33.6g(61％)在放置过程中固化的上述产物的橙色油状物1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝7.2Hz，3H)，3.78(s，3H)，4.25(q，J＝7.2Hz，2H)，6.57(s，1H)，7.02(d，J＝8.7 Hz，2H)，7.46(d，J＝8.7 Hz，2H)，7.92(s，1H)，8.38(s，1H)；MS(离子色谱)306(M+1)；分析计算值C14H15N3O5C，55.08；H，4.95；N，13.76.实测值C，54.93；H，4.89；N，13.82.
实施例1E制备例5A 向10％披钯碳(6.0g)的淤桨中加入制备例4产物(8.4g，27.5mmol)的四氢呋喃(30ml)淤桨。利用Parr装置，将反应混合物在氢环境下(40mm Hg)放置，直至反应结束。然后通过硅藻土过滤反应混合物。在室温搅拌下，向所得到的溶液中加入制备例1产物(10.5g，27.5mmol)、1-羟基苯并三唑(4.1g，30.3mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(6.3g，30.3mmol)。16小时后，浓缩反应混合物，将所得到的油状物在乙酸乙酯中形成淤桨并过滤。用水稀释该溶液，然后用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤合并的有机提取液，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得到的粗品通过闪式色谱层析纯化(硅胶，3％甲醇/氯仿)，得到14.4g(83％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.78(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.27-1.32(m，15H)，3.60(m，1H)，3.67(m，1H)，3.7 6(s，3H)，4.20(d，J＝7.2Hz，2H)，4.44(d，J＝3.0Hz，2H)，4.57(m，1H)，6.35(s，1H)，6.97(d，J＝7.2Hz，2H)，7.20-7.35(m，10H)，7.40(m，1H)，7.52(s，1H)；MS(离子色谱)638(M+1)；分析计算值C33H43N5O8C，62.15；H，6.80 ；N，10.98.实测值C，62.41；H，6.85；N，11.09.
实施例5 在室温搅拌下，向制备例5A产物(14.4g，23mmol)的二噁烷(150ml)溶液中加入氢氧化锂(0.65g，27.6mmol)的水(75ml)溶液。20分钟后，用1N盐酸酸化反应混合物至pH2.9。向所得到的溶液中加入水和乙酸乙酯。然后用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤合并的有机提取液，用硫酸钠干燥并浓缩，得到13.0g(93％)上述产物的黄色泡沫物
1H NMR(d，DMSO)1.25-1.40(m，15H)，3.65-3.70(m，2H)，3.76(s，3H)，4.44(d，J＝3.4Hz，2H)，4.57(m，1H)，6.20(s，1H)，6.97(d，J＝3.4Hz，2H)，7.15-7.35(m，10H)，7.42(m，1H)，7.53(s，1H)，10.2(s，1H)； MS(离子色谱)610.7(M+1)；分析计算值C31H39N5O8C，61.07；H，6.45；H，11.49.实测值C，60.90；H，6.43；N，11.32.
实施例1F制备例6A 在0℃和氮环境下，将制备例3产物(10.0g，36.36mmol)的DMF(50ml)溶液滴加到氢化钠(1.60g，40.00mmol)的DMF(50ml)悬浮液中。搅拌该混合物10分钟。滴加碘乙烷(2.5ml，40.00mmol)。随后，反应混合物在0℃下搅拌30分钟，在室温下搅拌1小时。将混合物用饱和碳酸氢钠溶液骤止。加入乙酸乙酯并将混合物用碳酸氢钠洗涤，再用盐水洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并真空浓缩。所得到的泡沫物通过闪式色谱层析纯化(300g二氧化硅，2∶3乙酸乙酯/己烷)，得到上述产物(8.81g，84％)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-结构一致；分析计算值C14H15N3O4；58.13 C，5.23 H，14.53 N；found 57.88 C，5.36 H，14.39 N；FDMS(M+)-289.
制备例6B 将制备例6A产物(8.35g，28.89mmol)的THF(100ml)溶液用氢氧化锂(1.82g，43.34mmol)和水(50ml)处理。在室温下搅拌该反应物30分钟。加入水并用乙醚洗涤该混合物。用10％硫酸氢钠调节水层至pH 3.0。混合物用氯化钠饱和用乙酸乙酯洗涤。合并乙酸乙酯洗涤液，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得到的粗品固体在氮环境下溶解在无水二氯甲烷(100ml)中。向该溶液中加入催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(25g)。搅拌该混合物3小时，然后真空浓缩。所得到的粗品泡沫物溶解在THF(20ml)中并滴加到在-78℃和氮环境下通过将n-BuLi(1.6M的己烷溶液，19.9ml，31.82mmol)加到(4R，5S)-(+)-4-甲基-5-苯基-2-噁唑烷酮(oxazolidinone)(5.64g，31.82mmol)的THF(50ml)溶液中产生的(4R，5S)-(+)-4-甲基-5-苯基-2-噁唑烷酮锂溶液中并搅拌20分钟；然后不必进一步纯化即可使用。
将所得到的混合物在-78℃下搅拌30分钟，然后温热至0℃。将该混合物用饱和碳酸氢钠骤止。加入乙酸乙酯和水并用碳酸氢钠和盐水洗涤该混合物。将有机层用硫酸钠干燥、过滤并真空浓缩。所得到的泡沫物提供闪式色谱层析纯化(400g二氧化硅，5％乙醚/二氯甲烷)，得到上述产物非对映异构体1(3.76g，31％)和对映异构体2(4.32g，36％)的无色泡沫物非对映异构体1-1H NMR(300 MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C22H20N4O5的分析计算值C，62.85；H，4.80；N，13.33；实测值C，60.9；H，4.64；N，12.44；FDMS(M+)-420；非对映异构体2-1H NMR(300 MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C22H20N4O5的分析计算值C，62.85；H，4.80；N，13.33；实测值C，62.41；H，4.82；N，11.92；FDMS(M+)-420。
实施例1G制备例7A 利用制备例6A的方法制备制备例7A，用制备例4产物(5.00g，16.39mmol)的DMF(25ml)溶液和氢化钠(0.72g，18.03mmol)与碘甲烷(1.12ml，18.03mmol)的DMF(25ml)溶液得到上述产物(4.81g，92％)的淡黄色泡沫物1H NMR(300 MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C15H17N3O5的分析计算值56.42C，5.37H，13.16N；实测值56.13C，5.35H，13.01N；ISMS(M+)-320。
制备例7 如制备例6B所述制备制备例7，用制备例7A产物(4.80g，15.03mmol)的THF(50ml)溶液和氢氧化锂(1.26g，30.06mmol)的水(25ml)溶液得到粗品酸。将该物质立即与无水二氯甲烷(100ml)、催化剂DMF(0.5ml)和过量草酰氯(12ml)反应，得到粗品酰基氯。然后将该粗品与THF(20ml)、n-BuLi(1.6M的己烷溶液，14.1ml，22.54mmol)和(4R，5S)-(+)-4-甲基-5-苯基-2-噁唑烷酮(4.00g，22.54mmol)的THF(50ml)溶液反应，得到上述产物非对映异构体1(2.79g，41％产率)和对映异构体2(2.80g，41％)的无色泡沫物2)非对映异构体1-1H NMR(300 MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C23H22N4O6的分析计算值61.33C，4.92H，12.44N；实测值60.92C，4.82H，12.03N；ISMS(M+)-451；1H NMR(300 MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C23H22N4O6的分析计算值61.33C，4.92H，12.44N；实测值61.57C，4.98H，12.47N；ISMS(M+)-451。
实施例1H制备例8A
如制备例4A所述，将4-三氟甲基苯基乙酸(15.0g，73.4mmol)和对甲苯磺酸(2.8g，14.7mmol)在无水乙醇(100ml)中反应，得到16.3g(95％)上述产物的无色油状物1H NMR(d，DMSO)1.18(t，J＝7.0Hz，3H)，3.80(s，2H)，4.10(q，J＝7.0Hz，2H)，7.49(d，J＝7.9Hz，2H)，7.69(d，J＝7.9Hz，2H)；MS(FD)232(M+)；C11H11F3O2的分析计算值C，56.90；H，4.77。实测值C，56.81；H，4.85。
制备例8B 如制备例4B所述，将制备例8A产物(15.8g，68.0mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(12.5g，70mmol)和48％HBr(3滴)在四氯化碳(80ml)中反应，得到19.8g(94％)上述产物的无色油状物1H NMR(d，DMSO)1.19(t，J＝7.2Hz，3H)，4.1 5-4.25(m，2H)，6.07(s，1H)，7.78(s，4H)；MS(FD)309，311(M+)；C11H10BrF3O2的分析计算值C，42.47；H，3.24。实测值C，42.38；H，3.13。
制备例8
如制备例4所述，将制备例8B产物(51.8g，167mmol)、4-硝基咪唑(18.8g，167mmol)和碳酸钾(51g，368mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(600ml)中反应，得到21.7g(38％)上述产物的橙色粘性油状物1HNMR(d，DMSO)1.19(t，J＝7.2Hz，3H)，4.26(q，J＝7.2Hz，2H)，6.80(s，2H)，7.76(d，J＝8.3Hz，2H)，7.83(d，J＝8.3Hz，2H)，8.01(s，1H)，8.51(s，1H)；MS(离子喷射)344(M+1)；C14H12F3O4的分析计算值C，48.99；H，3.52；N，12.24。实测值C，49.03；H，3.74；N，11.96。
实施例1I制备例9A 如制备例4A所述，将4-氟苯乙酸(15.0g，97.0mmol)、对甲苯磺酸(2.0g，10.5mmol)和无水乙醇(100ml)反应，得到15.4g(87％)上述产物的无色油状物1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝7.2Hz，3H)，3.66(s，2H)，4.06(q，J＝7.2Hz，3H)，7.10-7.20(m，2H)，7.25-7.35(m，2H)；MS(FD)182(M+)；C10H11FO2的分析计算值C，65.92；H，6.09。实测值C，65.67；H，5.96。
制备例9B
如制备例4B所述，将制备例9A产物(14.9g，82mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(14.9g，84.5mmol)和48％HBr(4滴)在四氯化碳(80ml)中反应，得到18.3g(85％)上述产物的无色油状物1H-NMR(d，DMSO)1.19(t，J＝7.2Hz，3H)，4.15-4.25(m，2H)，5.95(s，1H)，7.15-7.30(m，2H)，7.56-7.70(m，2H)；MS(FD)260，262(M+)；C10H10BrFO2的分析计算值C，46.00；H，3.96。实测值C，46.10；H，3.95。
制备例9 如制备例4所述，将制备例9B产物(68g，260mmol)、4-硝基咪唑(35.0g，312mmol)和碳酸钾(108g，780mmol)在二甲基甲酰胺(300ml)中反应，得到39.8g(52％)上述产物的橙色油状物1H NMR(d，DMSO)1.83(t，J＝7.2Hz，3H)，4.25(q，J＝7.2Hz，2H)，6.66(s，1H)，7.25-7.35(m，2H)，7.55-7.65(m，2H)，7.95(d，1.13Hz，1H)，8.44(d，J＝1.5Hz，1H)；MS(离子喷射)294.2(M+1)；C13H12FN3O4的分析计算值C，53.24；H，4.12；N，14.33。实测值C，53.51；H，4.07；N，14.42。
实施例1J制备例10A 如制备例5A所述，将制备例9产物(8.9g，30.3mmol)和10％披钯碳(6.0g)在四氢呋喃(120ml)中反应，然后与制备例1产物(11.4g，30mmol)、1-羟基苯并三唑(4.5g，33mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-有机碳化二亚胺(6.8g，33mmol)偶联，得到10.8g(58％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，1.25-1.35(m，15H)，3.60(m，1H)，3.70(m，1H)，4.25(q，J＝7.2Hz，2H)，4.44(d，J＝2.6Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.47(s，1H)，7.20-7.40(m，9H)，7.40-7.50(m，3H)，7.56(s，1H)，10.25(br s，1H)；MS(离子喷射)626.1(M+1)；C32H40FN5O7的分析计算值C，61.43；H，6.44；N，11.19。实测值C，61.63；H，6.42；N，11.26。
制备例10 如制备例5所述，将制备例10A产物(10.5g，17.0mmol)和氢氧化锂(0.48g，20.4mmol)在二噁烷(200ml)和水(100ml)中反应，得到10.1g(100％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.25-1.40(m，15H)，3.35(br s，1H)，3.60(m，1H)，3.70(m，1H)，4.44(d，J＝2.6Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.33(s，1H)，7.20-7.35(m，9H)，7.40-7.50(m，3H)，7.56(s，1H)，10.20(br s，1H)；MS(离子喷射)598.5(M+1)；C30H36FN5O7的分析计算值C，60.29；H，6.07；N，11.72。实测值C，60.38；H，6.29；N，11.49。
实施例1K制备例11A 如制备例4A所述，将二苯基乙酸(25.2g，119mmol)和对甲苯磺酸(3.3g，17mmol)在无水乙醇(250ml)中反应，得到25.4g(89％)上述产物的黄色油状物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)240.1(M+)；C16H16O2的分析计算值C，79.97；H，6.71。实测值C，79.75；H，6.59。
制备例11B 如制备例4B所述，将制备例11A产物(18.0g，75.0mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(13.7g，77.25mmol)和48％HBr(4滴)在四氯化碳(80ml)中反应，得到22.56g(94％)上述产物的黄色油状物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)318，320(M+)；C16H15BrO2.0.05盐酸的分析计算值C，60.21；H，4.74。实测值C，59.50；H，4.75。
制备例11 在室温搅拌下，向氢化钠(2.42g，60.5mmol)的二甲基甲酰胺(200ml)淤桨中加入4-硝基咪唑(6.9g，60.5mmol)。10分钟后，加入制备例11B产物(17.62g，55.0mmol)。16小时后，浓缩反应混合物并将残渣在乙酸乙酯中形成淤桨，然后过滤。所得到的油状物在乙酸乙酯和水之间分配，然后用乙酸乙酯提取。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得到的油状物吸收在硅胶上并通过闪式色谱层析纯化(硅胶，30-50％乙酸乙酯/己烷)，得到12.0g(62％)上述产物的黄色粘性油状物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)351(M+)。
实施例1L制备例12A 如制备例3所述制备制备例12A，用制备例11产物(11.03g，31.39mmol)的DMF(50ml)溶液与氢化钠(1.25g，31.39mmol)和碘甲烷(1.9ml，31.39mmol)的DMF(50ml)溶液得到上述产物(10.25g，89％)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与下列结构是一致的C20H19N3O4的分析计算值65.75C；5.26H；11.50N。实测值63.84C；5.16H；10.94N；ISMS(M+)-336。
制备例12 如制备例6B所述制备制备例12，用制备例12A产物(10.20g，27.92mmol)的THF(100ml)溶液和氢氧化锂(2.34g，55.84mmol)的水(50ml)溶液得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(150ml)中并与催化剂DMF(0.5ml)和过量草酰氯(23ml)反应。所得到的粗品泡沫物溶解在THF(50ml)中并与n-BuLi(1.6M的己烷溶液，25.1ml，40.28mmol)、(4R，5S)-(+)-4-甲基-5-苯基-2-噁唑烷酮(7.14g，40.28mmol)和THF(150ml)反应，得到上述产物对映异构体1(6.21g，45％产率)和对映异构体2(6.20g，45％产率)的无色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的C28H24N4O5的分析计算值66.93C；4.99H；11.56N。实测值65.32C；5.06H；10.66N；ISMS(M+)-4971H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的C28H24N4O5的分析计算值66.93C；4.99H；11.56N。实测值65.05C；4.92H；10.61N；FDMS(M+)-497。
实施例1M制备例13A 将2-萘乙酸(49.37g，265.0mmol)和亚硫酰氯(80ml)的四氯化碳(55ml)悬浮液加热回流20分钟，此时所有物质都进入溶液中。将该反应物冷却至室温。加入四氯化碳(125ml)、N-溴琥珀酰亚胺(56.60g，318.0mmol)和氢溴酸(48％的溶液，催化剂，0.5ml)。将该混合物加热回流30分钟，冷却至室温，过滤并真空浓缩。所得到的物质再溶解在二氯甲烷(200ml)中并滴加过量的乙醇(100ml)。将该混合物在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。粗品物质进行色谱层析(700g二氧化硅，30％乙酸乙酯/己烷)。得到粗品黄褐色固体。将该粗品物质溶解在二甲基甲酰胺(200ml)中并加入4-硝基咪唑(29.78g，263.5mmol)和碳酸钾(72.70g，526.8mmol)。将反应物在室温下搅拌，然后真空浓缩至100ml。加入乙酸乙酯和水并用碳酸氢钠和盐水洗涤该混合物。有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩。粗品物质进行色谱层析(1.0kg二氧化硅，30％乙酸乙酯/己烷)，得到上述产物(制备例13A)(40.2g，47％)的棕色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的C17H15N3O4的分析计算值62.76C；4.65H；12.92N。实测值60.54C；4.35H；12.04N；ISMS(M+)-326。
制备例13 如制备例6A所述制备制备例13，用制备例13A产物(13.9g，42.65mmol)的DMF(50ml)溶液与氢化钠(1.71g，42.65mmol)和碘甲烷(2.64ml，42.65mmol)的DMF(50ml)溶液得到上述产物(10.94g，77％)的淡黄色油状物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的C18H17N3O4的分析计算值63.71C；5.05H；12.38N。实测值63.80C；4.98H；12.41N；ISMS(M+)-340。
实施例1N制备例14 将制备例7产物对映异构体1(1.00g，2.22mmol)的THF(50ml)溶液加到氢氧化锂(0.10g，2.44mmol)的水(25ml)溶液中。所得到的混合物在室温下搅拌30分钟。加入水并用乙醚洗涤该混合物。用10％硫酸氢钠水溶液调节水层至pH3.0。该混合物用氯化钠饱和并用乙酸乙酯洗涤。合并乙酸乙酯洗涤液，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得到的粗品固体在氮环境下溶解在无水二氯甲烷(50ml)中。向该溶液中加入催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)。将该混合物搅拌3小时，然后真空浓缩。
所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并冷却至0℃。加入4-二甲基氨基丙基吡啶(催化剂，10mg)和4-甲基哌啶(0.34ml，2.71mmol)并将所得到的溶液搅拌18小时。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中，用碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空干燥。粗品泡沫物通过闪式色谱层析纯化(二氧化硅，100g，5％甲醇/二氯甲烷)，得到上述产物(0.38g，50％产率)的无色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构式一致分析计算值 C19H24N4O4；61.28 C，6.50 H，15.05 N；实测值61.38 C，6.40 H，15.11 N；FDMS (M+)-372.
实施例10制备例15A 将1-萘乙酸(9.3g，50mmol)的四氯化碳(35ml)溶液中加入亚硫酰氯(14.4ml，200mmol)。将该反应物加热回流。30分钟后，反应混合物冷却至20℃，然后加入N-溴琥珀酰亚胺(8.9g，50mmol)和48％HBr的四氯化碳溶液(8滴)。将反应物加热回流并在30分钟后，冷却至室温，过滤并浓缩。将所得到的油状物在0℃下加到无水乙醇中，然后浓缩。残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，3％乙酸乙酯/己烷)，得到12.6g(86％)上述产物的油状物1H NMR与结构是一致的。
制备例15B 在室温搅拌下，向氢化钠(1.6g，40mmol)的二甲基甲酰胺(50ml)淤桨中加入4-硝基咪唑(4.5g，40mmol)。反应物冷却至0℃，然后加入制备例15A产物(11.8g，40mmol)。然后，该混合物缓慢地温热至室温。将该混合物倾入冰/水混合物中并用乙酸乙酯提取。将合并的有机提取液用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，40％乙酸乙酯/己烷)，得到6.03g(50％)上述产物的油状物1H NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)325.1(M+1)；C17H15N3O4·0.37H2O的分析计算值C，61.50；H，4.78；N，12.66。实测值C，61.46；H，4.60；N，12.73。
制备例15C 向10％披钯碳(0.6g)的四氢呋喃淤桨中加入制备例15B产物(1.28g，4.0mmol)的四氢呋喃(20ml)溶液。将该混合物在Parr装置中，在氢环境下反应3小时，随后通过硅藻土过滤。向该溶液中加入制备例1产物(1.5g，3.96mmol)，1-羟基苯并三唑(0.59g，4.35mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.9g，4.35mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液。16小时后，将该反应混合物过滤并浓缩。所得到的残渣通过上述色谱层析纯化(硅胶，氯仿-1％甲醇/氯仿梯度)，得到1.99g(77％)上述产物的橙色泡沫物1H NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)657(M+1)；C36H43N5O7的分析计算值C，65.74；H，6.59；N，10.65。实测值C，65.67；H，6.53；N，10.87。
制备例15 在室温搅拌下，向制备例15C产物(1.97g，3.0mmol)的二噁烷(20ml)溶液中加入氢氧化锂(0.08g，3.3mmol)的水(10ml)溶液。15分钟后，用1N盐酸酸化反应物至pH＝3.0并用乙酸乙酯提取。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，产率1.8g(95％)所需要产物(制备例15)。1H-NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)630(M+1)；C34H39N5O7·1.05H2O的分析计算值C，62.96；H，6.39；N，10.80。实测值C，63.09；H，6.39；N，10.40。
实施例1P制备例466 向Parr反应瓶内5％披钯碳(2.60g)和四氢呋喃(100ml)悬浮液中加入实施例2A部分制备例136产物(5.00g，15.3mmol)的固体。将反应瓶放在Parr摇动器上并在室温和氢环境(40psi)下摇动2小时。将反应物通过硅藻土521垫板过滤，然后将滤液在0℃下加到先前制备的实施例2A部分制备例产物(5.80g，15.3mmol)、1，3-二环己基碳化二亚胺(3.48g，16.9mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(2.29g，16.9mmol)的四氢呋喃(50ml)混合物中。反应物在室温下搅拌16小时，然后将溶剂减压蒸发。残渣溶解在乙酸乙酯中并将1，3-二环己基脲过滤掉。滤液通过闪式色谱层析纯化(硅胶，80％乙酸乙酯/己烷-5％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需要产物的淡黄色固体泡沫物(7.96g，80％)1H NMR与结构是一致的MS(IS)m/e 656(M+1)；C37H45N5O6的分析计算值C，67.77；H，6.92；N，10.68。实测值C，67.49；H，6.88；N，11.71。
制备例467 在室温下，向制备例466产物(8.73g，13.3mmol)的四氢呋喃(120ml)和水(60ml)溶液中加入氢氧化锂(2.23g，53.2mmol)。反应物在室温下搅拌35分钟，然后，减压蒸发四氢呋喃。残渣用水稀释并用乙醚提取(乙醚提取液弃去)。水层用1N HCl酸化(pH 2-3)，然后用乙醚和乙酸乙酯提取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩，得到不必纯化即可以进一步使用的所需产物的淡黄色固体泡沫物(8.18g，98％)1H NMR与结构是一致的MS(IS)m/e628(M+1)；C35H41N5O6的分析计算值C，66.97；H，6.58；N，11.16。实测值C，66.68；H，6.75；N，11.12。
实施例1Q制备例136
向2-萘乙酸(49.37g，265.0mmol)的四氯化碳(55ml)悬浮液中加入亚硫酰氯(80ml)。将该混合物加热回流20分钟，然后冷却至室温。加入四氯化碳溶液(125ml)、N-溴琥珀酰亚胺(56.60g，318.0mmol)和氢溴酸(48％的水溶液，0.5ml)。将反应物加热回流30分钟，冷却至室温，过滤并浓缩。所得到的物质溶解在二氯甲烷(200ml)中并滴加过量乙醇(100ml)。1小时后，浓缩反应物，并将所得到的粗品物质通过闪式色谱层析纯化(硅胶，30％乙酸乙酯/己烷)，得到黄褐色固体。将该粗品物质溶解在二甲基甲酰胺(200ml)中并加入4-硝基咪唑(29.78g，263.5mmol)。16小时后，将反应物浓缩至100ml。加入乙酸乙酯和水并将该混合物用碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥并浓缩。粗品物质通过闪式色谱层析纯化(二氧化硅，30％乙酸乙酯/己烷)，得到40.2g(47％)所需产物的棕色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C17H15N3O4的分析计算值62.76C，4.65H，12.92N；实测值60.54，4.35H，12.04NISMS(M+)-326。
实施例1R制备例74 在室温搅拌下，向制备例9化合物(17.0g，58.0mmol)的溶液中加入氢氧化钠(125ml 2N的水溶液)，同时加入四氢呋喃(10ml)和乙醇(10ml)。水解结束后，将混合物水浴冷却并用盐酸水溶液酸化至pH2.75，用乙酸乙酯提取。合并的有机提取液用水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩，得到15.0g(99％)所需羧酸。所得到的粗品物质与N，N-二甲胺水溶液(40％，9.0ml，71.8mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(7.64g，56.6mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(11.7g，56.6mmol)的四氢呋喃(150ml)溶液合并。18小时后，将混合物浓缩，残渣在乙酸乙酯中形成淤桨，过滤并将滤液浓缩。浓缩物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到10.2g(62％)所需产物ESMS(M+H)+293.1。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.21(d，1H，J＝1.51Hz)7.80(d，1H，J＝1.13Hz)，7.60-7.50(m，2H)，7.38-7.25(m，2H)，6.88(s，1H)，2.92(s，3H)。C13H13N4O3的分析计算值C，53.43；H，4.48；N，19.17。实测值C，53.43；H，4.71；N，19.07。
制备例75 将制备例74产物(2.0g，6.85mmol)与10％钯/碳(1.80g)和钯/黑(0.2g)在四氢呋喃(75ml)中合并并将该混合物在Parr装置中，在氢环境下(38 psi)摇动。还原反应结束后，通过硅藻土过滤除掉催化剂并在室温下，将所得到的溶液立即加到1，3-二环己基碳化二亚胺(1.51g，7.3mmol)、1-羟基苯并三唑(1.0g，7.3mmol)、制备例2产物(2.77g，7.3mmol)的四氢呋喃(50ml)溶液中。16小时后，将该混合物浓缩，残渣在乙酸乙酯中形成淤桨，然后过滤。将滤液浓缩，所得到的粗品产物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到3.47g(81％)所需产物ESMS(M+H)+623.5，624.6。1H NMR与产物是一致的。C33H43N6O4F·0.02CHCl3的分析计算值C，63.44；H，6.94；N，13.44。实测值C，63.04；H，7.41；N，11.93。
实施例1S制备例1L 在搅拌下，将N-甲基吗啉(4.79ml，2eq，47.3mm)加到N-Boc-a-氨基异丁酸(4.43g，21.7mm，1eq)和3.89g(21.7mm，1.0eq)2-氯-(4，6)-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT)的乙醚(100ml)淤桨中。反应混合物在室温下搅拌1.5小时后，加入D-色氨酸酯的盐酸盐。搅拌过夜后，通过加入150ml 10％枸橼酸水溶液将反应混合物骤停。分离两层并用50ml饱和碳酸氢钠水溶液和50ml水洗涤乙醚层。将氢氧化锂(2.43g，5eq)溶解在100ml水中并将该溶液加到乙醚溶液中，在室温下剧烈搅拌4小时。分离两层并用1M HCl调节水层至pH5.6。然后用10％枸橼酸溶液调节酯pH3.95，水层用100ml乙酸乙酯提取。乙酸乙酯层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并过滤。真空除掉挥发物，得到82％所需产物的白色泡沫物。1H NMR与结构是一致的。
实施例1T制备例R12-(2-萘基)乙酸乙酯 用10分钟的时间，将稳定的无水盐酸流以气泡的形式从表面下通入溶解在乙醇(1760ml)中的2-萘乙酸(251.38g，1.35mmol)溶液中。所得到的溶液在室温下搅拌直至通过HPLC测定反应结束(2小时)。将反应混合物浓缩至干。所得到的油状物溶解在乙酸乙酯(200ml)中并通过硅胶(300g)过滤，用乙酸乙酯(1400ml)洗脱产物。将滤液浓缩得到286.33g(99％)2-(2-萘基)乙酸乙酯的无色油状物。MS(FIA)m/z215.3[(M+H)+]。δ1.15-1.24(t，3H)3.81-3.86(d，2H)，4.07-4.15(q，2H)，7.41-7.55(m，3H)，7.80-7.92(m，4H)。
制备例R22-溴-2-(2-萘基)乙酸乙酯 将2-(2-萘基)乙酸乙酯(1.07g，5.0mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(0.89g，5.0mmol)、过氧化苯甲酰(0.05g)和四氯化碳(50ml)组成的溶液加热回流直至通过HPLC测定反应结束(3小时)。将反应物冷却至室温，用水(2×25ml)洗涤，用硫酸钠干燥并过滤。将滤液浓缩至干。将残渣用Biotage Flash 40M系统纯化，用己烷∶乙酸乙酯(49∶1)洗脱，得到 1.20g(82％)2-溴-2-(2-萘基)乙酸乙酯，mp 80-82℃。MS(FIA)m/z 293.0[(M+H)+]。C14H13O2Br的分析计算值C，57.36；H，4.47。实测值C，57.62；H，4.54。1H NMR(CDCl3)δ1.27-1.33(t，3H)4.18-4.36(m，2H)，5.56(s，1H)，7.52-7.55(m，2H)，7.71-7.76(m，1H)，7.82-7.92(m，3H)，7.97(s，1H)。
制备例R32-(2-萘基)-2-(4-硝基咪唑基)乙酸乙酯 将2-溴-2-(2-萘基)乙酸乙酯(384.04g，1.31mol)、4-硝基咪唑(148.13g，1.31mol)、碳酸钾(362.11g，2.62mol)和二甲基甲酰胺(2500ml)组成的黄色淤桨在室温下搅拌直至通过HPLC测定反应结束(16小时)。将反应混合物用水(2000ml)小时并用乙酸乙酯(4×500ml)提取。合并有机提取液并用饱和碳酸氢钠溶液(2×500ml)、10％枸橼酸溶液(2×500ml)、饱和氯化钠溶液(2×500ml)洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。部分(50g)粗品通过硅胶上柱色谱层析纯化，用二氯甲烷∶庚烷(16∶3)-二氯甲烷∶庚烷∶甲醇(16∶3∶0.2)梯度洗脱，得到30.99g通过HPLC测定纯度为90％的2-(2-萘基)-2-(4-硝基咪唑基)乙酸乙酯。将1克该样品用Biotage Flash 40S系统进行第二次纯化，用二氯甲烷∶庚烷∶甲醇(16.9∶3∶0.1)洗脱，得到0.9g(46％)2-(2-萘基)-2-(4-硝基咪唑基)乙酸乙酯的黄褐色油状物。MS(FIA)m/z326.4[(M+H)+]。1H NMR(CDCl3)δ1.25-1.31(t，3H)4.28-4.39(m，2H)，6.16(s，1H)，7.36-7.44(dd，1H)，7.54-7.62(m，3H)，7.84-7.90(m，3H)，7.90-7.95(m，2H)。
制备例R42-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸乙酯 将2-(2-萘基)-2-(4-硝基咪唑基)乙酸乙酯(2.04g，6.27mmol)、四氢呋喃(20ml)和10％披钯碳(2.04g)的化合物在室温和室压下氢化直至通过HPLC测定反应结束(20小时)。通过过滤除掉催化剂并用四氢呋喃(10ml)冲洗。滤液加到1-[3-(二甲基氨基)丙基-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.20g，6.27mmol)、四氢呋喃(10ml)和(2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酸(2.44g，6.27mmol)组成的淤桨中并在室温下搅拌16小时。将反应混合物在水(150ml)和乙酸乙酯(3×50ml)之间分配。合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。所得到的粗品油状物通过硅胶柱色谱层析纯化，用己烷∶乙酸乙酯∶甲醇(10∶10∶1)作为洗脱剂，得到1.72g(41％)2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸乙酯。将0.2g样品进一步用制备反向HPLC纯化，得到0.16g2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸乙酯用于分析研究。MS(FIA)m/z 667.4[(M+H)+]。分析计算C37H43N6O6的精确量[(M+H)+]＝667.3244。通过质谱测定的C37H43N6O6的精确量[(M+H)+]＝667.3254。1H NMR(CDCl3)1.25-1.42(m，19H)3.24-3.33(m，2H)，4.28-4.33(m，2H)，4.98-5.01(m，1H)，5.94(s，1H)，6.85-7.01(m，3H)，7.18-7.21(m，2H)，7.35-7.39(m，2H)，7.49-7.58(m，4H)，7.78-7.84(m，4H)，8.69(s，1H)，10.65(s，宽峰，1H)。
制备例R52-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-苯基乙酸乙酯 将2-(4-硝基咪唑基)-2-苯基乙酸乙酯还原并随后与(2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酸反应，通过用二氯甲烷∶甲醇(19∶1)作为洗脱剂进行闪式色谱层析纯化后，得到该化合物的黄色泡沫物(73％产率)。MS(FIA)m/z617.5[(M+H)+]。1H NMR(CDCl3)δ1.19-1.32(m，18H)3.10-3.12(m，1H)，3.16-3.17(m，1H)，3.32(s，1H)，4.22-4.27(m，2H)，4.69(s，宽峰，1H)，6.44(s，1H)，6.85-6.91(m，2H)，7.00(t，1H)，7.07-7.08(m，1H)，7.38-7.40(m，1H)，7.42-7.45(m，6H)，7.55-7.56(m，2H)，10.16(s，宽峰，1H)，10.75(s，1H)。
实施例2式I化合物的合成如下所述合成本发明化合物。
实施例2-1制备例EX1A 在室温搅拌下，向Parr装置内5％pd/C(0.85g)和制备例3化合物(2.13g，7.21mmol)的二噁烷(50ml)悬浮液中加入氢(g)(35psi)。4小时后，将该混合物用氮清洗，加入硅藻土，并通过硅藻土垫板过滤该溶液。在氮环境下，向所得到的滤液中加入制备例1化合物(2.74g，7.21mmol)、1-羟基苯并三唑(0.97g，7.21mmol)、N，N-二异丙基乙胺(2.5ml，14.4mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(1.36g，7.93mmol)。18小时后，加入乙酸乙酯并将该混合物用饱和氯化铵、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。将有机提取液用硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶色谱层析纯化(5％甲醇/二氯甲烷)，得到上述化合物(1.25g，29％)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)d 1.30(t，J＝6.9Hz，3H)，1.40(s，9H)，1.42(s，3H)，1.51(s，3H)，3.60(dd，J＝5.1，9.7Hz，1H)，4.05(m，1H)，4.28(m，2H)，4.54(dd，J＝14.08，26.3Hz，2H)，4.62(m，1H)，5.08(bs，1H)，5.82(s，1H)，7.12(d，J＝11.5Hz，1H)，7.35(m，12H)，9.75(bs，1H)；MS(FD)m/e607；C32H41N5O7的分析计算值C，63.29；H，6.80；N，11.52。实测值C，63.07；H，6.81；N，11.74。
制备例EX1B
在室温搅拌下，向制备例EX1A化合物(5.3g，8.75)的二噁烷(50ml)/水(25ml)溶液中加入氢氧化锂(0.73g，17.50mmol)。20分钟后，加入水并将该反应物浓缩至大约30ml。所得到的混合物用乙醚提取并将水层用氯化钠饱和，然后用1N HCl调至pH3.5。该混合物用乙酸乙酯提取，合并的有机提取液用硫酸钠干燥并浓缩，得到上述化合物(4.90g，97％)的淡橙色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)d；MS(FD)m/e；分析计算值C，；H；N，。实测值C，；H，；N，。
制备例EX1C 在0℃搅拌下，向制备例EX1B化合物(2.09，3.61mmol)、吡咯烷(0.30ml，3.61mmol)和1-羟基苯并三唑(0.54g，3.97mmol)的无水DMF(50ml)溶液中加入1，3-二环己基碳化二亚胺(0.82g，3.97mmol)。在室温下反应18小时后，将该反应混合物浓缩，溶解在二氯甲烷中，过滤并浓缩。通过硅胶色谱层析纯化(5％甲醇/二氯甲烷)，得到上述化合物(1.74g，76％)的淡橙色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)d1.41(s，9H)，1.43(s，3H)，1.52(s，3H)，2.88(m，4H)，3.42(m，1H)，3.50(m，4H)，4.08(m，1H)，4.54(dd，J＝14.9，27.4Hz，2H)，4.70(m，1H)，4.96(d，J＝4.0Hz，1H)，5.86(s，1H)，7.15(d，J＝6.9Hz，1H)，7.35(m，12H)，9.28(bs，1H)；MS(FD)m/e 632；C34H44N6O6分析计算值C，64.54；H，7.01；N，13.28。实测值C，63.48；H，6.95；N，12.19。
化合物1 在0℃搅拌下，向制备例EX1C化合物(1.00，1.58mmol)和苯甲醚(0.30ml)的的无水二氯甲烷(12ml)溶液中加入三氟乙酸(3ml)，然后将该反应混合物温热至室温。4小时后，真空除掉二氯甲烷并加入过量乙醚。20分钟后，将反应混合物过滤，得到上述化合物(1.02g，85％)的白色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)d 1.60(s，6H)，1.90(m，4H)，3.08(m，1H)，3.58(m，3H)，3.88(m，2H)，4.52(m，2H)，4.72(m，1H)，6.10(m，2H)，7.25(m，6H)，7.46(m，5H)，7.70(m，1H)，8.00(m，1H)，8.40(m，1H)，11.15(m，1H)；MS(FD)m/e532(M-2TFA)；C33H38F6N6O8的分析计算值C，52.10；H，5.03；N，11.05。实测值C，51.54；H，5.25；N，11.21。
实施例2-2制备例EX2A
向制备例6B产物，非对映异构体1(2.30g，5.48mmol)的THF(50ml)溶液中加入氢氧化锂(0.25g，6.03mmol)的水(25ml)溶液。所得到的混合物在室温下搅拌30分钟。加入水并用乙醚洗涤该混合物。用10％碳酸氢钠水溶液调节水层的pH至3.0。将混合物用氯化钠饱和并用乙酸乙酯洗涤。合并乙酸乙酯洗涤液，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得到的粗品固体在氮环境下溶解在无水二氯甲烷(50ml)中。向该溶液中加入催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)。将该混合物搅拌3小时，然后真空浓缩。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并冷却至0℃。加入4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)和吡咯烷(1.8ml，18.74mmol)并将所得到的溶液搅拌18小时。然后加入二氯甲烷并将该混合物用碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗品泡沫物通过闪式色谱层析纯化(二氧化硅，100g，5％甲醇/二氯甲烷)，得到上述产物(1.73g，88％产率)的无色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C16H18N4O3的分析计算值C，61.14；H，5.77；N，17.82。实测值C，60.67；H，5.78；N，16.03；FDMS(M+)-314。
制备例EX2B 在惰性环境下，向制备例EX2A产物(1.66g，5.29mmol)的THF(5ml)溶液中加入5％披钯碳(0.80g，催化剂，25mlTHF)悬浮液。所得到的反应混合物在Parr摇动器中，在氢环境下(40 psi)放置1.5小时。所得到的反应混合物在氮环境下放置并加入硅藻土。然后将该混合物过滤并用THF冲洗。滤液在氮环境下放置并加入HOBT(0.71g，5.29mmol)、制备例1产物(2.01g，5.29mmol)、EDC(1.00g，5.81mmol)和DIEA(1.0ml，5.81mmol)。所得到的反应混合物在室温下搅拌18小时，然后真空浓缩。粗品物质溶解在乙酸乙酯中并用碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得到的粗品泡沫物通过闪式色谱层析纯化(二氧化硅，100g，2％甲醇/二氯甲烷)，得到上述产物(0.66g，19％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C35H46N6O6的分析计算值C，65.00；H，7.17；N，12.99。实测值C，63.21；H，6.92；N，12.54；FDMS(M+)-646。
化合物2 在室温和氮环境下，将制备例EX2B产物(0.52g，0.80mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液与苯甲醚(0.4ml)和三氟乙酸(4.0ml)一起搅拌3小时。将该反应混合物真空浓缩至大约5ml并加入过量乙醚。将该混合物过滤并用乙醚冲洗，得到上述产物(0.40g，65％)的灰白色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的； C34H40N6O8F6的分析计算值C，52.71；H，5.20；N，10.85。实测值C，52.60；H，5.08；N，10.69；FDMS(M+)-546。
实施例2-3制备例193 向制备例EX1B(1.0g，1.7mmol)、N，N-二甲胺盐酸盐(0.14g，1.7mmol)、三乙胺(0.26ml，1.9mmol)和1-羟基苯并三唑(0.26g，1.9mmol)的二甲基甲酰胺(70ml)溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.4g，1.9mmol)。将反应混合物搅拌过夜，然后浓缩。残渣在乙酸乙酯中形成淤桨，过滤并加入水。将该混合物用乙酸乙酯提取。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残渣通过硅胶色谱层析纯化，用4％甲醇/氯仿作为洗脱剂，得到0.58g(56％)上述产物的白色泡沫物1H NMR与结构是一致的；MS(FD)606(M+)；C32H42N6O6的分析计算值C，63.35；H，6.98；N，13.85。实测值C，63.18；H，7.03；N，13.84。
化合物3 向制备例193产物(0.5，0.82mmol)的二氯甲烷(12ml)溶液中加入三氟乙酸(4ml)。搅拌1小时后，加入水。将该反应物用固体碳酸氢钠骤停并用氯仿提取。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残渣溶解在乙酸乙酯中并加入盐酸饱和乙醚。所得到的淤桨浓缩得到0.4g(85％)上述产物的黄色固体1H NMR与结构是一致的；MS(FD)506.4(M+)；C27H34N6O4·2.9HCl的分析计算值C，53.85；H，4.50；N，13.95。实测值C，53.91；H，6.14；N，13.76。
实施例2-4制备例194 制备例EX1B(1.0g，1.7mmol)、二乙胺(0.18ml，1.7mmol)、1-羟基苯并三唑(0.26g，1.9mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.4g，1.9mmol)、二甲基甲酰胺(80ml)如制备例193所述反应，得到0.53g(49％)上述产物的黄色泡沫物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)634.3(M+)。
化合物4 制备例194产物(0.52g，0.82mmol)、三氟乙酸(4ml)、二氯甲烷(12ml)如化合物3所述反应，得到0.47g(100％)上述产物的白色固体1H NMR与结构是一致的；MS(FD)534.1(M+)；C29H38N6O4·2.4HCl的分析计算值C，55.99；H，6.54；N，13.51。实测值C，55.88；H，6.91；N，13.32。
实施例2-5制备例195
制备例EX1B(1.0g，1.7mmol)、N，N-二甲基乙胺(0.15ml，1.7mmol)、1-羟基苯并三唑(0.26g，1.9mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.4g，1.9mmol)、二甲基甲酰胺(40ml)如制备例193所述反应，得到0.56g(56％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)620(M+)；。C33H44N6O6的分析计算值C，63.85；H，7.15；N，13.54。实测值C，63.45；H，7.19；N，13.15。
化合物5 制备例195产物(0.4g，0.64mmol)、三氟乙酸(2ml)、二氯甲烷(6ml)如化合物3所述反应，得到0.32g(84％)上述产物的黄色固体1H NMR与结构是一致的；MS(FD)520(M+)；C28H36N6O4·2.2HCl的分析计算值C，55.97；H，6.41；N，13.99。实测值C，56.11；H，6.23；N，13.60。
实施例2-6制备例EX3A 如制备例EX2A所述，用制备例6B产物，非对映异构体1(1.88g，5.44mmol)的THF(50ml)溶液和氢氧化锂(0.23g，5.63mmol)的水(25ml)溶液制备，得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)反应，得到粗品酰基氯。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)、L-脯氨酸机制盐酸盐(0.9g，5.44mmol)和N，N-二乙基异丙胺(2.8ml，16.31mmol)反应，得到上述产物(1.21g，65％产率)的无色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C18H22N4O3的分析计算值C，63.14；H，6.48；N，16.36。实测值C，63.29；H，6.45；N，15.29；FDMS(M+)-342。
制备例EX3B 制备例EX3A产物(1.21g，3.53mmol)和5％披钯碳(0.80g，催化剂，25ml THF)如制备EX2B所述制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.48g，3.53mmol)、制备例1产物(1.34g，3.53mmol)、二异丙基乙胺(0.6ml，3.53mmol)h EDCI(0.67g，3.88mmol)反应，得到上述产物(0.97g，41％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C37H50N6O6的分析计算值C，65.85；H，7.47；N，12.45。实测值C，64.96；H，7.48；N，12.04；FDMS(M+)-675。
化合物6 制备例EX3B产物(0.95g，1.41mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)如实施例2-2制备，得到所需产物(制备例3)(0.82g，92％)的灰黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与上述结构是一致的；C36H44N6O8F6的分析计算值C，53.86；H，5.53；N，10.47。实测值C，52.73；H，5.50；N，10.07；FDMS(M+)-574。
实施例2-7制备例EX4A 在室温搅拌下，向制备例5产物(8.0g，13.0mmol)的二甲基甲酰胺(150ml)溶液中加入4-甲基哌啶(1.6ml，13.0mmol)、1-羟基苯并三唑(2.0g，14.3mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(3.0g，14.3mmol)。16小时后，将反应混合物过滤并浓缩。所得到的物质在乙酸乙酯和水之间分配并用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干。所得到的粗品物质通过闪式色谱层析纯化(硅胶，3％甲醇/氯仿)，得到7.65g(85％)上述产物的黄色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)0.2(m，1H)，0.50(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.80(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.05(m，1H)，1.22-1.45(m，15H)，1.50-1.65(m，4H)，2.65(m，1H)，3.00(m，1H)，3.55(m，1H)，3.65(m，1H)，3.75(s，3H)，4.37(m，1H)，4.40-4.50(m，2H)，4.60(m，1H)，6.62(d，J＝13Hz，1H)，6.98(t，J＝9.4 Hz，2H)，7.10-7.45(m，11H)，10.15(br s，1H)；MS(离子色谱)691.3(M+1)；分析计算值C37H50N6O7·0.6H2OC，63.34；H，7.35；N，11.98.实测值C，63.25；H，7.03；11.87.
化合物7和8 在室温搅拌下，向制备例EX4A产物(7.26g，10.5mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。4小时后，反应混合物倾入饱和碳酸氢钠溶液中并用氯仿提取。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到6.12g(99％)游离碱的黄褐色泡沫物。非对映异构体(3.0g)在装填Kromasil CHI-DMP手性相的8×15cmProchrom柱上色谱层析，用3A乙醇(13％体积比)、二甲基乙胺(0.2％体积比)在庚烷中的洗脱剂化合物以250ml/min流速洗脱，得到纯的单一的非对映异构体化合物7异构体向纯异构体的乙酸乙酯溶液中加入饱和的盐酸乙醚溶液。所得到的淤桨浓缩至干，得到1.1g(37％)所述产物的白色固体1H NMR(d，DMSO) 0.50(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.80(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.16(m，1H)，1.35(m，1H)，1.50-1.70(m，8H)，2.60-2.70(m，2H)，3.03(m，1H)，3.65-3.80(m，6H)，4.40(m，1H)，4.53(s，2H)，4.75(m，1H)，6.90-7.08(m，3H)，7.25-7.45(m，9H)，8.20-8.40(m，4H)，8.61(d，J＝7.5Hz，1H)，11.15(brs，1H)；tR＝7.93min；MS(离子色谱)591.6(M+1)；分析计算值C32H42N6O5·2HClC，57.92；H，6.69；N，12.66.实测值C，57.72；H，6.47；N，12.42.
化合物8异构体向纯异构体的乙酸乙酯溶液中加入饱和的盐酸乙醚溶液。所得到的淤桨浓缩至干，得到0.98g(33％)所述产物的白色固体1H NMR(d，DMSO)0.50(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.80(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.16(m，1H)，1.35(m，1H)，1.50-1.70(m，8H)，2.60-2.70(m，2H)，3.03(m，1H)，3.65-3.80(m，6H)，4.40(m，1H)，4.53(s，2H)，4.75(m，1H)，6.90-7.08(m，3H)，7.25-7.45(m，9H)，8.20-8.40(m，4H)，8.61(d，J＝7.5Hz，1H)，11.15(brs，1H)；tR＝11.78min；MS(离子色谱)591.6(M+1)；分析计算值C32H42N6O5·2.2HClC，57.29；H，6.64；N，12.53.实测值C，57.23；H，6.29；N，12.57.
实施例2-8制备例EX5A 如制备例EX2B所述，用制备例14产物(1.32g，3.55mmol)和5％披钯碳(1.4g，催化剂，50ml THF)制备制备例EX5A，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.48g，3.55mmol)、制备例1产物(1.35g，3.55mmol)和DCC(0.81g，3.91mmol)反应，得到上述产物(0.82g，33％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300Mhz，CDCl3)与结构是一致的；C38H52N6O7的分析计算值C，64.75；H，7.44；N，11.92。实测值C，66.19；H，7.17；N，12.10。ISMS(M+)-705。
化合物8 在室温和氮环境下，将制备例EX5A产物(0.82g，1.16mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液与苯甲醚(0.4ml)和三氟乙酸一起搅拌3小时。将该混合物用饱和碳酸氢钠骤停并在室温下搅拌10分钟。加入二氯甲烷并将该混合物用碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩并重新溶解在2ml乙酸乙酯中。加入乙醚(饱和HCl(g)，5ml)，然后将该混合物搅拌12分钟。将混合物过滤得到上述产物(0.71g，90％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)与结构是一致的；C33H46N6O5Cl2的分析计算值C，58.49；H，6.84；N，12.40。实测值C，55.40；H，6.48；N，11.80。ISMS(M+)-605。
实施例2-9制备例EX6A 向5％披钯碳(1.75g)和四氢呋喃(120ml)的悬浮液中加入制备例4产物(3.51g，11.5mmol)。将反应混合物在Parr装置中，在氢环境(40mm Hg)下放置2小时，然后通过硅藻土过滤。随后在0℃搅拌下，将滤液加到制备例2产物(4.33g，11.5mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(2.60g，12.6mmol)和1-羟基苯并三唑(1.72g，12.6mmol)的四氢呋喃(50ml)溶液中。在室温下放置16小时后，浓缩反应混合物。所得到的残渣溶解在乙酸乙酯中，过滤并将所得到的滤液浓缩。粗品残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，90％乙酸乙酯/己烷-10％甲醇/乙酸乙酯梯度)，得到4.5g(62％)所需产物(制备例EX6A)的淡橙色泡沫物1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 636(M+1)。分析(C34H45N5O7)的C，H，N。
制备例EX6B 在室温搅拌下，向制备例EX6A产物(1.01g，1.59mmol)的四氢呋喃(30ml)和水(15ml)溶液中加入氢氧化锂(0.26g，6.30mmol)。25分钟后，将反应混合物浓缩，所得到的残渣用水稀释并用乙醚提取。用1N盐酸酸化含水提取液至pH2-3。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩，得到0.96g(99％)不必纯化即可进一步使用的所需化合物(制备例EX6B)的淡褐色泡沫物1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 608(M+1)。分析(C32H41N5O7)的C计算值，63.25；实测值，62.68，H，N。
制备例EX6C 在室温搅拌下，向制备例EX6B产物(0.93g，1.53mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入N-甲基吗啉(0.20ml，1.83mmol)和2-氯-(4，6)-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.35g，1.99mmol)。1小时后，加入4-甲基哌啶(0.20ml，1.68mmol)，所得到的混合物在室温下搅拌2小时，这时加入2-氯-(4，6)-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.10g，0.70mmol)。1小时后，反应混合物浓缩并将所得到的残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，乙酸乙酯/甲醇梯度)，得到所需化合物(制备例EX6C)的淡黄色固体泡沫物(0.875g，83％)1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 689(M+1)。分析(C38H52N6O6)的C，H，N。
化合物10 在0℃搅拌下，向制备例EX6C产物(0.77g，1.12mmol)和苯甲醚(0.13ml，1.13mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入三氟乙酸。3-4小时后，将反应混合物温热至室温，然后通过倾入冷的饱和碳酸氢钠水溶液中骤停。收集有机层并将水层用二氯甲烷提取两次。合并的有机提取液用碳酸氢钠水溶液、水、盐水洗涤，然后用硫酸钠干燥并浓缩。所得到的物质通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/95％乙酸乙酯-5％三乙胺/10％甲醇/85％乙酸乙酯)，得到0.63g(95％)所需非对映异构体化合物的灰白色固体泡沫物。该混合物通过手性HPLC[Kromasil装填材料，15％3A乙醇/85％庚烷(w/0.2％二甲胺)]拆解，得到两种所需非对映异构体。在搅拌下，向非对映异构体2(65mg)(滞留时间＝9.00分钟)的乙酸乙酯(5ml)溶液中加入饱和的盐酸乙醚溶液。通过真空过滤收集所得到的白色沉淀并用乙醚冲洗，得到所需化合物(60mg)的白色无定形的固体1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e589(M+1)。分析(C33H44N6O4·2HC)的C，H，N。
实施例2-10制备例EX7A 如制备例EX2B所述，用制备例14产物(0.92g，2.47mmol)和5％披钯碳(1.00g，催化剂，30ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.35g，2.47mmol)、制备例2产物(0.94g，2.47mmol)和DCC(0.56g，2.72mmol)反应，得到所需产物(制备例EX7A)(0.92g，53％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300Mhz，CDCl3)与结构是一致的；C39H54N6O6的分析计算值C，66.64；H，7.74；N，11.96。实测值C，66.65；H，7.65；N，12.02。ISMS(M+)-702。
化合物11 如实施例2-8所述，用制备例EX7A产物(0.26g，0.37mmol)、三氟乙酸(0.4ml)、与苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(实施例7)(0.19g，76％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)与结构是一致的；C34H48N6O4Cl2的分析计算值C，60.44；H，7.16；N，12.44。实测值C，60.08；H，7.03；N，12.06。ISMS(M+)-603。
实施例2-11制备例EX8A 在室温搅拌下，向制备例5产物(10.0g，16.4mmol)的四氢呋喃(150ml)溶液中加入1-羟基苯并三唑(2.22g，16.4mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(3.38g，16.4mmol)。15分钟后，加入吡咯烷(1.37ml，16.4mmol).16小时后，将反应混合物过滤并浓缩。所得到的粗物质通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/二氯甲烷)，得到7.05g(65％)所需产物(制备例EX8A)的黄色泡沫物1H NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)663(M+1)；C35H46N6O7的分析计算值C，63.43；H，7.00；N，12.68。实测值C，62.69；H，6.87；N，12.91。
化合物12和13 在制备例EX8A的产物(7.0g，10.6mmol)中加入HCl(g)/乙酸饱和溶液(100mL)。4小时后，将反应混合物浓缩，然后在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠之间分配。取出有机层，硫酸钠干燥并浓缩，产生5.59g(94％)游离碱，为浅黄色泡沫。非对映体材料(3.45g)在8×15cm装有Kromsil CHI-DIMETHYLFORMAMIDE手性相的Prochrom柱上使用3A乙醇、二甲基乙基胺和庚烷洗脱混合物来进行色谱层析，产生各自纯化形式的非对映体1H NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)563(M+1)；C30H38N6O5的分析计算值C，64.04；H，6.81；N，14.94。实测值C，63.98；H，6.82；N，14.87。
化合物12(异构体1)在纯的异构体乙酸乙酯溶液中加入盐酸的乙酸乙酯饱和溶液。将所得淤桨浓缩干燥，产生1.50g(39％)所需产物，为灰白色固体1H NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)563(M+1)；C30H38N6O5×2HCl的分析计算值C，56.69；H，6.34；N，13.22。实测值C，55.81；H，6.40；N，12.68。
化合物13(异构体2)在纯的异构体乙酸乙酯溶液中加入盐酸的乙酸乙酯饱和溶液。将所得淤桨浓缩干燥，产生1.43g(38％)所需产物，为灰白色固体1H NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)563(M+1)；C30H38N6O5×2HCl的分析计算值C，56.69；H，6.34；N，13.22。实测值C，55.71；H，6.38；N，12.74。
实施例2-12制备例EX9A 在制备例4(3.00g，9.84mmol)搅拌溶解于四氢呋喃(10mL)和乙醇(5mL)的溶液中加入氢化钠(20mL的5N水溶液)。所得混合物在室温下搅拌直到完成水解，然后用盐酸水溶液酸化到pH2.0。用乙酸乙酯提取反应混合物，硫酸镁干燥并浓缩。所得羧酸在室温下与搅拌溶解在四氢呋喃(100mL)中的吡咯烷(0.710g，10mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(1.35g，10mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(2.06g，10.0mmol)合并。18小时后，浓缩混合物，然后残余物在乙酸乙酯中形成淤桨，再过滤并浓缩。通过闪式色谱层析(硅胶，氯仿/甲醇)进行纯化，产生2.74g(84％)所需产物(制备例EX9A)，波谱数据如下MS(M+H)+331.2；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)6 8.19(d，1H，J＝1.51Hz)，7.80(d，1H，J＝1.51Hz)，7.45(d，2H，J＝8.67Hz)，7.02(d，2H，J＝8.67Hz)，6.58(s，1H)，3.77(s，3H)，3.75-3.60(m，1H)3.45-3.30(m，2H)，2.90-2.75(m，1H)1.95-1.60(m，4H)；分析计算值C16H18N4O4C，58.18；H，5.49；N，16.96.实测值C，58.44；H，5.45；N，16.87.
制备例EX9B 将制备例EX9A的产物(1.13g，3.42mmol)加到10％披钯碳(0.65g)和钯/black(0.15g)的四氢呋喃(40mL)混合物中。在Parr装置中于氢(38psi)条件下振摇混合物。完成还原后，经硅藻土过滤反应混合物并将滤液立即与1，3-二环己基碳化二亚胺(0.71g，3.45mmol)、1-羟基苯并三唑(0.46g，3.40mmol)、制备例2产物(1.30g，3.44mmol)和另外的四氢呋喃(60ml)合并。在室温下搅拌过夜后，将混合物浓缩，残余物在乙酸乙酯中形成淤桨并过滤。滤液浓缩并就残余物通过闪式色谱层析(硅胶，氯仿/甲醇)进行纯化，产生1.50g(66％)所需产物(制备例EX9B)，未进行进一步纯化即可用于以后的反应中。
化合物14 向制备例EX9B(1.45g，2.20mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。2小时后，将该混合物浓缩，残渣用过量碳酸氢钠水溶液处理并提取。将合并的有机提取液浓缩，所得到的残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到0.68g所需产物(实施例9)的黄色固体MS(M+H)+561.3。1H NMR与产物(实施例9)是一致的；C31H40N6O4×0.2CHCl3的分析计算值C，64.11；H，6.93；N，14.38。实测值C，64.19；H，7.19；N，14.50。如上实施例2-9所述分离异构体混合物(1.72g)，得到0.64g异构体1(tR＝7.50分钟)和0.49g异构体2(tR＝10.15分钟)。将异构体2(486mg，0.87mmol)溶解在微量乙酸乙酯中并用过量饱和的盐酸乙酸乙酯溶液处理。浓缩并随后从乙醚中蒸发，得到580mg灰白色固体MS(M+H)+561.3，562.4。1H NMR与产物是一致的；C31H40N6O4×3.0HCl3的分析计算值C，55.57；H，6.47；N，12.54实测值C，56.40；H，6.43；N，12.20。
实施例2-13制备例EX10A 如制备例 EX2A所述，用制备例7产物，对映异构体1(1.25g，2.78mmol)的THF(50ml)溶液和氢氧化锂(0.14g，3.33mmol)的水(25ml)溶液制备，得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)反应，得到粗品酰基氯。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)和吡咯烷(0.24ml，2.89mmol)反应，得到所需产物(制备例EX10A)(0.78g，86％产率)的无色泡沫物1HNMR(300MHz，CDCl3)与产物是一致的；C17H20N4O4的分析计算值C，59.59；H，5.85；N，16.27；实测值C，59.59；H，5.96；N，16.19；ISMS(M+)-345。 如制备例EX2B所述，用制备例EX10A(0.77g，2.24mmol)和5％披钯碳(0.80g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.30g，2.46mmol)、制备例2产物(0.85g，2.24mmol)和DCC(0.51g，2.46mmol)反应，得到所需产物(制备例EX10B)(0.70g，46％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C37H50N6O6的分析计算值C，65.85；H，7.47；N，12.45；实测值C，65.83；H，7.27；N，12.38；ISMS(M+)-675。
化合物15 在室温和氮环境下，向制备例EX10B产物(0.69g，1.02mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液与苯甲醚(0.2ml)和三氟乙酸(4.0ml)一起搅拌3小时。将将该混合物用饱和碳酸氢钠骤停并在室温下搅拌10分钟。加入二氯甲烷并将该混合物碳酸氢盐和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩并再溶解在2ml乙酸乙酯中。加入乙醚(饱和HCl(g)，5ml)并将该混合物再搅拌10分钟。将该混合物过滤得到所需产物(实施例10)(0.57g，86％产率)的白色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与产物是一致的；C32H42N6O4Cl2的分析计算值C，59.35；H，6.85；N，12.98实测值C，58.74；H，6.77；N，12.85；ISMS(M+)-575。
实施例2-14制备例473 在0℃下，向制备例5产物(3.60g，5.90mmol)的无水二氯甲烷(60ml)溶液中加入N-甲基吗啉(0.78ml，7.08mmol)和2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(1.35g，7.67mmol)。将该混合物搅拌1小时，温热至室温，这时加入2M的N，N-二甲胺溶液(3.30ml，6.49mmol)。反应物在室温下搅拌2小时，然后加入2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.30g)。该反应物在室温下再搅拌1小时并减压蒸发溶剂。残渣溶解在乙酸乙酯中，将固体过滤掉，滤液通过闪式色谱层析纯化(硅胶，乙酸乙酯-10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的淡黄色固体泡沫物(2.93g，78％)1H NMR-与结构是一致的；MS(IS)m/e 637(M+1)；C33H44N6O7的分析计算值C，62.25；H，6.97；N，13.20实测值 C，61.02；H，6.67；N，13.72。
化合物16 在0℃搅拌下，通过注射器向制备例473产物(3.60g，5.65mmol)和苯甲醚(0.65ml，5.93mmol)的无水二氯甲烷(130ml)溶液中加入三氟乙酸(13ml)。将反应物搅拌4小时，反应物温热至室温，然后通过倾入冰冷的饱和碳酸氢钠中骤停。收集有机层并用二氯甲烷提取水层两次。合并的有机层用碳酸氢钠、水和盐水洗涤，然后干燥(硫酸钠)并真空蒸发，得到淡黄色固体泡沫物。非纯品泡沫物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/乙酸乙酯-5％三乙胺/10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的灰白色固体泡沫物(2.20g，73％)。1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 537(M+1)；C28H36N6O5的分析计算值C，62.67；H，6.76；N，15.66。实测值C，62.53；H，6.62；N，15.57。
非对映异构体的分离将产物通过HPLC[Kromasil填充材料，15％3A乙醇/85％庚烷(w/0.2％DMEA)]拆解，得到两个非对映异构体。将第二个非对映异构体(0.45g)(滞留时间＝10.70分钟)溶解在乙酸乙酯(10ml)中，然后在搅拌下，加入饱和的盐酸乙醚(2ml)溶液。通过真空过滤收集白色沉淀并用乙醚冲洗。真空干燥得到实施例254(0.40g)白色无定形固体1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 537(M+1)；C28H36N6O5·2HCl的分析计算值C，55.17；H，6.28；N，13.79。实测值C，56.56；H，6.38；N，14.26。
实施例2-15制备例76 如制备例4A所述，将4-乙氧基苯乙酸(23.5g，130mmol)和对甲苯磺酸(4.0g，21mmol)在无水乙醇(150ml)中反应，得到23.2g(86％)所需产物的无色油状物1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝7.2Hz，3H)，1.31(t，J＝7.2 Hz，3H)，3.56(s，2H)，3.99(q，J＝7.2 Hz，2H)，4.05(q，J＝7.2Hz，2H)，6.85(d，J＝8.7Hz，2H)，7.14(d，J＝8.7Hz，2H)；MS(离子喷射)209(M+1)；C12H16O3的分析计算值C，69.21；H，7.74.实测值C，68.91；H，7.55.
制备例77 在室温搅拌下，向制备例76(53g，255mmol)的四氯化碳(600ml)溶液中加入46.6g(262mmol)N-溴琥珀酰亚胺和3.0g(18.3mmol)2，2’-偶氮基双(2-甲基丙腈)。所得到的反应混合物加热回流。3.5小时后，溶液冷却至室温、过滤并浓缩。所得到的油状物在硅胶上色谱层析，用氯仿作为洗脱剂，得到70.9g(97％)所需产物的无色油状物
1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.25-1.35(m，3H)，4.00-4.10(m，2H)，4.13-4.25(m，2H)，5.86(s，1H)，6.92(d，J＝8.7Hz，2H)，7.47(d，J＝9.0Hz，2H)； MS(FD)287，289(M+).
制备例78 如制备例4所述，将制备例77产物(11.4g，40mmol)、4-硝基咪唑(4.5g，40mmol)和碳酸钾(16.6g，120ml)在二甲基甲酰胺(100ml)反应，得到5.47g(43％)所需产物的黄色油状物1H-NMR(d，DMSO)1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，1.29(t，J＝7.2Hz，3H)，4.03(q，J＝7.2Hz，2H)，4.23(q，J＝7.2Hz，2H)，6.54(s，1H)，6.70(d，J＝8.7Hz，2H)，7.42(d，J＝8.7Hz，2H)，7.90(s，1H)，8.34(s，1H)；MS(离子喷射)320.2(M+1)；C15H17N3O5的分析计算值C，56.42；H，5.37；N，13.16.实测值C，56.29；H，5.17；N，13.15.
制备例79 如制备例5A所述，将制备例78产物(9.6g，30mmol)在四氢呋喃(100ml)中用10％披钯碳(7.0g)还原，然后与制备例1产物(11.5g，30mmol)、1-羟基苯并三唑(4.5g，33mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(6.8g，33mmol)偶联，得到9.9g(50％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.25-1.40(m，18H)，3.58(m，1H)，3.70(m，1H)，4.02(q，J＝7.2Hz，2H)，4.20(q，J＝7.2Hz，2H)，4.44(d，J＝3.4Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.33(s，1H)，6.95(d，J＝8.7Hz，2H)，7.15-7.35(m，9H)，7.43(m，1H)，7.51(m，1H)，10.2(br s，1H)；MS(离子喷射)652.4(M+1)；C34H45N5O8的分析计算值C，62.66；H，6.96；N，10.74.实测值C，62.92；H，7.00；N.10.98.
制备例80 如制备例5所述，将制备例79产物(9.7g，15.0mmol)和氢氧化锂(0.42g，18.0mmol)在二噁烷(200ml)和水(100ml)中反应，得到9.4g(100％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.25-1.40(m，18H)，3.60(m，1H)，3.68(m，1H)，4.02(q，J＝7.2Hz，2H)，4.44(d，J＝3.0Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.19(m，1H)，6.95(d，J＝8.7Hz，2H)，7.28-7.35(m，9H)，7.40(m，1H)，7.51(s，1H)，10.2(brs，1H)，13.5(br s，1H)；MS(离子喷射)624.5(M+1)；C43H41N5O8的分析计算值C，61.62；H，6.63；N，11.23.实测值C，61.58；H，6.92；N，10.99.
制备例81 如制备例EX4A所述，将制备例80产物(7.43g，12.0mmol)、4-甲基哌啶(1.42ml，12.0mmol)、1-羟基苯并三唑(1.78g，13.2mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(2.72g，13.2mmol)在二甲基甲酰胺(100ml)中反应，得到6.4g(76％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)0.74(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.87(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.05(m，1H)，1.25-1.40(m，18H)，1.50-1.70(m，3H)，2.55-2.70(m，2H)，3.00(m，1H)，3.57(m，1H)，3.65-3.85(m，2H)，4.00-4.20(m，2H)，4.38(m，1H)，4.44(d，J＝3.4Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.61(d，J＝12.0Hz，1H)，6.95-7.00(m，2H)，7.15-7.20(m，2H)，7.20-7.45(m，9H)，10.15(br s，1H)；MS( 离子喷射 )705.5(M+1)； C38H52N6O7的分析计算值C，64.75；H，7.44；N，11.92.实测值C，64.59；H，7.21；N，11.87.
化合物17和18 如实施例2-7所述，将制备例81产物(6.4g，9.1mmol)和三氟乙酸(10ml)在二氯甲烷(25mL)中反应。得到4.71g(77％)所需非对映异构体混合物的黄褐色泡沫物。如实施例2-9所述，将非对映异构体(2.4g)通过HPLC(Kromsil CHI-DMP手性固定相，3A乙醇/二甲基乙胺/庚烷)拆解，用盐酸酸化后分离，得到的200mg(8％)异构体1和0.8g(31％)异构体2的白色固体。
化合物17(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)0.74(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.88(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.20(m，1H)，1.31(t，J＝6.8Hz，3H)，1.45-1.70(m，8H)，2.60-2.70(m，2H)，3.05(m，1H)，3.65-3.80(m，3H)，4.00-4.20(m，3H)，4.37(m，1H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，6.80(d，J＝13.2Hz，1H)，6.95-7.05(m，2H)，7.25-7.40(m，9H)，7.92(br s，1H)，8.20-8.30(m，3H)，8.53(d，J＝7.2 Hz，1H)，10.9(brs，1H)；tR＝9.17 min；MS( 离子喷射)605(M+1)；C33H44N6O5·2HCl·0.1 CHCl3的分析计算值C，58.45；H，6.74；N，12.74. 实测值C，58.64；H，6.77；N，12.36.
化合物18(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)0.74(d，J＝6.4 Hz，1.5H)，0.88(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.20(m，1H)，1.31(t，J＝6.8 Hz，3H)，1.45-1.70(m，8H)，2.60-2.70(m，2H)，3.05(m，1H)，3.65-3.80(m，3H)，4.00-4.20(m，3H)，4.37(m，1H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，6.80(d，J＝13.2Hz，1H)，6.95-7.05(m，2H)，7.25-7.40(m，9H)，7.92(brs，1H)，8.20-8.30(m，3H)，8.53(d，J＝7.2Hz，1H)，10.9(brs，1H)；tR＝12.68min；MS(离子喷射)605(M+1)；C33H44N6O5·HCl的分析计算值C，59.35；H，6.85；N，12.98.实测值C，59.62；H，7.01； N，12.71.
实施例2-16制备例83 如制备例EX4A所述，将制备例80(0.9g，1.5mmol)、吡咯烷(0.13ml，1.5mmol)、1-羟基苯并三唑(0.23g，1.65mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.34g，1.65mmol)在二甲基甲酰胺(40ml)中反应，得到0.7g(74％)所需产物的黄褐色油状物
1H-NMR(d，DMSO)1.25-1.40(m，18H)，1.70-1.90(m，4H)，2.95(m，1H)，3.30-3.40(m，2H)，3.55-3.70(m，3H)，4.03(q，J＝7.2Hz，2H)，4.44(d，J＝3.4Hz，2H)，4.57(m，1H)，6.34(s，1H)，6.97(d，J＝8.7Hz，2H)，7.20-7.35(m，9H)，7.40-7.45(m，2H)，10.15(brs，1H)；MS(离子喷射)677.6(M+1)；C36H68N6O7·0.2H2O的分析计算值C，63.55； H，7.17；N，12.35实测值C，63.32；H，6.96； N，12.24.
化合物19 如实施例2-7所述，将制备例83产物(0.59g，0.9mmol)和三氟乙酸(2ml)在二氯甲烷(6ml)中反应，得到0.36g(64％)所需产物的异构体混合物1H-NMR(d，DMSO)1.32(t，J＝6.8Hz，3H)，1.45-1.60(m，6H)，1.65-1.90(m，4H)，2.90(m，1H)，3.25-3.45(m，2H)，3.65-3.75(m，3H)，4.02(q，J＝6.8Hz，2H)，4.45-4.55(m，2H)，4.70-4.80(m，1H)，6.54(s，1H)，6.98(d，J＝8.7Hz，2H)，7.20-7.40(m，9H)，8.05(m，1H)，8.20-8.30(m，3H)，8.54(d，J＝7.2 Hz，1H)，10.95(brs，1H)；C31H41N6O5的MS(high res)计算值577.3138.实测值577.3132.C31H40N6O5·2HCl的分析计算值C，57.32；H，6.52；N，12.94.实测值C，57.46；H，6.59；N，12.91.
实施例2-17制备例82 如制备例EX4A所述，将制备例80产物(0.9g，1.5mmol)、二甲胺盐酸盐(0.13g，1.5mmol)、三乙胺(0.23ml，1.65mmol)、1-羟基苯并三唑(0.23g，1.65mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.34g，1.65mmol)在二甲基甲酰胺(50ml)中反应，得到0.46g(47％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.25-1.35(m，18H)，2.90(m，6H)，3.57(m，1H)，3.67(m，1H)，4.03(q，J＝7.2Hz，2H)，4.43-4.47(m，2H)，4.57(m，1H)，6.55(m，1H)，6.97(d，J＝8.7Hz，2H)，7.15-7.45(m，11H)，10.16(brs，1H)；MS(离子喷射)651.4(M+1)；C34H46N6O7的分析计算值C，62.75；H，7.13；N，12.91. 实测值C，62.55；H，6.84；N，12.84.
化合物20和21 如实施例2-7所述，将制备例82产物(0.44g，0.68mmol)和三氟乙酸(2ml)在二氯甲烷(6mL)中反应。得到0.19g(45％)所需产物的黄褐色泡沫物。如实施例2-9所述，将非对映异构体(90mg，0.14mmol)通过HPLC(Kromsil CHI-DMP手性固定相，3A乙醇/二甲基乙胺/庚烷)拆解，用盐酸酸化后分离，得到的50mg(50％)异构体1和27mg(27％)异构体2的白色固体。
化合物20(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)1.32(t，J＝6.8Hz，3H)，1.50(s，6H)，2.86(s，3H)，2.90(s，3H)，3.70-3.80(m，2H)，4.03(q，J＝7.2Hz，2H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，6.76(s，1H)，7.00(d，J＝8.7 Hz，2H)，7.25-7.40(m，9H)，8.06(m，1H)，8.20-8.30(m，3H)，8.52-8.60(m，1H)，11.00(brs，1H)；tR＝7.70分；C29H39N6O5的MS(high res)计算值551.2982.实测值551.2987.C29H38N6O5·2.3 HCl·0.3乙酸乙酯的分析计算值C，54.88；H，6.51；N，12.72.实测值C，54.70；H，6.49；N，12.43.
化合物21(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)1.32(t，J＝6.8Hz，3H)，1.50(s，6H)，2.86(s，3H)，2.90(s，3H)，3.70-3.80(m，2H)，4.03(q，J＝7.2Hz，2H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，6.76(s，1H)，7.00(d，J＝8.7Hz，2H)，7.25-7.40(m，9H)，8.06(m，1H)，8.20-8.30(m，3H)，8.52-8.60(m，1H)，11.00(brs，1H)；tR＝9.09分；C29H39N6O5的MS(high res)计算值551.2982.实测值551.2976.C29H38N6O5·2.HCl·0.3乙酸乙酯的分析计算值C，55.18；H，6.53；N，12.79.实测值C，55.01；H，6.33；N，12.54.
实施例2-18制备例84 如制备例1所述，将4-丁基苯乙酸(10.0g，48mmol)和对甲苯磺酸(2.5ml，13mmol)在无水乙醇(100ml)中反应，得到11.04g(98％)所需产物的无色油状物1H-NMR(d，DMSO)0.94(t，J＝7.4Hz，3H)，1.18(t，J＝7.0Hz，3H)，1.40-1.50(m，2H)，1.60-1.80(m，2H)，3.57(s，2H)，3.93(q，J＝6.5Hz，2H)，4.08(q，J＝7.3Hz，2H)，6.86(d，J＝8.4Hz，2H)，7.15(d，J＝8.4Hz，2H)；MS(离子·喷射)237(M+1)；C14H20O3的分析计算值C，71.16；H，8.53.实测值C，71.33；H，8.55.
制备例85 向制备例84产物(6.0g，25mmol)在100ml四氯化碳的溶液中加入4.7g(25.8mmol)N-溴琥珀酰亚胺和0.6g 2，2’-偶氮基双(2-甲基丙腈)。将反应混合物加热回流。3.5小时后，混合物冷却至室温、过滤并浓缩。所得到的油状物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，3％甲醇/氯仿)，得到6.9g(88％)所需产物的无色油状物1H-NMR(d，DMSO)0.93(t，J＝7.35H，3H)，1.20(t，J＝7.2Hz，3H)，1.40-1.50(m，2H)，1.60-1.80(m，2H)，3.95-4.05(m，2H)，4.10-4.15(m，2H)，5.87(s，1H)，6.93(d，J＝8.7Hz，2H)，7.45(d，J＝8.7Hz，2H)；MS(FD)314，316(M+)；C14H19BrO3·0.5CHCl3的分析计算值C，52.54；H，5.98.实测值C，52.35；H，5.84.
制备例86
如制备例4所述，将制备例85产物(5.82g，19.0mmol)、4-硝基咪唑(2.1g，19.0mmol)和碳酸钾(8.0ml，57mmol)在二甲基甲酰胺(150ml)中反应，得到3.5g(53％)所需产物的淡黄色油状物1H-NMR(d，DMSO)0.93(t，J＝7.3Hz，3H)，1.19(t，J＝7.0Hz，3H)，1.35-1.50(m，2H)，1.60-1.80(m，2H)，3.92-4.06(m，2H)，4.20-4.30(m，2H)，6.56(s，1H)，6.99(d，J＝8.6 Hz，2H)，7.44(d，J＝8.6 Hz，2H)，7.92(s，1H)，8.37(s，1H)；MS(离子喷射)348.3(M+1)；C17H21N3O5的分析计算值C，58.78； H，6.09；N，12.10.实测值C，59.08；H，6.21；N，12.19.
制备例87 如制备例5A所述，将制备例86产物(1.5g，4.3mmol)在四氢呋喃(40ml)中用10％披钯碳(0.8g)还原，然后与制备例1产物(1.64g，4.3mmol)、1-羟基苯并三唑(0.7g，4.7mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(1.04g，4.7mmol)偶联，得到1.1g(38％)所需产物的黄褐色泡沫物
1H-NMR(d，DMSO)0.92(t，J＝7.5Hz，3H)，1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，1.25-1.40(m，15H)，1.40-1.50(m，2H)，1.60-1.75(m，2H)，3.60(m，1H)，3.70(m，1H)，3.95-4.00(m，2H)，4.20-4.25(m，2H)，4.45-4.48(m，2H)，4.57(m，1H)，6.35(s，1H)，6.97(t，J＝9.0Hz，2H)，7.15-7.35(m，9H)，7.40(m，1H)，7.50(s，1H)，10.20(brs，1H)；MS(离子·喷射)680.5(M+1)；C36H49N5O8的分析计算值C，63.61；H，7.27；N，10.30.实测值C，63.53；H，6.99；N，10.54.
制备例88 如制备例5所述，将制备例87产物(1.1g，1.6mmol)和氢氧化锂(0.5g，1.92mmol)在二噁烷(50ml)和水(25ml)中反应，得到1.04g(100％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)0.95(t，J＝7.5Hz，3H)，1.25-1.35(m，15H)，1.35-1.50(m，2H)，1.65-1.75(m，2H)，3.57(m，1H)，3.65(m，1H)，3.95(t，J＝6.4Hz，2H)，4.57(m，1H)，6.19(d，J＝1.5Hz，2H)，6.20(s，1H)，6.96(d，J＝8.7Hz，2H)，7.10-7.35(m，9H)，7.40(m，1H)，7.50(s，1H)，10.20(brs，1H)，13.45(brs，1H)；MS(离子·喷射)652.5(M+1)；C32H45N5O8的分析计算值C.62.66；H，6.96；N，10.75.实测值C，62.45；H，7.07；N，10.72.
制备例89 如制备例EX4A所述，将制备例88产物(1.0g，1.6mmol)、4-甲基哌啶(0.19ml，1.6mmol)、1-羟基苯并三唑(0.24g，1.8mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.35g，1.8mmol)在二甲基甲酰胺(60ml)中反应，得到0.57g(48％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)0.75(d，J＝6.0Hz，1H)，0.85-0.95(m，6H)，1.25-1.40(m，15H)，1.40-1.75(m，7H)，2.55-2.75(m，2H)，3.00(m，1H)，3.55(m，1H)，3.60-3.85(m，2H)，3.95-4.00(m，2H)，4.60(m，1H)，4.85-4.98(m，3H)，6.97(d，J＝8.7Hz，1H)，6.90-7.00(m，2H)，7.15(m，1H)，7.20-7.45(m，10H)，10.15(brs，1H)；MS(离子喷射)733.5(M+1)；C40H56N6O7的分析计算值C，65.55；H，7.70；N，11.47.实测值C，65.44；H，7.49；N，11.59.
化合物22和23 如实施例2-7所述，将制备例89产物(0.55g，0.75mmol)和三氟乙酸(2ml)在二氯甲烷(6mL)中反应，得到0.4g(75％)所需产物的非对映异构体混合物。如实施例2-9所述，将该物质通过HPLC(KromsilCHI-DMP手性固定相，3A乙醇/二甲基乙胺/庚烷)拆解，用盐酸酸化后分离，得到所需非对映异构体的白色固体化合物22(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)0.75(d，J＝6.4Hz，1H)，0.85-1.00(m，5H)，1.25-1.40(m，2H)，1.40-1.50(m，2H)，1.50-1.60(m，6H)，1.60-1.75(m，4H)，2.60＝2.70(m，2H)，3.00(m，1H)，3.60-3.75(m，3H)，3.95-4.00(m，2H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，4.88(m，1H)，6.89(d，J＝14Hz，1H)，7.00-7.05(m，2H)，7.20-7.40(m，9H)，8.10(m，1H)，8.20-8.30(m，3H)，8.60(m，1H)，11.02(br s，1H)；tR＝5.90min；C35H49N6O5的MS(high res)计算值633.3764.实测值633.3768.
C35H48N6O5·2.3HCl的分析计算值C，58.66；H，7.07；N，11.73.实测值C，58.59；H，6.99；N，11.46.化合物23(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)0.75(d，J＝6.4 Hz，1H)，0.85-1.00(m，5H)，1.25-1.40(m，2H)，1.40-1.50(m，2H)，1.50-1.60(m，6H)，1.60-1.75(m，4H)，2.60＝2.70(m，2H)，3.00(m，1H)，3.60-3.75(m，3H)，3.95-4.00(m，2H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，4.88(m，1H)，6.89(d，J＝14Hz，1H)，7.00-7.05(m，2H)，7.20-7.40(m，9H)，8.10(m，1H)，8.20-8.30(m，3H)，8.60(m，1H)，11.02(br s，1H)；tR＝7.47分；C35H49N6O5的MS(high res)计算值633.3764. 实测值633.3762.C35H49N6O5·HCl的分析计算值C，59.57；H，7.14；N，11.91.实测值C，59.74； H，7.30；N，11.72.
实施例2-19制备例EX11A 如制备例5A所述，将制备例8产物(8.5g，24.8mmol)在四氢呋喃(70ml)中用10％披钯碳(6.0g)还原，然后与制备例1产物(9.5g，24.8mmol)、1-羟基苯并三唑(3.7g，27.3mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(5.6g，27.3mmol)偶联，得到12.8g(77％)上述产物的黄褐色泡沫物
1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.25-1.35(m，15H)，3.60(m，1H)，3.70(m，1H)，4.27(q，J＝7.2Hz，2H)，4.44(d，J＝2.6Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.63(s，1H)，7.23-7.30(m，7H)，7.45(m，1H)，7.58-7.65(m，3H)，7.81(d，J＝8.3Hz，2H)，10.25(brs，1H)；MS(离子·喷射)676.5(M+1)；C33H40F3N5O7的分析计算值C，58.66；H，5.97；N，10.36. 实测值C，58.58；H，6.17；N，10.27. 如制备例5所述，将制备例EX11A产物(12.3g，18.2mmol)和氢氧化锂(0.52g，21.8mmol)在二噁烷(100ml)和水(75ml)中反应，得到11.8g(100％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.20-1.35(m，15H)，3.60(m，1H)，3.65(m，1H)，4.45(d，J＝2.6 Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.46(s，1H)，7.15(m，1H)，7.20-7.35(m，6H)，7.42(m，1H)，7.57-7.65(m，3H)，7.79(d，J＝8.3Hz，2H)，10.25(brs，1H)；MS(离子·喷射)648.9(M+1)；C31H36F3N5O7的分析计算值C，57.41；H，5.60；N，10.81.实测值C，57.31；H，5.59；N，10.53.
制备例EX11C 如制备例4A所述，将制备例EX11B产物(8.0g，12.3mmol)、4-甲基哌啶(1.5ml，12.3mmol)、1-羟基苯并三唑(1.83g，13.5mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(2.8g，13.5mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(150ml)中反应，得到7.33g(81％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)0.78(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.84(d，J＝6.0Hz，1.5H)，0.95(m，1H)，1.25-1.35(m，16H)，1.50-1.70(m，4H)，2.65(m，1H)，3.60(m，1H)，3.67(m，1H)，3.80(m，1H)，4.35-4.50(m，3H)，4.60(m，1H)，6.88(d，J＝9.8Hz，1H)，7.20-7.30(m，7H)，7.45(m，1H)，7.48-7.55(m，2H)，7.60(m，1H)，7.75-7.85(m，2H)，10.25(br s，1H)；MS(离子·喷射)729(M+1)；C37H47F3N6O6的分析计算值C，60.98；H，6.50；N，11.53.实测值C，61.24；H，6.44；N，11.77.
化合物24和25 如制备例2-7所述，将制备例EX11C(7.0g，10.0mmol)和三氟乙酸(10ml)在二氯甲烷(25ml)中反应，得到5.62g(93％)所需产物(实施例11)(3.0g)的黄褐色泡沫物，将该物质通过HPLC(8×15cm的Prochrom柱，填充Kromsil CHI-DMP手性固定相，用3A乙醇和二甲基乙胺在庚烷中的混合物作为洗脱剂)纯化，得到1.5g(45％)实施例11的异构体1和1.1g(30％)实施例11的异构体2。
化合物24(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)0.25(m，1H)，0.76(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.86(d，J＝6.4Hz，1.5H)，1.00(m，1H)，1.45-1.70(m，8H)，2.65-2.75(m，2H)，3.15(m，1H)，3.65-3.80(m，3H)，4.40(m，1H)，4.51(s，2H)，4.75(m，2H)，7.10(d，J＝12.8Hz，1H)，7.20-7.40(m，6H)，7.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.67(d，J＝8.0Hz，1H)，7.80-7.90(m，2H)，8.10(brs，1H)，8.20-8.35(m，3H)，8.55(d，J＝7.5 Hz，1H)，10.95(brs，1H)；tR＝8.23 min；MS(离子·喷射)629.3(M+1)；C32H39F3N6O4·2HCl的分析计算值C，54.78；H，5.89；N，11.98.实测值C，54.85；H，5.71；N，11.70.化合物25(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)0.25(m，1H)，0.76(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.86(d，J＝6.4Hz，1.5H)，1.00(m，1H)，1.45-1.70(m，8H)，2.65-2.75(m，2H)，3.15(m，1H)，3.65-3.80(m，3H)，4.40(m，1H)，4.51(s，2H)，4.75(m，2H)，7.10(d，J＝12.8Hz，1H)，7.20-7.40(m，6H)，7.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.67(d，J＝8.0Hz，1H)，7.80-7.90(m，2H)，8.10(brs，1H)，8.20-8.35(m，3H)，8.55(d，J＝7.5Hz，1H)，10.95(brs，1H)；tR＝10.77min；MS(离子·喷射)629.3(M+1)；C32H39F3N6O4·2.2HCl的分析计算值C，54.22；H，5.86；N，11.85.实测值C，54.15；H，5.84；N，11.64.
实施例2-20制备例37 将制备例8产物(11.1g，32.3mmol)和5％钯/碳(1.7g)的四氢呋喃(100ml)混合物在Parr装置中，在室温和60psi下氢化。1.5小时后，所得到的棕色溶液通过硅藻土过滤并浓缩，得到8.8g(87％)不必纯化即可进一步使用的粗品油状物。在0℃搅拌下，向该胺混合物的四氢呋喃(20ml)溶液中加入制备例2产物(10.6g，28.1mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液。向该混合物中加入1-羟基-7-偶氮基苯并三唑(4.0g，29.5mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(6.1g，29.5mmol)。该溶液温热至室温并在3天后，将所得到的混合物过滤。滤液浓缩并随后通过闪式色谱层析纯化(硅胶，3.5％甲醇/二氯甲烷)，得到12.1g(64％)所需产物的橙色固体1H-NMR(d，DMSO)1.15(t，J＝7Hz，3H)，1.18-1.32(m，15H)，1.35-1.70(m，4H)，3.23(m，2H)，4.19(q，J＝7Hz，2H)，4.31(m，1H)，6.58(s，1H)，7.00(brs，1H)，7.05-7.22(m，6H)，7.41(m，1H)，7.52-7.58(m，3H)，7.75(d，J＝8Hz，2H)，10.19(brs，1H)；MS(离子·喷射)674.7(M+1)；Anal.C34H42F3N5O6的分析计算值C，60.61； H，6.28；N，10.39.实测值C，60.44；H，6.48；N，10.36.
制备例38 在室温并搅拌下，向制备例37产物(12.0g，17.8)的二噁烷(20ml)/水(20ml)溶液中加入氢氧化锂(0.84g，35.6mmol)。90分钟不连续音波处理后，将反应物倾入碳酸氢钠溶液(12g/50ml H2O)和盐水(20ml)，然后用乙酸乙酯提取。合并的有机提取液用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到11.5g(100％)所需产物的黄褐色固体
1H-NMR(d，DMSO)1.17-1.31(m，15H)，1.40-1.70(m，4H)，2.45(m，2H)，4.33(m，1H)，6.40(s，1H)，7.00(m，1H)，7.05-7.23(m，6H)，7.40(m，1H)，7.55-7.71(m，3H)，7.76(d，J＝8 Hz，2H)，10.25(brs，1H)； MS(离子·喷射)646.6(M+1)；C32H38F3N5O6·0.7H2O的分析计算值C，58.39；H，6.03；N，10.64.实测值C，58.52；H，6.01；N，9.87*.
制备例39 在0℃搅拌下，向制备例38产物(6.0g，9.3mmol)的二甲基甲酰胺溶液中加入二甲胺盐酸盐(0.76g，9.3mmol)、二乙基氰基磷酸盐(1.41ml，9.3mmol)和三乙胺(1.29ml，9.3mmol)。30分钟后，再加入等量的二甲胺盐酸盐、DECP和三乙胺。30分钟后，反应混合物用乙酸乙酯(300ml)稀释并用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机提取液用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得到的粗品物质通过径向色谱法纯化(硅胶，4％甲醇的二氯甲烷溶液)，得到4.7g(75％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，CDCl3)1.25(s，9H)，1.42(s，6H)，1.60-1.80(m，4H)，1.90(brs，1H)，2.57(m，2H)，2.98(s，6H)，4.48(m，1H)，7.05-7.21(m，6H)，7.50(m，1H)，7.62-7.76(m，5H)，8.93(brs，1H)，10.93(brs，1H)；MS(离子·喷射)673.7(M+1).
化合物26和27 在室温下，将制备例39产物(4.7g，7.0mmol)在饱和的盐酸冰醋酸溶液(30ml)中搅拌。90分钟后，将该混合物浓缩。所得到的物质用乙酸乙酯稀释并用碳酸氢钠水溶液提取。有机提取液用硫酸钠干燥、过滤并浓缩，得到3.7g(93％)橙色固体。MS(离子喷射)573.4(M+1)。非对映异构体(3.4g)通过手性色谱层析(使用Kromasil-CHI常相柱)分离，得到1.40g(41％)异构体1和1.26g(37％)异构体2。各异构体溶解在饱和的盐酸冰醋酸溶液(4ml)中，随后浓缩，得到所需产物的黄褐色固体化合物26(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)1.41(s，3H)，1.42(s，3H)，1.51-1.73(m，4H)，2.53(m，2H)，2.82(s，3H)，2.84(s，3H)，4.39(m，1H)，6.91(s，1H)，7.10(m，3H)，7.18-7.29(m，3H)，7.55(d，J＝8Hz，2H)，7.78(d，J＝8Hz，2H)，7.91(brs，1H)，8.15(brs，3H)，8.38(d，J＝7.5Hz，1H)，10.78(brs，1H)；MS(离子·喷射)573.4(M+1)；C29H35F3N6O3·2.3HCl的分析计算值C，53.06；H，5.73；N，12.80.实测值C，52.90；H，5.66；N，12.70.化合物27(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)1.42(s，6H)，1.51-1.73(m，4H)，2.53(m，2H)，2.82(s，3H)，2.84(s，3H)，4.39(m，1H)，6.91(s，1H)，7.10(m，3H)，7.18-7.29(m，3H)，7.55(d，J＝8Hz，2H)，7.78(d，J＝8Hz，2H)，7.91(brs，1H)，8.15(brs，3H)，8.38(d，J＝7.5Hz，1H)，10.78(brs，1H)；MS(离子·喷射)573.4(M+1)；C29H35F3N6O3·2HCl的分析计算值C，53.96；H，5.78；N，13.02.实测值C，53.84；H，5.71；N，12.93.
实施例2-21制备例EX12A 如制备例EX4A所述，将制备例10产物(9.2g，15.4mmol)、4-甲基哌啶(1.83ml，15.4mmol)、 1-羟基苯并三唑(2.3g，17mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(3.5g，17mmol)在二甲基甲酰胺(100ml)中反应，得到9.7g(93％)所需产物(制备例EX12A)的黄褐色泡沫物
1H-NMR(d，DMSO)0.76(d，J＝6.1Hz，1.5H)，0.86(d，J＝6.1Hz，1.5H)，1.00(m，1H)，1.20-1.40(m，15H)，1.45-1.70(m，3H)，2.55-2.70(m，2H)，3.05(m，1H)，3.60(m，1H)，3.65-3.75(m，2H)，4.40(m，1H)，4.44(d，J＝2.6Hz，2H)，4.60(m，1H)，6.73(d，J＝11.3Hz，1H)，7.15-7.35(m，9H)，7.35-7.50(m，4H)，10.20(brs，1H).MS(离子·喷射)679.6(M+1)；Anal.C36H47FN6O6的分析计算值C，63.70；H，6.98；N，12.38.实测值C，63.44；H，6.86；N，12.22.
化合物28和29 如制备例2-7所述，将制备例EX12A产物(9.7g，14.3mmol与三氟乙酸(16ml))在二氯甲烷(40ml)中反应。得到6.8g(73％)所需产物(实施例12)的非对映异构体混合物。混合物(3.2g)通过HPLC纯化(8×15cm Prochrom柱，填充Kromasil CHI-DMP手性相，用在庚烷中的3A乙醇和二甲基乙胺的混合物作为洗脱剂)，得到0.8g(24％)异构体1和0.9g(26％)异构体2的白色固体
化合物28(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)0.75(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.88(d，J＝6.4Hz，1.5H)，1.10(m，1H)，1.35(m，1H)，1.45-1.70(m，8H)，2.60-2.75(m，2H)，3.15(m，1H)，3.65-3.85(m，3H)，4.35(m，1H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，6.95(d，J＝11.3Hz，1H)，7.20-7.49(m，9H)，7.45(m，1H)，7.52(m，1H)，8.05(brs，1H)，8.25(m，3H)，8.56(m，1H)，10.95(brs，1H)；tR＝6.73min；MS(离子·喷射)579.4(M+1)；C31H39FN6O4·2HCl·0.2CHCl3的分析计算值C，56.29；H，6.24；N，12.67.实测值C，56.47；H，6.17；N，12.24.
化合物29(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)0.75(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.88(d，J＝6.4Hz，1.5H)，1.10(m，1H)，1.35(m，1H)，1.45-1.70(m，8H)，2.60-2.75(m，2H)，3.15(m，1H)，3.65-3.85(m，3H)，4.35(m，1H)，4.52(s，2H)，4.75(m，1H)，6.95(d，J＝11.3Hz，1H)，7.20-7.49(m，9H)，7.45(m，1H)，7.52(m，1H)，8.05(brs，1H)，8.25(m，3H)，8.56(m，1H)，10.95(brs，1H)；tR＝9.09min；MS(离子·喷射)579.4(M+1)；C31H39FN6O4·2HCl的分析计算值C，57.14；H，6.34；N，12.90.实测值C，57.17；H，6.18；N，12.79.
实施例2-22制备例EX13A
如制备例5A所述，将制备例9产物(4.8g，16.0mmol)与10％披钯碳(5.0g)和四氢呋喃(160ml)反应，然后与制备例2产物(6.0g，16.0mmol)、1-羟基苯并三唑(2.4g，17.6mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(3.6g，17.6mmol)偶联，得到15.4g(77％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.17(t，J＝7.2Hz，3H)，1.23-1.45(m，15H)，1.45-1.57(m，6H)，7.16(q，J＝6.8Hz，2H)，4.40(m，1H)，6.45(s，1H)，7.05(m，1H)，7.10-7.30(m，8H)，7.40-7.48(m，3H)，7.54(s，1H)，10.20(brs，1H)；MS(离子·喷射)624.4(M+1)；C33H42FN5O6的分析计算值C，63.55；H，6.79；N，11.23.实测值C，63.83；H，6.78；N，11.38.
制备例EX13B 如制备例5所述，将制备例EX13A产物(14.8g，24.0mmol)与氢氧化锂(0.66g，29.0mmol)在二噁烷(200ml)和水(100ml)中反应，得到14.3g(100％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)1.25-1.40(m，15H)，1.50-1.75(m，6H)，4.40(s，1H)，6.60(s，1H)，7.05(s，1H)，7.10-7.30(m，8H)，7.40-7.50(m，3H)，7.55(s，1H)，10.2(brs，1H)，13.63(brs，1H)；MS(离子·喷射)596.5(M+1)；C31H38FN5O6·0.1二噁烷的分析计算值C，62.39；H，6.47；N，11.59.实测值C，62.16； H，6.56；N，11.28.
制备例EX13C 如制备例EX4A所述，将制备例13B产物(13.3g，23.1mmol)、4-甲基哌啶(3ml，23.1mmol)、1-羟基苯并三唑(3.4g，25.4mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(5.2g，25.4mmol)在二甲基甲酰胺(100ml)中反应，得到14.4g(93％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)0.76(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.86(d，J＝4.9Hz，1.5H)，1.00(m，1H)，1.25-1.45(m，17H)，1.45-1.75(m，8H)，2.60-2.80(m，2H)，3.75(m，1H)，4.30-4.45(m，2H)，6.71(d J＝11.7Hz，1H)，7.05(m，1H)，7.10-7.30(m，9H)，7.30-7.45(m，3H)，10.15(m，1H)；MS(离子·喷射)677.5(M+1)；C37H49FN6O5的分析计算值C，65.66；H，7.30；N，12.42.实测值C，65.78；H，7.19；N，12.44.化合物30和31
如制备例2-7所述，将制备例EX13C产物(13.8g，20.4mmol)与三氟乙酸(16ml))在二氯甲烷(40ml)中反应。得到10.5g(89％)所需混合物(实施例13)的黄褐色泡沫物。该混合物(4.0g)通过HPLC纯化(8×15cm Prochrom柱，填充Kromasil CHI-DMP手性相，用在庚烷中的3A乙醇和二甲基乙胺的混合物作为洗脱剂)，得到1.5g(38％)异构体1和0.77g(20％)异构体2的白色固体化合物30(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)0.75(t，J＝6.4Hz，1.5H)，0.87(t，J＝6.0Hz，1.5H)，1.15(m，1H)，1.35(m，1H)，1.45-1.80(m，12H)，2.55-2.75(m，3H)，3.05(m，1H)，3.65-3.75(m，2H)，4.30-4.50(m，2H)，6.94(d，J＝12Hz，1H)，7.10-7.20(m，2H)，7.20-7.40(m，7H)，7.45(m，1H)，7.55(m，1H)，8.08(m，1H)，8.15-8.30(m，3H)，8.44(t，J＝7.2Hz，1H)，10.90(brs，1H)；tR＝6.62 min；MS(离子·喷射)578.3(M+1)；Anal.C32H41FN6O3·2.3HCl的分析计算值C，58.81；H，6.61；N，12.72. 实测值C，57.91；H，6.55；N，12.72.
化合物31(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)0.75(t，J＝6.4Hz，1.5H)，0.87(t，J＝6.0Hz，1.5H)，1.15(m，1H)，1.35(m，1H)，1.45-1.80(m，12H)，2.55-2.75(m，3H)，3.05(m，1H)，3.65-3.75(m，2H)，4.30-4.50(m，2H)，6.94(d，J＝12Hz，1H)，7.10-7.20(m，2H)，7.20-7.40(m，7H)，7.45(m，1H)，7.55(m，1H)，8.08(m，1H)，8.15-8.30(m，3H)，8.44(t，J＝7.2Hz，1H)，10.90(brs，1H)；tR＝8.95 min；MS(离子·喷射)578.3(M+1)；C32H41FN6O3·2.3HCl的分析计算值C，58.81；H，6.61；N，12.72.实测值C，58.05；H，6.64；N，12.43.
实施例2-23制备例EX14A 如制备例4A所述，将制备例10B产物(0.6g，1.0mmol)、吡咯烷(0.08ml，1.0mmol)、1-羟基苯并三唑(0.15g，1.1mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.23g，1.1mmol)在二甲基甲酰胺(20ml)中反应，得到0.27g(41％)上述产物的白色泡沫物1H-NMR与结构是一致的。MS(FD)650.5(M+)；C34H43FN6O6·0.6H2O的分析计算值C，61.73；H，6.73；N，12 12.70。实测值C，61.98；H，6.43；N，12.66。
化合物32
如制备例2-7所述，将制备例EX14A产物(0.2g，0.3mmol)和三氟乙酸(4ml)在二氯甲烷(6ml)中反应，得到0.16g(84％)所需异构体混合物的黄色固体1H-NMR与结构是一致的。C29H36FN6O4的MS(highres)计算值551.2782。实测值551.2790。
制备例2-24化合物33 在室温搅拌下，向制备例75产物(3.30g，5.3mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。3小时后，将该混合物浓缩，残渣用过量碳酸氢钠水溶液处理。所得到的混合物用乙酸乙酯提取，合并的有机提取液用1N氢氧化钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥并钠。残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到1.40g(51％)所需产物的淡黄褐色固体ESMS(M+H)+525.3。1H-NMR与产物是一致的。C27H33N6O4F.1.3甲醇的分析计算值C，60.03；H，6.80；N，14.84。实测值C，60.19；H，6.81；N，14.56。如前实施例2-9所述分离异构体混合物(3.20g)，得到1.57g异构体1(tR＝7.57min)和0.88g异构体2(tR＝10.43min)。将0.88g(1.68mmol)异构体2溶解在乙酸乙酯中并用饱和的盐酸乙醚溶液处理。将所得到的混合物浓缩，用乙醚洗涤，得到0.97g所需产物ESMS(M+H)+525.4，526.7。1H-NMR与产物是一致的。C25H33N6O4F·2.75HCl的分析计算值C，51.73；H，6.07；N，13.41。实测值C，51.62；H，5.74；N，13.34。
实施例2-25制备例54 如制备例EX4A所述，将制备例10产物(1.0g，1.7mmol)二甲胺盐酸盐(0.14g，1.7mmol)、三乙胺(0.26ml，1.9mmol)、1-羟基苯并三唑(0.26g，1.9mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.4g，1.9mmol)在二甲基甲酰胺(30ml)中反应，得到0.55g(52％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR与结构是一致的。MS(离子喷射)625.4(M+1)；C32H41FN6O6的分析计算值C，61.53；H，6.61；N，13.45。实测值C，61.22；H，6.33；N，13.44。
化合物34
如制备例2-7所述，将制备例54产物(0.54g，0.86mmol)和三氟乙酸(2ml)、二氯甲烷(6ml)反应，得到0.4g(77％)所需产物异构体混合物1H-NMR与结构是一致的。MS(离子喷射)525.4(M+1)；C27H33FN6O6·2HCl的分析计算值C，54.27；H，5.90；N，14.06。实测值C，53.11；H，5.70；N，13.58。
制备例2-26化合物35 在室温搅拌下，向制备例75产物(1.45g，2.29mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入三氟乙酸(15ml)。3小时后，将该混合物浓缩，所得到的物质用过量碳酸氢钠水溶液处理。混合物的水溶液用乙酸乙酯提取，合并的有机提取液浓缩。所得到的残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到1.55g所需产物ESMS(M+H)+523.3。如前实施例2-9所述分离异构体混合物(3.44g)，得到0.98g纯异构体1(tR＝7.94min)和0.81g异构体2(tR＝10.57min)。将0.80g(1.53mmol)异构体2溶解在乙酸乙酯/甲醇中并用饱和的盐酸乙醚溶液处理。将所得到的混合物浓缩，得到0.90g(92％)所需产物的淡黄褐色固体ESMS(M+H)+523.4，524.5。1H-NMR与产物是一致的。C28H35N6O3F·3.25HCl的分析计算值C，52.46；H，6.01；N，13.11。实测值C，52.49；H，6.23；N，11.80。
实施例2-27制备例EX15A 如制备例5A所述，将制备例11产物(2.0g，5.8mmol)在氢环境下用10％披钯碳(0.8g)和四氢呋喃(70ml)还原，然后与制备例1产物(2.2g，5.8mmol)、1-羟基苯并三唑(0.86g，6.4mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(1.3g，6.4mmol)偶联，得到0.7g(18％)所需产物的黄褐色泡沫物(制备例15A)1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)683(M+)；C38H45N5O7的分析计算值C，66.75；H，6.63；N，10.34。实测值C，66.79；H，6.48；N，10.32。
制备例EX15B 如制备例5所述，将制备例EX15A产物(0.7g，1.0mmol)与氢氧化锂(0.03g，1.2mmol)在二噁烷(20ml)和水(10ml)中反应，得到0.66g(100％)所需产物(制备例EX15A)的黄褐色泡沫物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)656(M+)；C36H41N5O7的分析计算值C，65.94；H，6.30；N，10.68。实测值C，65.90；H，6.37；N，10.42。
制备例EX15C 如制备例EX4A所述，将制备例15B产物(0.7g，1.1mmol)与4-甲基哌啶(0.13ml，1.1mmol)、1-羟基苯并三唑(0.17g，1.2mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.25g，1.2mmol)在二甲基甲酰胺(40ml)中反应，得到0.52g(65％)上述产物的黄褐色泡沫物1H-NMR与结构是一致的；MS(FD)728.4(M+)；C37H47F3N6O6的分析计算值C，60.98；H，6.50；N，11.53。实测值C，61.18；H，6.35；N，11.44。
化合物38和39 如制备例2-7所述，将制备例EX15C产物(0.36g，0.49mmol)与三氟乙酸(4ml)在二氯甲烷(12ml)中反应，得到0.3g(88％)所需混合物(实施例15)的异构体。非对映异构体(4g，3.6mmol)通过HPLC拆分(Kromasil CHI-DMP手性固定相，3A乙醇/二甲基乙胺/庚烷作为洗脱剂)，得到如实施例2-9所述在形成其各自盐酸盐后彼此分离的0.6g(16％)异构体1和0.5mg(12％)异构体2的白色固体化合物38(异构体1).1H-NMR与结构是一致的；tR＝6.9min；MS(离子喷射)637.4(M+1)；C37H44N6O4·2.5HCl的分析计算值C，61.05；H，6.44；N，11.54。实测值C，60.89；H，6.53；N，11.25。
化合物31(异构体2).1H-NMR与结构是一致的；tR＝9.2min；MS(离子喷射)637.4(M+1)；C37H44N6O4·2.6HCl的分析计算值C，60.75；H，6.42；N，11.49。实测值C，60.67；H，6.63；N，11.18。
实施例2-28制备例EX16A 如制备例EX2A所述，用制备例12B产物，异构体1(0.40g，0.80mmol)的THF(20ml)溶液和氢氧化锂(0.04g，0.96mmol)的水(10ml)溶液制备得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)反应，得到粗品酰基氯。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)和4-甲基哌啶(0.24ml，2.89mmol)反应，得到所需产物(制备例EX16A)(0.30g，90％产率)的无色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C24H26N4O3·0.6H2O的分析计算值C，68.88；H，6.26；N，13.39。实测值C，67.40；H，6.72；N，12.45。FDMS(M+)-419。
制备例EX16B 如制备例EX2B所述，用制备例EX16A(0.35g，0.84mmol)和5％披钯碳(0.35g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.11g，0.84mmol)、制备例2产物(0.32g，0.84mmol)和DCC(0.17g，0.92mmol)反应，得到所需产物(制备例EX16B)(0.22g，35％产率)淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C44H56N6O5的分析计算值C，70.56；H，7.54；N，11.22。实测值C，70.22；H，7.58；N，11.21；ISMS(M+)-749。
化合物40 如制备例2-13所述，用制备例EX16B产物(0.22g，0.29mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(实施例16)(0.19g，％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C39H50N6O3Cl2的分析计算值C，64.90；H，6.98；N，11.64。实测值C，66.48；H，7.24；N，11.96；FDMS(M+)-649。
制备例2-29制备例EX17A 如制备例EX2A所述，用制备例12B产物，异构体1(1.00g，2.02mmol)的THF(20ml)溶液和氢氧化锂(0.13g，3.09mmol)的水(10ml)溶液制备得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(20ml)中并与催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)反应。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(20ml)中并与4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)和吡咯烷(0.65ml，7.76mmol)反应，得到所需产物(制备例EX17A)(0.80g，98％产率)的无色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C22H22N4O3的分析计算值C，67.68；H，5.68；N，14.34。实测值C，65.36；H，5.54；N，13.43。ISMS(M+)-391。
制备例EX17B 如制备例EX2B所述，用制备例EX17A(0.80g，2.05mmol)和5％披钯碳(0.80g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.28g，2.05mmol)、制备例1产物(0.78g，2.05mmol)和DCC(0.46g，2.05mmol)反应，得到所需产物(制备例EX17B)(0.76g，51％产率)淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C41H50N6O6的分析计算值C，68.12；H，6.97；N，11.63。实测值C，66.93；H，6.74；N，11.24；ISMS(M+)-723。
化合物41 如制备例2-13所述，用制备例EX17B产物(0.76g，1.05mmol)、三氟乙酸(2.0ml)、苯甲醚(0.2ml)和二氯甲烷(8.0ml)制备，得到所需产物(实施例17)(0.76g，85％)的灰白色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C40H44N6O8F6的分析计算值C，56.47；H，5.21；N，9.88。实测值C，56.24；H，5.32；N，9.86；ISMS(M+)-623。
制备例2-30制备例EX18A 如制备例EX2B所述，用制备例17A产物(0.60g，1.54mmol)和5％披钯碳(0.60g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.21g，1.54mmol)、制备例2产物(0.58g，1.54mmol)和DCC(0.35g，1.69mmol)反应，得到所需产物(制备例EX18A)(0.56g，50％产率)淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C42H52N6O5的分析计算值C，69.98；H，7.27；N，11.66。实测值C，68.71；H，6.92；N，11.39。ISMS(M+)-721。
化合物42 如制备例2-13所述，用制备例EX18A产物(0.52g，0.72mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(实施例18)(0.47g，94％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C37H46N6O3Cl2的分析计算值C，64.06；H，6.68；N，12.11。实测值C，62.18；H，6.59；N，11.78；ISMS(M+)-621。
制备例2-31制备例470 向Parr反应瓶内5％披钯碳(2.60g)和四氢呋喃(100ml)悬浮液中加入实施例11产物(5.00g，15.3mmol)的固体。将反应瓶放在Parr摇动器上并在室温和氢环境(40 psi)下摇动2小时。将反应物通过硅藻土521垫板过滤，然后将滤液在0℃下加到先前制备的制备例2产物(5.80g，15.3mmol)、1，3-二环己基碳化二亚胺(3.48g，16.9mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(2.29g，16.9mmol)的四氢呋喃(50ml)混合物中。反应物在室温下搅拌16小时，然后将溶剂减压蒸发。残渣溶解在乙酸乙酯中并将1，3-二环己基脲过滤掉。滤液通过闪式色谱层析纯化(硅胶，80％乙酸乙酯/己烷-5％甲醇/乙酸乙酯)得到所需要产物的淡黄色固体泡沫物(7.96g，80％)1H NMR与结构是一致的MS(IS)m/e 682(M+1)；C39H47N5O6的分析计算值C，68.70；H，6.95；N，10.27。实测值C，68.27；H，6.86；N，10.77。
制备例471 在室温下，向制备例470产物(8.73g，1 3.3mmol)的四氢呋喃(120ml)和水(60ml)溶液中加入氢氧化锂(2.23g，53.2mmol)。反应物在室温下搅拌35分钟，然后，减压蒸发四氢呋喃。残渣用水稀释并用乙醚提取(乙醚提取液弃去)。水层用1N HCl酸化(pH 2-3)，然后用乙醚和乙酸乙酯提取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩，得到不必纯化即可以进一步使用的所需产物的淡黄色固体泡沫物(8.18g，98％)1H NMR与结构是一致的MS(IS)m/e 654(M+1)；C37H43N5O6的分析计算值C，67.98；H，6.63；N，10.71。实测值C，66.83；H，6.59；N，10.50。
制备例472 在0℃下，向制备例471产物(1.00g，1.52mmol)的无水二氯甲烷(30ml)溶液中加入N-甲基吗啉(0.20ml，1.82mmol)和2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.35g，1.98mmol)。将该混合物搅拌1小时，温热至室温，这时加入2M的N，N-二甲胺溶液(0.84ml，1.68mmol)。反应物在室温下搅拌2小时，然后加入2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.08g)。该反应物在室温下再搅拌1小时并减压蒸发溶剂。残渣溶解在乙酸乙酯中，将固体过滤掉，滤液通过闪式色谱层析纯化(硅胶，90％乙酸乙酯/己烷-10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的淡黄色固体泡沫物(0.83g，80％)1H NMR-与结构是一致的；MS(IS)m/e681(M+1)；C39H48N6O5的分析计算值C，68.80；H，7.11；N，12.34实测值C，68.23；H，7.03；N，12.66。
化合物43 在0℃搅拌下，通过注射器向制备例472产物(3.10g，4.52mmol)和苯甲醚(0.52ml，4.75mmol)的无水二氯甲烷(100ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。将反应物搅拌4小时，反应物温热至室温，然后通过倾入冰冷的饱和碳酸氢钠中骤停。收集有机层并用二氯甲烷提取水层两次。合并的有机层用碳酸氢钠、水和盐水洗涤，然后干燥(硫酸钠)并真空蒸发，得到淡黄色固体泡沫物。非纯品泡沫物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/乙酸乙酯-5％三乙胺/10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的灰白色固体泡沫物(2.40g，91％)。1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 581(M+1)；C34H40N6O3的分析计算值C，70.32；H，6.94；N，14.47。实测值C，69.36；H，6.71；N，14.10。
非对映异构体的分离将产物通过HPLC[Kromasil填充材料，15％3A乙醇/85％庚烷(w/0.2％DMEA)]拆解，得到两个非对映异构体。将第二个非对映异构体(0.76g)(滞留时间＝9.98 min)溶解在乙酸乙酯(15ml)中，然后在搅拌下，加入饱和的盐酸乙醚溶液(2ml)。通过真空过滤收集白色沉淀并用乙醚冲洗。真空干燥得到实施例253(0.70g)白色无定形固体1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 581(M+1)；C34H40N6O3·HCl的分析计算值C，66.18；H，6.70；N，13.62。实测值C，64.39；H，6.69；N，13.19。
实施例2-32制备例137 如制备例5A所述，将制备例136产物(4.80g，14.77mmol)与5％披钯碳(2.5g)在氢环境下，在四氢呋喃(100ml)中反应，然后与制备例1产物(5.61g，14.77mmol)、EDCI(2.79g，16.25mmol)、1-羟基苯并三唑(2.00g，14.77mmol)和N-甲基吗啉(1.6ml，14.77mmol)偶联，得到6.04g(62％)上述产物的淡橙色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C36H43N5O7的分析计算值C，65.74；H，6.59；N，10.65。实测值C，64.02；H，6.09；N，10.13；ISMS(M+)-658。
制备例138 向氢氧化锂(0.38g，9.16mmol)的水(50ml)溶液中加入制备例137产物(6.04g，9.16mmol)的四氢呋喃(100ml)溶液。30分钟后，加入水并将该混合物用乙醚洗涤。水层用碳酸氢钠调至pH＝3.0，用氯化钠饱和，并用乙酸乙酯洗涤。合并的有机提取液用硫酸钠干燥并浓缩。在室温搅拌下，向所得到的粗品的二甲基甲酰胺(50ml)溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(2.08g，10.01mmol)、1-羟基苯并三唑(1.24g，9.16mmol)和4-甲基哌啶(1.1ml，9.16mmol)。18小时后，将反应物用饱和碳酸氢钠骤停并用乙酸乙酯洗涤。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。粗品通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/二氯甲烷)，得到4.9g(75％)上述产物的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C40H50N6O6的分析计算值C，67.58；H，7.09；N，11.82。实测值C，65.60；H，7.09；N，11.50；ISMS(M+)-711。
化合物44和45 在室温搅拌下，向制备例138产物(4.90g，6.89mmol)的二氯甲烷(40ml)和苯甲醚(1.0ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。3小时后，将该反应物用饱和碳酸氢钠骤停并用乙酸乙酯提取。合并的有机提取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。所得到的粗品通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/二氯甲烷)，得到对映体混合物。该物质通过HPLC(Kromsil CHI-DMP手性固定相，3A乙醇/二甲基乙胺/庚烷作为洗脱剂)得到所需产物的游离胺。分离的非对映异构体各溶解在乙酸乙酯中并用饱和的盐酸乙醚溶液处理。所得到的沉淀过滤，得到所需产物(426779-0.64g，14％(426780-0.43g，9％)的黄褐色固体化合物441H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C35H44N6O4Cl2的分析计算值C，61.49；H，6.49；N，12.29。实测值C，60.28；H，6.38；N，11.74；ISMS(M+)-611。
化合物451H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的。C35H44N6O4Cl2的分析计算值C，61.49；H，6.49；N，12.29。实测值C，47.81；H，5.29；N，9.83；ISMS(M+)-611。
实施例2-33 在0℃下，向制备例467产物(2.90g，4.61mmol)的无水二氯甲烷(40ml)溶液中加入N-甲基吗啉(0.61ml，5.53mmol)和2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(1.05g，5.99mmol)。将该混合物搅拌1小时，温热至室温，这时加入4-甲基哌啶(0.60ml，5.07mmol)。反应物在室温下搅拌2小时，然后加入更多的2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.20g)。该反应物在室温下再搅拌1h并减压蒸发溶剂。残渣溶解在乙酸乙酯中，将固体过滤掉，滤液通过闪式色谱层析纯化(硅胶，乙酸乙酯-10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的淡黄色固体泡沫物(2.99g，92％)1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 709(M+1)；C41H52N6O5的分析计算值C，69.47；H，7.39；N，11.85实测值C，69.30；H，7.47；N，11.92。
化合物46和47 在0℃下，通过注射器向制备例468产物(4.40g，6.20mmol)和苯甲醚(0.71ml，6.50mmol)的无水二氯甲烷(140ml)溶液中加入三氟乙酸(14ml)。将反应物搅拌4小时，反应物温热至室温，然后通过倾入冰冷的饱和碳酸氢钠中淬火。收集有机层并用二氯甲烷提取水层两次。合并的有机层用碳酸氢钠、水和盐水洗涤，然后干燥(硫酸钠)并真空蒸发，得到淡黄色固体泡沫物。非纯品泡沫物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/乙酸乙酯-5％三乙胺/10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的淡黄色固体泡沫物(3.75g，99％)。1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 609(M+1)；C36H44N6O3的分析计算值C，71.03；H，7.29；N，13.80。实测值C，69.83；H，7.17；N，13.54。
非对映异构体的分离将产物通过HPLC[Kromasil填充材料，15％3A乙醇/85％庚烷(w/0.2％DMEA)]拆解，得到两个非对映异构体。将第一个非对映异构体(1.30g)(滞留时间＝6.77 min)溶解在乙酸乙酯(20ml)中，然后在搅拌下，加入饱和的盐酸乙醚溶液(3ml)。通过真空过滤收集白色沉淀并用乙醚冲洗。真空干燥得到实施例249(1.10g)白色无定形固体1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 609(M+1)；C36H44N6O3·HCl的分析计算值C，67.02；H，7.03；N，13.03。实测值C，66.53；H，6.96；N，12.80。将第二个非对映异构体(1.50g)(滞留时间＝9.17min)溶解在乙酸乙酯(20ml)中，然后在搅拌下，加入饱和的盐酸乙醚溶液(3ml)。通过真空过滤收集白色沉淀并用乙醚冲洗。真空干燥得到实施例250(1.47g)白色无定形固体1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 609(M+1)；C36H44N6O3·HCl的分析计算值C，67.02；H，7.03；N，13.03。实测值C，66.08；H，6.95；N，12.71。
实施例2-34制备例469 在0℃下，向制备例467产物(5.10g，8.11mmol)的无水二氯甲烷(75ml)溶液中加入N-甲基吗啉(1.07ml，9.73mmol)和2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(1.85g，10.5mmol)。将该混合物搅拌1小时，温热至室温，这时加入吡咯烷(0.75ml，8.93mmol)。反应物在室温下搅拌2小时，然后加入更多的2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.20g)。该反应物再搅拌1小时并减压蒸发溶剂。残渣溶解在乙酸乙酯中，将固体过滤掉，滤液通过闪式色谱层析纯化(硅胶，乙酸乙酯-10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的淡黄色固体泡沫物(5.30g，96％)1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 681(M+1)；C39H48N6O5的分析计算值C，68.80；H，7.11；N，12.34实测值C，68.07；H，7.10；N，12.85。
化合物48和49 在0℃下，通过注射器向制备例469产物(5.15g，7.55mmol)和苯甲醚(0.86ml，7.93mmol)的无水二氯甲烷(150ml)溶液中加入三氟乙酸(15ml)。将反应物搅拌4小时，反应物温热至室温，然后通过倾入冰冷的饱和碳酸氢钠中骤停。收集有机层并用二氯甲烷提取水层两次。合并的有机层用碳酸氢钠、水和盐水洗涤，然后干燥(硫酸钠)并真空蒸发，得到淡黄色固体泡沫物。非纯品泡沫物通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/乙酸乙酯-5％三乙胺/10％甲醇/乙酸乙酯)，得到所需产物的灰白色固体泡沫物(4.11g，94％)。1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 581(M+1)；C34H40N6O3的分析计算值C，70.34；H，6.94；N，14.47。实测值C，70.34；H，6.79；N，13.70。
非对映异构体的分离将产物通过HPLC[Kromasil填充材料，15％3A乙醇/85％庚烷(w/0.2％DMEA)]拆解，得到两个非对映异构体。将第一个非对映异构体(1.70g)(滞留时间＝7.72min)溶解在乙酸乙酯(20ml)中，然后在搅拌下，加入饱和的盐酸乙醚溶液(3ml)。通过真空过滤收集白色沉淀并用乙醚冲洗。真空干燥得到实施例251(1.27g)灰白色无定形固体1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 581(M+1)；C34H40N6O3·2HCl的分析计算值C，66.17；H，6.70；N，13.62。实测值C，65.65；H，6.90；N，13.48。将第二个非对映异构体(1.40g)(滞留时间＝10.81min)溶解在乙酸乙酯(20ml)中，然后在搅拌下，加入饱和的盐酸乙醚溶液(3ml)。通过真空过滤收集白色沉淀并用乙醚冲洗。真空干燥得到实施例252(1.47g)灰白色无定形固体1H NMR与结构是一致的；MS(IS)m/e 581(M+1)；C34H40N6O3·2HCl的分析计算值C，66.17；H，6.70；N，13.62。实测值C，65.73；H，7.03；N，13.31。实施例2-35制备例142 如制备例5A所述，将制备例136产物(8.7g，27mmol)在氢环境下，与10％披钯碳(4.0g)反应，然后与制备例1产物(10.14g，26.7mmol)、1-羟基苯并三唑(4.49g，29.3mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(6.05g，29.3mmol)偶联，得到5.4g(31％)标题化合物的黄褐色固体1H NMR(d6-DMSO，d)1.26(t，J＝7.4Hz，3H)，1.40(s，9H)，1.55(m，6H)，3.55(m，1H)，4.02(s，1H)，4.25(m，2H)，4.50(dd，J＝10.0Hz，2H)，4.86(s，1H)，5.92(s，1H)，7.02(d，J＝7.0Hz，1H)，7.22(m，8H)，7.33(m，3H)，7.41(s，1H)，7.49(m，1H)，7.80(m，2H)，9.22(bs，1H). 离子喷射MS(M++1)658.分析(C36H43N5O7)C，H，N.
制备例143 如制备例5所述，将制备例142产物(5.39g，8.19mmol)和氢氧化锂(361mg，8.60mmol)在二噁烷(120ml)和水(75ml)中反应，得到4.92g(95％)标题化合物的金黄色固体1H NMR(d6DMSO，d)1.28(m，15H)，3.57(m，1H)，3.66(m，1H)，4.43(s，2H)，4.48(d，J＝5.3Hz，1H)，4.56(bs，1H)，5.75(bs，1H)，7.13(bs，1H)，7.26(m，6H)，7.31(d，J＝6.0Hz，2H)，7.40(m，1H)，7.45(m，2H)，7.65(s，1H)，7.83(m，3H)，10.10(bs，1H).离子·喷射MS(M++1)630.
制备例144 如制备例EX4A所述，将制备例143产物(4.88g，7.75mmol)、二甲胺(4.2ml，8.53mmol，2.0M的四氢呋喃溶液)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(1.16g，8.53mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(1.76g，8.53mmol)在四氢呋喃(120ml)中反应，得到2.06g(40％)标题化合物的黄色泡沫物41H NMR(d6-DMSO，d)1.28(m，15H)，2.92(s，3H)，2.95(s，3H)，3.60(m，1H)，4.43(d，J＝4.5Hz)，4.57(bs，1H)，6.83(s，1H)，7.24(m，8H)，7.39(m，1H)，7.50(m，1H)，7.56(m，2H)，7.88(s，1H)，7.96(m，3H).电子喷射(M++1)657分析.(C36H44N6O4)H，N；C计算值65.84；实测值63.70.
化合物50 在室温搅拌下，向用干燥的盐酸饱和的冰醋酸溶液(50ml，～3N的盐酸溶液)中加入制备例144产物(1.87g，2.85mmol)。2小时后，浓缩溶液，用碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。所得到的粗品提供HPLC(柱)纯化，得到0.5g所需异构体，将其溶解在乙酸乙酯中并滴加到搅拌下用盐酸饱和的无水乙醚溶液中。通过过滤收集所得到的白色沉淀并干燥，得到474mg(79％)白色固体1H NMR(d6-DMSO，d)1.47(m，6H)，2.90(s，3H)，2.95(s，3H)，3.65(dd，J＝9Hz，2H)，4.49(d，J＝7.9Hz，2H)，4.73(m，1H)，6.93(s，1H)，7.18(s，1H)，7.26(m，6H)，7.49(d，J＝8.7Hz，1H)，7.60(m，2H)，7.84(d，J＝10.5Hz，1H)，7.98(m，3H)，8.14(d，J＝9.4Hz，2H)，8.45(d，J＝6.8Hz，1H)，10.74(bs，1H). FAB+exact MS(M++1)557.2876计算值，557.2873 实测值分析.(C31H39N6O4Cl3)H，N；C计算值56.01；实测值，56.72.
实施例2-36制备例139 如制备例5A所述，将制备例136产物(1.31g，4.02mmol)在氢环境下，与10％披钯碳(0.5g)在四氢呋喃(50ml)中反应，然后与制备例2产物(1.52g，4.02mmol)、1-羟基苯并三唑(0.68g，4.42mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.91g，4.42mmol)偶联，得到1.06g(38％)标题化合物的黄褐色固体1H NMR(d6-DMSO，d)1.22(m，18H)，1.50(m，4H)，2.55(m，2H)，4.26(q，J＝9.0Hz，2H)，4.37(bs，1H)，5.75(s，1H)，6.60(s，1H)，7.02(bs，1H)，7.16(m，3H)，7.22(m，3H)，7.43(m，1H)，7.50(d，J＝9.3Hz，2H)，7.60(m，2H)，7.97(m，3H)，10.21(m，1H). 离子喷射(M++1)656.
制备例140 如制备例5所述，将制备例139产物(1.06g，1.62mmol)和氢氧化锂(75mg，1.78mmol)在二噁烷(30ml)和水(15ml)中反应，得到1.01g(100％)标题化合物的金黄色固体1H NMR(d6-DMSO，d)1.20(m，15H)，1.50(m，4H)，2.55(m，2H)，4.38(bs，1H)，6.58(s，1H)，7.02(bs，1H)，7.17(m，3H)，7.25(m，3H)，7.35(m，1H)，7.50(m，2H)，7.58(m，2H)，7.98(m，3H)，8.09(m，1H)，10.36(bs，1H).离子喷射MS(M++1)628.
制备例141 如制备例EX4A所述，将制备例140产物(500mg，0.80mmol)、二甲胺盐酸盐(72ml，0.88mmol)、三乙胺(0.12ml，0.88mmol)1-羟基苯并三唑(134mg，0.88mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(18mg，0.88mmol)在二甲基甲酰胺(20ml)中反应，得到342mg(66％)标题化合物的白色固体1H NMR(d6-DMSO，d)1.27(m，15H)，1.57(m，4H)，2.55(m，2H)，2.90(s，3H)，2.95(s，3H)，4.38(bs，1H)，6.80(s，1H)，7.02(bs，1H)，7.15(m，3H)，7.22(m，3H)，7.35(m，1H)，7.47(m，2H)，7.57(m，2H)，7.88(s，1H)，7.98(m，3H)，10.15(bs，1H).离子喷射 MS(M++1)655.分析.(C37H46N6O5)H，N；C计算值67.87；实测值66.19. 如实施例2-7所述，将制备例141产物(333mg，0.51mmol)和三氟乙酸(5ml)在二氯甲烷(17mL)中反应。得到52mg(65％)黄褐色固体，将该固体通过HPLC(Kromsil CHI-DMP手性固定相，3A乙醇/二甲基乙胺/庚烷作为洗脱剂)纯化，得到游离胺，用盐酸酸化后得到的所需产物1H NMR(d6-DMSO，d)1.21(m，6H)，1.57(m，4H)，2.54(m，2H)，2.90(s，3H)，2.95(s，3H)，4.41(bs，1H)，6.82(s，1H)，7.02(bs，1H)，7.14(m，3H)，7.24(m，3H)，7.48(m，2H)，7.57(m，2H)，7.87(s，1H)，7.97(m，3H)，8.12(bs，1H)，10.40(s，1H).FAB+exact MS(M++1)555.3084计算值，555.3079 实测值分析.(C32H41N6O3Cl3)C，H，N.
实施例2-37制备例EX20A 如制备例6B所述，用制备例13B产物(10.9g，32.27mmol)的THF(150ml)溶液和氢氧化锂(1.63g，38.73mmol)的水(75ml)溶液制备，得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(150ml)中并与催化剂DMF(0.5ml)和过量草酰氯(23ml)反应。所得到的粗品泡沫物溶解在THF(50ml)中并与n-BuLi(1.6M的己烷溶液，30.1ml，48.23mmol)、(4R，5S)-(+)-4-甲基-5-苯基-2-噁唑烷酮(8.55g，48.23mmol)和THF(150ml)反应，得到所需产物(制备例EX20)非对映异构体1(6.13g，41％产率)和非对映异构体2(4.82g，32％产率)的无色泡沫物非对映异构体1-1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C26H22N4O5的分析计算值C，66.38；H，4.71；N，11.91。实测值C，65.24；H，4.72；N，11.59；ISMS(M+)-471；非对映异构体2-1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C26H22N4O5的分析计算值C，66.38；H，4.71；N，11.91。实测值C，66.45；H，4.77；N，12.20；ISMS(M+)-471。
制备例EX20B 如制备例EX2A所述，用制备例EX20A产物，非对映异构体1(1.00g，2.13mmol)的THF(20ml)溶液和氢氧化锂(0.10g，2.33mmol)的水(10ml)制备，溶液得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(20ml)中并与催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)反应。所得到的粗品泡沫物溶解在二氯甲烷(20ml)中并与4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)和吡咯烷(0.61ml，6.39mmol)反应，得到所需产物(制备例20B)的无色泡沫物(0.42g，54％产率)1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C20H20N4O3的分析计算值C，65.92；H，5.53；N，15.38；实测值C，61.50；H，5.41；N，13.91；ISMS(M+)-365。
制备例EX20C 如制备EX2B所述，用制备例EX20B产物(0.42g，1.15mmol)和5％披钯碳(0.40g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.16g，1.15mmol)、制备例1产物(0.44g，1.15mmol)和DCC(0.26g，1.28mmol)反应，得到所需产物(制备例EX20C)(0.41g，51％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C39H48N6O6的分析计算值C，67.22；H，6.94；N，12.06。实测值C，67.66；H，6.95；N，11.66；ISMS(M+)-697。
化合物52 如实施例Z2所述，用制备例EX20C产物(0.41g，0.59mmol)、三氟乙酸(2.0ml)、苯甲醚(0.2ml)和二氯甲烷(8.0ml)制备，得到所需产物(制备例20)(0.48g，99％)的灰白色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与上述结构是一致的；C38H42N6O8F6的分析计算值C，55.34；H，5.13；N，10.19。实测值C，55.60；H，4.92；N，9.89；ISMS(M+)-597。
实施例2-38制备例44 如制备EX2B所述，用制备例21产物(0.27g，0.85mmol)和5％披钯碳(0.30g，催化剂，20ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.11g，0.85mmol)、制备例2产物(0.32g，0.85mmol)、N-甲基吗啉(0.10ml，0.S5mmol)和EDCI(0.16g，0.93mmol)反应，得到所需产物(0.70g，46％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C35H48N6O6的分析计算值C，66.43；H，7.65；N，13.28。实测值C，63.53；H，6.83；N，12.38；ISMS(M+)-649。
化合物53 如实施例2-7所述，用制备例44产物(0.19g，0.29mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(0.16g，84％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与上述结构是一致的；C30H42N6O4Cl2的分析计算值C，57.97；H，6.81；N，13.52。实测值C，57.54；H，6.36；N，13.04；FDMS(M+)-549。
实施例2-39制备例21
如制备例17所述，用制备例EX9A产物，对映异构体1(2.31g，5.15mmol)的THF(50ml)溶液和氢氧化锂(0.26g，6.18mmol)的水(25ml)溶液制备，得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)反应，得到粗品酰基氯。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)和二甲胺(2.0M的THF溶液，7.7ml，15.46mmol)反应，得到所需产物(1.57g，96％产率)的无色泡沫物1HNMR(300MHz，CDCl3)与产物是一致的；C15H18N4O4的分析计算值C，56.60；H，5.70；N，17.60；实测值C，57.04；H，6.09；N，16.82；ISMS(M+)-319。
制备例45 如制备例EX2B所述，用制备例21(0.75g，2.36mmol)和5％披钯碳(0.80g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.32g，2.36mmol)、制备例1产物(0.90g，2.36mmol)和DCC(0.54g，2.60mmol)反应，得到所需产物(0.86g，56％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)与结构是一致的；C37H50N6O6的分析计算值C，62.75；H，7.12；N，12.91；实测值C，62.65；H，6.95；N，12.76；ISMS(M+)-651。
化合物54 如实施例2-7所述，用制备例45产物(0.84g，1.29mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(0.69g，86％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C29H38N6O5Cl2的分析计算值C，55.86；H，6.47；N，13.48；实测值C，55.31；H，6.52；N，13.01；ISMS(M+)-551。
实施例2-40制备例46 如制备EX2B所述，用制备例21产物(0.80g，2.52mmol)和5％披钯碳(0.80g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.34g，2.52mmol)、制备例37产物(0.99g，2.52mmol)和DCC(0.57g，2.77mmol)反应，得到所需产物(0.77g，46％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C37H50N6O6的分析计算值C，63.72；H，6.87；N，14.86。实测值C，63.45；H，6.86；N，14.76；ISMS(M+)-660。
化合物55 如实施例2-7所述，用制备例46产物(0.75g，1.13mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(0.62g，87％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与上述结构是一致的；C30H37N7O4Cl2的分析计算值C，56.96；H，6.21；N，15.50。实测值C，55.48；H，6.03；N，14.63；FDMS(M+)-560。
实施例2-41制备例24 如制备例EX2A所述，用制备例12B产物，对映异构体1(0.50g，1.00mmol)的THF(20ml)溶液和氢氧化锂(0.05g，1.10mmol)的水(10ml)溶液制备，得到粗品酸。所得到的粗品固体溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与催化剂DMF(0.1ml)和过量草酰氯(5g)反应，得到粗品酰基氯。所得到的粗品泡沫物溶解在无水二氯甲烷(50ml)中并与4-二甲基氨基吡啶(催化剂，10mg)、N-甲基吗啉(0.33ml，3.00mmol)和二甲胺盐酸盐(0.13g，1.50mmol)反应，得到所需产物(0.30g，82％产率)的无色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)与产物是一致的；C20H20N4O3的分析计算值C，65.92；H，5.53；N，15.37；实测值C，64.17；H，5.41；N，14.15；ISMS(M+)-365。
制备例50 如制备例EX2B所述，用制备例24(0.30g，0.82mmol)和5％披钯碳(0.30g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.11g，0.82mmol)、制备例2产物(0.31g，0.82mmol)和DCC(0.19g，0.90mmol)反应，得到所需产物(0.32g，56％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C40H50N6O5的分析计算值C，69.14；H，7.25；N，12.09；实测值C，67.82；H，7.07；N，11.62；ISMS(M+)-695。
化合物56 如实施例2-7所述，用制备例50产物(0.32g，mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(0.26g，％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C35H44N6O3Cl2的分析计算值C，62.96；H，6.64；N，12.59；实测值C，60.05；H，6.31；N，11.98；FDMS(M+)-595。
实施例2-42制备例37 在搅拌下，将N-基吗啉(4.79ml，2eq，47.3mm)加到N-Boc-a-氨基异丁酸(4.43g，21.7mm，1eq)和3.89g(21.7mm，1.0eq)2-氯-(4，6)-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT)的乙醚(100ml)淤桨中。反应混合物在室温下搅拌1.5小时后，加入D-色氨酸酯的盐酸盐。搅拌过夜后，通过加入150ml 10％枸橼酸水溶液将反应混合物骤停。分离两层并用50ml饱和碳酸氢钠水溶液和50ml水洗涤乙醚层。将氢氧化锂(2.43g，5eq)溶解在100ml水中并将该溶液加到乙醚溶液中，在室温下剧烈搅拌4小时。分离两层并用1M HCl调节水层至pH5.6。然后用10％枸橼酸溶液调节至pH3.95，水层用100ml乙酸乙酯提取。乙酸乙酯层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥并过滤。真空除掉挥发物，得到82％所需产物的白色泡沫物。1H NMR与结构是一致的。
制备例49 如制备例EX2B所述，用制备例EX17A(0.20g，0.51mmol)和5％披钯碳(0.20g，催化剂，25ml THF)制备，得到粗品胺。所得到的滤液与HOBT(0.07g，0.51mmol)、制备例37产物(0.20g，0.51mmol)和DCC(0.l2g，0.51mmol)反应，得到所需产物(0.17g，45％产率)的淡黄色泡沫物1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C42H49N7O6的分析计算值C，68.93；H，6.75；N，13.40；实测值C，67.02；H，6.54；N，12.71；ISMS(M+)-732。
化合物57 如实施例2-7所述，用制备例49产物(0.96g，1.31mmol)、三氟乙酸(4.0ml)、苯甲醚(0.4ml)和二氯甲烷(20ml)制备，得到所需产物(0.54g，59％)的淡黄色固体1H NMR(300MHz，CDCl3)-与结构是一致的；C37H43N7O3Cl2的分析计算值C，63.06；H，6.15；N，13.91；实测值C，58.22；H，5.48；N，12.32；ISMS(M+)-632。
实施例2-43制备例15 将制备例EX9A产物(0.85，2.57mmol)与10％钯/碳(0.50g)和钯/黑(0.15g)在四氢呋喃(40ml)中合并并将该混合物在Parr装置中，在氢环境下(38psi)摇动。还原反应结束后，通过硅藻土过滤除掉催化剂并将该胺/四氢呋喃溶液立即与1，3-二环己基碳化二亚胺(0.53g，2.57mmol)、1-羟基苯并三唑(0.35g，2.57mmol)、制备例1L产物(1.00g，2.57mmol)和加添的四氢呋喃(60ml)合并。在室温下搅拌过夜后，将该混合物浓缩，残渣在乙酸乙酯中形成淤桨，然后过滤。将滤液浓缩，残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到1.62g不必进一步纯化即可使用的所需产物。
化合物58
将制备例15(1.57g，2.34mmol)溶解在二氯甲烷(25ml)中并加入三氟乙酸(10ml)。所得到的混合物在室温下搅拌2.5小时，浓缩，残渣用过量碳酸氢钠水溶液处理。将混合物的水溶液用乙酸乙酯提取，将合并的有机提取液浓缩并干燥。残渣通过硅胶色谱层析纯化(氯仿/甲醇)，得到0.71g(53％)所需产物MS(M+H)+572.5。1H NMR与产物是一致的；C31H37N7O40.35CHCl3的分析计算值C，61.38；H，6.14；N，15.98。实测值C，61.36；H，6.11；N，16.08。如上实施例6所述分离异构体混合物(2.16g)，得到1.10g异构体1(tR＝10.34min)和0.80g异构体2(tR＝13.70min)。将异构体2产物(0.80g，1.40mmol)溶解在微量乙酸乙酯中并用过量饱和的盐酸乙酸乙酯溶液处理。将该溶液浓缩，得到0.88g(82％)所需产物的灰白色固体MS(M+H)+572.3，573.4。1H NMR与产物是一致的；C31H37N7O43.0HCl的分析计算值C，54.67；H，5.92；N，14.40实测值C，54.25；H，5.89；N，13.35。
实施例2-44制备例16 在室温搅拌下，将氢氧化钠(25ml 5N水溶液)与水(15ml)和乙醇(10ml)一起加入制备例4产物(5.75g，18.9mmol)的四氢呋喃(10ml)溶液中。水解结束后，将混合物用盐酸酸化至pH 2.0并提取。将合并的有机提取液干燥，过滤并浓缩，得到定量产率所需产物的黄褐色固体
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 14.05-13.60(bs，1H)，8.34(s，1H)7.90(s，1H)，7.45(d，2H，J＝8.67Hz)，7.00(d，2H，J＝8.67Hz)，6.42(s，1H)，3.77(s，3H).FDMS277(M)+C12H11N3O5·0.67H2O的分析计算值C，49.82；H，4.30；N，14.52.实测值C，50.05；H，4.01；N，14.12.
制备例17 将制备例16化合物(2.50g，9.0mmol)与二甲胺(40％，1.15ml，9.0mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(1.22g，9.0mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(1.86g，9.0mmol)在四氢呋喃(60ml)中合并将该混合物在室温下搅拌。18小时后，将该混合物浓缩，将残渣在乙酸乙酯中形成淤桨并过滤。将滤液浓缩，所得到的残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到1.83g(67％)所需要产物1H NMR (300MHz，DMSO-d6)δ8.14(s，1H)7.76(s，1H)，7.42(d，2H，J＝8.67Hz)，7.00(d，2H，J＝8.67Hz)，6.78(s，1H)，3.77(s，3H)，2.91(2，3H)，2.85(s，3H).ESMS(M+H)+305.2.
制备例19 将制备例17化合物(0.73g，2.38mmol)与10％钯/碳(0.50g)和钯/黑(0.10g)在四氢呋喃(40ml)中合并并将该混合物在Parr装置中，在氢环境下(38psi)摇动。还原反应结束后，通过硅藻土过滤除掉催化剂并将所得到的溶液立即与二环己基碳化二亚胺(0.49g，2.38mmol)、1-羟基苯并三唑一水合物(0.32g，2.37mmol)、制备例1L产物(0.93g，2.39mmol)和加添的四氢呋喃(60ml)合并。在室温下搅拌过夜后，将该混合物浓缩，将残渣在乙酸乙酯中形成淤桨，并过滤。将滤液浓缩，残渣通过硅胶色谱层析纯化(氯仿/甲醇)，得到0.76g(50％)不必进一步纯化即可使用的所需产物的灰白色固体。
化合物59 在室温搅拌，向制备例19产物(0.74g，1.15mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。2小时后，将该混合物浓缩，残渣用过量碳酸氢钠水溶液处理。所得到的混合物用乙酸乙酯提取，将合并的有机提取液浓缩。残渣通过闪式色谱层析纯化(硅胶，氯仿/甲醇)，得到0.23g(37％)所需产物ESMS(M+H)+546.6。1H NMR与产物是一致的；C29H35N7O40.25CHCl3的分析计算值C，61.05；H，6.17；N，17.04。实测值C，61.41；H，6.32；N，16.52。如上实施例10所述分离异构体混合物(2.00g)，得到0.73g异构体1(tR＝9.85min)和0.82g异构体2(tR＝12.87 min)。在搅拌下，向异构体2(0.82g，1.50mmol)的乙酸乙酯和甲醇溶液中加入饱和的盐酸乙酸乙酯溶液。将所得到的混合物浓缩，得到0.84g所需产物(M+N)+546.2，547.3，1HNMR产物结构C29H35N7O43.0HCl的分析计算值C，53.18；H，5.85；N，14.97实测值C，53.73；H，6.03；N，14.04。
实施例2-45制备例34 如制备例5A所述，将制备例8产物(1.75g，5.1mmol)、用10％披钯碳(1.4g)的四氢呋喃溶液(60ml)氢化，然后与制备例1L产物(2.0g，5.1mmol)、1-羟基苯并三唑(0.76g，5.6mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(1.16g，5.6mmol)反应，得到2.51g(72％)所需产物的黄褐色泡沫物
1H-NMR(d，DMSO)1.15-1.35(m，18H)，3.05-3.15(m，2H)，4.25(m，2H)，4.65(brs，1H)，6.62(s，1H)，6.85(m，1H)，6.95-7.08(m，2H)，7.20-7.30(m，2H)，7.40-7.55(m，2H)，7.55-7.65(m，3H)，7.82(d，J＝8.3Hz，2H)，10.20(brs，1H)，10.75(brs，1H)；MS(离子·喷射)685(M+1)；C34H39F3N6O6·1H2O的分析计算值C，58.11；H，5.88；N，11.96.实测值C，58.15；H，5.59；N，11.92.
制备例35 如制备例5所述，将制备例34产物(2.2g，3.2mmol)和氢氧化锂(0.1g，3.9mmol)在二噁烷(50ml)/水(25ml)中反应，得到2.1g(100％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)，1.15-1.35(m，15H)，3.05-3.15(m，2H)，4.65(brs，1H)，6.97(s，1H)，6.90(m，1H)，6.98-7.10(m，2H)，7.20-7.30(m，2H)，7.40-7.55(m，2H)，7.57-7.64(m，3H)，7.80(d，J＝8.3Hz，2H)，10.20(brs，1H)，10.75(brs，1H)，13.80(brs，1H)；MS(离子·喷射)657.4(M+1)；C32H35F3N6O6的分析计算值C，58.53；H，5.37；N，12.80. 实测值C，59.28；H，5.17；N，12.65.
制备例36 如制备例EX4A所述，将制备例35产物(0.7g，1.1mmol)、4-甲基哌啶(0.13ml，1.1mmol)、1-羟基苯并三唑(0.17g，1.2mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.26g，1.2mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(30ml)中反应，得到0.47g(58％)所需产物的黄褐色泡沫物1H-NMR(d，DMSO)0.78(d，J＝6.4Hz，1.5H)，0.86(d，J＝6.3 Hz，1.5H)，1.15-1.35(m，18H)，1.50-1.70(m，3H)，2.60-2.70(m，2H)，3.00-3.15(m，2H)，3.30(m，1H)，4.40(m，1H)，4.65(m，1H)，6.85-6.95(m，2H)，7.00-7.10(m，2H)，7.17-7.30(m，2H)，7.40-7.60(m，4H)，7.75-7.85(m，2H)，10.20(brs，1H)，10.75(brs，1H)；MS(离子·喷射)738.5(M+1)；C38H46F3N7O5·1H2O的分析计算值C，60.39；H，6.40；N，12.97.实测值C，60.18；H，6.21；N，12.99.
化合物60和61 如实施例4所述，将制备例36产物(4.8g，6.5mmol)和三氟乙酸(16ml)在二氯甲烷(40ml)中反应，得到2.0g(44％)所需混合物的黄褐色泡沫物。通过HPLC纯化(8×15cm Prochrom柱，填充KromasilCHI-DMP手性相，使用在庚烷中的3A乙醇(13％体积比)、二甲基乙胺(0.2％体积比)洗脱剂混合物，流速为250ml/分钟)，得到0.5g(12％)异构体1和0.4g(9％)异构体2。
化合物60(异构体1)1H-NMR(d，DMSO)0.77(d，J＝6.5Hz，1.5H)，0.87(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.00(m，1H)，1.32(s，3H)，1.50(s，3H)，1.50-1.70(m，2H)，2.72(m，1H)，3.00-3.30(m，4H)，3.75(m，1H)，4.05-4.33(m，3H)，4.20(m，1H)，4.78(m，1H)，6.94(m，3H)，7.20(s，1H)，7.30-7.40(m，2H)，7.55-7.70(m，2H)，7.75-8.00(m，4H)，8.05-8.15(m，2H)，8.50(m，1H)，10.86(s，1H)，11.05(s，1H)；tR＝6.01min；MS(离子·喷射)638.2(M+1).
化合物61(异构体2)1H-NMR(d，DMSO)0.77(d，J＝6.5Hz，1.5H)，0.87(d，J＝6.0Hz，1.5H)，1.00(m，1H)，1.32(s，3H)，1.50(s，3H)，1.50-1.70(m，2H)，2.72(m，1H)，3.00-3.30(m，4H)，3.75(m，1H)，4.05-4.33(m，3H)，4.20(m，1H)，4.78(m，1H)，6.94(m，3H)，7.20(s，1H)，7.30-7.40(m，2H)，7.55-7.70(m，2H)，7.75-8.00(m，4H)，8.05-8.15(m，2H)，8.50(m，1H)，10.86(s，1H)，11.05(s，1H)；tR＝7.5min；MS(离子·喷射)638.2(M+1).
实施例2-46制备例345 将制备例11产物(6.0g，17.1mmol)和10％披钯碳(6.0g)在四氢呋喃(100ml)中混合。利用Parr装置，将反应混合物在氢环境下(40psi)放置30分钟，然后通过硅藻土过滤。所得到的溶液加到先前制备的制备例1L产物(6.66g，17.1mmol)、1-羟基苯并三唑(2.31g，17.1mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(3.53g，17.1mmol)的四氢呋喃(75ml)混合物中。室温下放置16小时后，浓缩反应混合物，将所得到的粗品通过闪式色谱层析纯化(硅胶，4％甲醇/二氯甲烷)，得到6.17g(52％)所需产物的棕色泡沫物1H NMR与结构是一致的；MS(离子喷射)693(M+1)。
制备例346 在室温搅拌下，向制备例345产物(4.6g，6.64mmol)的四氢呋喃(100ml)溶液中加入氢氧化锂的水溶液(40ml 1M溶液)。30分钟后，用5N盐酸(8.5ml)酸化反应混合物。所得到的混合物用水稀释并用乙酸乙酯提取。合并的有机提取液用硫酸钠干燥并浓缩，得到4.4g(99％)所需产物的黄色泡沫物。
制备例347 在室温下搅拌下，向制备例346产物(4.0g，6.02mmol)的四氢呋喃(50ml)溶液中加入1-羟基苯并三唑(813mg，6.02mmol)和1，3-二环己基碳化二亚胺(1.24g，6.02mmol)。15分钟后，加入二甲胺(3.0ml2M的四氢呋喃溶液，6.02mmol)。在密封的烧瓶中搅拌16小时后，将反应混合物过滤并浓缩。所得到的粗品通过闪式色谱层析纯化(硅胶，5％甲醇/二氯甲烷)，得到2.79g(68％)所需产物的黄色泡沫物。
化合物62和63 制备例347产物(3.4g，5.0mmol)中加入饱和的HCl(g)/乙酸(50ml)溶液。1.5小时后，将反应混合物浓缩，然后在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠之间分配。分离出有机层，用硫酸钠干燥并浓缩，得到2.45g(84％)游离碱的淡黄色泡沫物。非对映异构体(2.45g)在装填Kromasil CHI-DMP手性相的8×15cm Prochrom柱上色谱层析，用在庚烷中的3A乙醇和二甲基乙胺洗脱剂混合物洗脱，得到单一的纯非对映异构体泡沫物1HNMR与产物结构一致MS(离子喷射)592(M+1)；C34H37N7O3分析值C，69.02；H，6.30；N，16.57，实测值C，67.93；H，6.29；N，15.80。
化合物62(异构体1)向纯异构体的乙酸乙酯溶液中加入饱和的盐酸乙醚溶液。所得到的淤桨浓缩至干，得到992mg(37％)所述产物的灰白色固体1H NMR与产物是一致的；MS(离子喷射)592(M+1)；C34H37N7O3×2HCl的分析计算值C，61.44；H，5.91；N，14.75。实测值C，59.54；H，5.92；N，13.76。
化合物63(异构体2)向纯异构体的乙酸乙酯溶液中加入饱和的盐酸乙醚溶液。所得到的淤桨浓缩至干，得到1.17g(40％)所述产物的灰白色固体1H NMR与产物是一致的；MS(离子喷射)592(M+1)；C34H37N7O3×2HCl的分析计算值C，61.44；H，5.91；N，14.75。实测值C，59.03；H，6.04；N，13.84。
实施例2-472-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸 将2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸乙酯(1.52g，2.28mmol)、氢氧化锂(0.11g，4.56mmol)、二噁烷(10ml)和水(10ml)组成的溶液在室温下搅拌直至通过HPLC测定反应结束(30分钟)。该反应混合物浓缩至干和剩余物用水(20ml)溶解。水溶液用10％硫酸氢钠调至pH3并用乙酸乙酯(3×25ml)提取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1.34g(92％)2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸。N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-1-(2-萘基)-2-氧乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺 将2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸(0.55g，0.861mmol)、4-甲基哌啶(0.085g，0.861mmol)、1，3-二环己基碳化二亚胺(0.195g，0.947mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(0.116g，0.861mmol)和二甲基甲酰胺(5ml)组成的溶液在室温下搅拌直至通过HPLC测定反应结束(7小时)。反应混合物用水(40ml)稀释并用乙酸乙酯(4×25ml)提取。合并有机提取液，用饱和氯化钠溶液(2×35ml)洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩为油状物。粗品通过使用制备反向HPLC纯化，得到0.32g(52％)N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-1-(2-萘基)-2-氧乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺。
1H nmr(CDCl3)0.76-0.77(d，2H)，0.91-0.95(m，2H)，1.23-1.36(m，18H)，1.54(m，1H)，1.67(m，1H)，2.70-2.72(m，2H)，3.25-3.29(m，2H)，3.68(m，1H)，4.55-4.70(m，1H)，4.98(m，1H)，6.24(m，1H)，6.81-6.83(d，1H)，6.92(m，1H)，7.00-7.01(m，1H)，7.18-7.28(m，3H)，7.37-7.55(m，5H)，7.76-7.83(m，4H)，8.80(s，宽峰，1H)，10.38(s，宽峰，1H).13C nmr(CDCl3)δ14.60，19.32，19.47，21.41，21.83，21.90，25.39，25.55，26.04，28.56，28.63，28.84，31.05，31.16，31.21，33.98，34.08，34.29，34.69，43.42，46.28，46.52，49.38，54.55，56.99，60.77，62.31，69.97，71.02，108.80，110.24，111.79，119.02，119.36，121.86，124.10，125.99，127.12，127.36，127.97，128.08，128.10，128.16，128.33，128.63，128.71，129.77，132.26，133.63，133.75，134.02，136.58，137.29，155.16，157.65，166.07，166.18，166.22，166.34，169.40，171.52，175.12.
化合物64N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-1-(2-萘基)-2-氧乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺二盐酸盐
将溶解在二氯甲烷(20ml)中的N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-1-(2-萘基)-2-氧乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺(0.32g，0.445mmol)和苯甲醚(0.25ml)的溶液中加入三氟乙酸(2.5ml)。所得到的反应混合物在室温下搅拌直至通过HPLC测定反应结束(2.5小时)。将反应混合物浓缩至干。残渣溶解在甲醇(5ml)中并加到Varian Mega BondElut SCX离子交换柱(5g)上。将该柱用甲醇(5ml)洗涤。用2N的氨甲醇液(30ml)将产物从柱上洗脱下来。洗脱液浓缩至干，得到游离碱(0.28g)。将1.95M无水HCl的乙酸乙酯溶液(0.456ml，0.89mmol)加到溶解在乙酸乙酯(10ml)中的游离碱中。通过过滤收集所得到的沉淀并真空干燥，得到0.27g(87％)N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-1-(2-萘基)-2-氧乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺二盐酸盐。MS(FIA)m/e 620.7[(M+H)+]。C36H41N7O3.2HCl·1/2H2O的分析计算值C，61.62；H，6.32；N，13.97。实测值C，61.42；H，6.18；N，13.62。C36H42N7O3的分析计算值[(M+H)+]＝620.3349。C36H42N7O3的质谱实测值[(M+H)+]＝620.3355。1H nmr(DMSO-d6)0.65-0.67(d，2H)，0.89-0.90(d，2H)，1.16-1.24(m，2H)，1.35-1.36(d，4H)，1.51-1.53(d，4H)，1.63-1.65(m，1H)，2.68-2.74(m，1.5H)，3.08(t，0.5H)，3.17-3.19(m，1H)，3.26-3.27(m，1H)，3.71-3.82(m，1H)，4.40-4.55(m，1H)，4.71-4.72(t，1H)，6.90-7.00(m，1H)，7.02-7.04(m，1H)，7.26-7.33(m，3H)，7.52(m，1H)，7.59-7.62(m，3H)，7.74(m，1H)，7.98-8.09(m，4H)，8.31-8.32(d，3H)，8.49-8.61(m，1H)，8.66-8.68(d，1H)，10.94(s，1H)，11.35(s，1H).
实施例2-48N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-2-氧-1-苯基乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺 将2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-苯乙酸乙酯水解并随后与4-甲基哌啶反应，用二氯甲烷∶甲醇(24∶1)作为洗脱剂进行BiotageFlash 40M纯化，得到该化合物(84％产率)。MS(FIA)m/z 670.5[(M+H)+].1H nmr(CDCl3)δ0.74-0.75(d，2H)，0.89-0.90(d，2H)，1.17-1.32(m，18H)，1.53-1.63(m，3H)，2.66-2.70(m，1H)，3.05(t，1H)，3.15-3.20(m，1H)，3.69-3.83(m，1H)，4.36-4.49(m，1H)，4.67(s，宽峰，1H)，6.90-6.93(m，2H)，7.01-7.04(m，2H)，7.11(s，1H)，7.26-7.32(m，2H)，7.40-7.54(m，5H)，7.67(s，宽峰，1H)，8.16(m，宽峰，1H)，10.49(s，宽峰，1H)，10.84(s，1H).
化合物65N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-2-氧-1-苯基乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺二盐酸盐 通过N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-(N-{1-[2-(4-甲基哌啶基)-2-氧-1-苯基乙基]咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺得到该化合物(100％产率)的红色泡沫物。
MS(FIA)m/z570.5[(M+H)+].1H nmr(d-MeOH)δ0.81-0.82(d，2H)，0.98-0.99(d，2H)，1.18-1.21(m，2H)，1.34-1.37(m，1H)，1.43(s，3H)，1.61(s，6H)，1.71(t，1H)，2.73-2.76(m，1.5H)，3.14(t，0.5H)，3.27-3.33(m，1H)，3.40-3.44(m，1H)，3.61-3.65(m，1H)，3.75-3.77(d，1H)，4.45-4.60(m，1H)，4.81(s，宽峰，4H)，6.94-6.99(m，1.5H)，7.06-7.07(m，1.5H)，7.19(s，1H)，7.31-7.35(m，2H)，7.52-7.61(m，6H)，8.62-8.65(d，1H).
实施例2-49N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-{N-[1-(2-氧-1-苯基-2-吡咯烷基乙基)咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺 将2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-苯乙酸乙酯水解并随后与吡咯烷反应，用二氯甲烷∶甲醇(19∶1)作为洗脱剂进行闪式色谱层析纯化，得到该化合物(80％产率)。
1H nmr(CDCl3)δ1.10-1.40(m，15H)，1.67-1.92(m，3H)，2.92-3.60(m，5H)，4.90(s，broad，1H)，5.33(s，宽峰，1H)，5.85(d，1H)，6.80-7.05(m，3H)，7.13-7.39(m，10H)，7.44-7.80(m，2H)，8.96(s，宽峰，1H)，10.20(s，宽峰，1H).13C nmr(CDCl3)δ14.25，21.11，24.02，25.63，26.08，28.24，33.87，46.39，46.64，54.28，56.67，60.46，63.07，63.09，108.33，109.73，110.69，111.47，118.36，118.56，119.05，121.57，123.77，125.01，126.42，127.60，128.51，129.38，133.14，133.85，13 6.23，136.45，136.49，165.79，165.85，169.17，174.87.
化合物66N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-{N-[1-(2-氧-1-苯基-2-吡咯烷基乙基)咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺双三氟乙酸 通过N-[(1R)-2-吲哚-3-基-1-{N-[1-(2-氧-1-苯基-2-吡咯烷基乙基)咪唑-4-基}氨基甲酰基)乙基]-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺得到该化合物(50％产率)的白色固体。C30H35N7O3·2C2HF3O2的分析计算值C，53.06；H，4.85；N，12.74。实测值C，52.93；H，4.88；N，12.55。
1H nmr(DMSO-d6)δ1.29(s，3H)，1.46-1.48(d，3H)，1.72-1.88(m，4H)，2.94(m，1H)，3.06-3.07(m，1H)，3.19-3.20(m，1H)，3.40-3.41(d，2H)，3.67-3.69(m，1H)，4.78(s，宽峰，1H)，6.53(s，1H)，6.93-6.97(m，1H)，7.06(m，1H)，7.20(d，1H)，7.31-7.36(m，2H)，7.42-7.42(m，4H)，7.73-7.80(m，2H)，8.01(s，宽峰，2H)，8.36-8.38(d，1H)，10.82-10.85(d，2H).
实施例2-50化合物67N-[(1R)-1-(N-{1-[(N，N-二甲基氨基甲酰基)-2-萘基甲基}咪唑-4-基}氨基甲酰基)-2-吲哚-3-基乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺二盐酸盐 将2-[4-((2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酰基氨基)咪唑基]-2-(2-萘基)乙酸和二甲胺反应，然后按照常规方法脱保护，得到该化合物(90％产率)的灰白色固体。
1H nmr(DMSO-d6)δ1.36-1.37(d，3H)，1.51-1.53(d，3H)，2.92(s，3H)，2.99(s，3H)，3.19-3.22(m，1H)，3.27-3.31(m，1H)，4.68-4.73(m，1H)，6.90-6.94(m，1H)，6.97-7.03(m，1H)，7.29-7.33(m，2H)，7.38(s，1H)，7.55(s，1H)，7.60-7.62(t，3H)，7.73(t，1H)，7.98-8.06(m，4H)，8.36-8.37(d，3H)，8.72-8.74(d，2H)，10.97(s，1H)，11.49(s，1H).
实施例2-512-(4-硝基咪唑基)-2-苯乙基酸 在搅拌下，将氢氧化锂(18.1g，750mm，2eq)加到2-(4-硝基咪唑基)-2-苯基乙酸乙酯(104g，379mm)的乙醇(250ml)淤浆中。将去离子水加到所得到的混合物中，连续搅拌4小时。真空除掉乙醇，所得到的水溶液用100ml乙醚洗涤。水层用100ml去离子水稀释，冷却至12℃后，用浓HCl调至pH1.8。所得到的淤浆在低于5℃下搅拌30分钟并过滤。湿滤饼用100ml去离子水洗涤并在滤器上，在流动的空气下干燥过夜，得到90.34g(96％)棕色固体。产物可从异丙醇中重结晶，得到72.31g(80％回收率，77％总产率)黄褐色固体。元素分析计算值％C 53.45，％H 3.67，％N 16.97；实测值％C 53.67，％H 3.79，％N 16.65.MS247(M+)IR(cm-1)1719；H1nmr(d6DMSO)d6.51(s，1H)，7.43-7.55(m，5H)，7.95(s，1H)，8.40(s，1H).
2-(4-硝基咪唑基)-2-苯基-1-吡咯烷基乙-1-酮 在25℃搅拌下，将N-甲基吗啉(22.25ml，2eq)加到2-(4-硝基咪唑基)-2-苯基乙酸(1)(25.03g，101.2mm)和2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(18.1g，101.2mm，1.0eq)的无水四氢呋喃(50ml)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1小时，滴加7.2ml(101.2mm，1.0eq)吡咯烷。将该反应物在室温下搅拌2小时。通过加入200ml乙酸乙酯和200ml 1M HCl将反应混合物骤停。分离两层并将有机层用100ml饱碳酸氢钠水溶液洗涤。将从碳酸氢钠中得到的混合物用去离子水稀释(1∶1)至所得到的固体溶解并分离两层。有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并真空除掉挥发物，得到棕色泡沫物。将该泡沫物溶解在甲醇、乙醚和二氯甲烷中。蒸发溶剂过夜，得到棕色固体，将其在200ml乙醚中搅拌4小时。将所得到的淤桨过滤并将滤饼用乙醚洗涤。固体真空干燥过夜，得到乳状无色产物(21.68g，71％)。
d(d6DMSO)1.69-1.84(m，3H)，2.80-2.85(m，0.7H)，3.32-3.41(m，3.6H)，3.64-3.67(m，0.7H)，6.65(s，1H)，7.42-7.50(m，5H)，7.83(s，1H)，8.22(s，1H)2-(4-氨基咪唑基)-2-苯基-1-吡咯烷基乙-1-酮二盐酸盐 将乙醇(200ml)加到在Bradley氢化装置中的2-(4-硝基咪唑基)-2-苯基-1-吡咯烷基乙-1-酮(3)(0.752，2.8mm)和10％披钯碳(75mg)的混合物中。将搅拌下的反应混合物处于60psi H2环境下并温热至60℃。2小时后，反应混合物冷却至室温并通过过滤除掉催化剂。将无水HCl气通入过滤后的溶液中至饱和。然后，真空除掉挥发物，得到淡黄色泡沫物。将乙醚和二氯甲烷(25∶1)加到该泡沫物中，所得到的混合物搅拌过夜产生结晶。将所得到的淤浆过滤并用乙醚洗涤滤饼。将滤饼真空干燥得到0.659g(93％)黄色固体。LGD 208。N-((1R)-2-吲哚-3-基-1-{N-[1-(2-氧-1-苯基-2-吡咯烷基乙基)咪唑-4-基]氨基甲酰基}乙基)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺
将N-甲基吗啉(0.28ml，8.32mm，1eq)加到在10ml冷却至0℃以下无水四氢呋喃中的2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(0.46g，2.57mm，1eq)和(2R)-2-{2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰基氨基}-3-吲哚-3-基丙酸(1g，2.57mm)的淤浆中。1.5小时后，加入2-(4-氨基咪唑基)-2-苯基-1-吡咯烷基乙-1-酮盐酸盐(0.97g，2.82mm，1.1eq)并在冰浴温度下连续搅拌。将反应物搅拌4小时并通过加入15ml去离子水和乙酸乙酯骤停。将乙酸乙酯层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥并真空除掉挥发物，得到粗品的淡紫色泡沫物(1.4g，84％)。粗品通过制备色谱层析纯化，得到0.52g(31.5％)产物的泡沫物。
1H nmr(CDCl3)δ1.10-1.40(m，15H)，1.67-1.92(m，3H)，2.92-3.60(m，％H)，4.90(s，宽峰，1H)，5.33(s，宽峰，1H)，5.85(d，1H)，6.80-7.05(m，3H)，7.13-7.39(m，10H)，7.44-7.80(m，2H)，8.96(s，宽峰，1H)，10.20(s，宽峰，1H).
实施例2-52化合物68N-((1R)-2-吲哚-3-基-1-{N-[1-(2-氧-1-苯基-2-吡咯烷基乙基)咪唑-4-基]氨基甲酰基}乙基)-2-氨基-2-甲基丙酰胺，2，2，2-三氟乙酸，2，2，2-三氟乙酸盐 在搅拌下，将三氟乙酸(0.57ml，7.4mm，33eq)加到在5ml二氯甲烷中的N-((1R)-2-吲哚-3-基-1-{N-[1-(2-氧-1-苯基-2-吡咯烷基乙基)咪唑-4-基]氨基甲酰基}乙基)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基丙酰胺(8)(0.152g，0.22mm)5ml二氯甲烷溶液中。在室温下搅拌3小时后，将反应混合物用50ml乙醚稀释。所得到的固体通过离心分离并用乙醚洗涤。将固体真空干燥得到产物的乳状无色固体(0.084g，48％)MS(FD+)m/z 541(M+)C30H35N7O3·2C2HF3O2的分析计算值C，53.06；H，4.85；N，12.74。实测值C，52.93；H，4.88；N，12.55。
1H nmr(DMSO-d6)δ1.29(s，3H)，1.46-1.48(d，3H)，1.72-1.88(m，4H)，2.94(m，1H)，3.06-3.07(m，1H)，3.19-3.20(m，1H)，3.40-3.41(d，2H)，3.67-3.69(m，1H)，4.78(s，宽峰，1H)，6.53(s，1H)，6.93-6.97(m，1H)，7.06(m，1H)，7.20(d，1H)，7.31-7.36(m，2H)，7.42-7.42(m，4H)，7.73-7.80(m，2H)，8.01(s，宽峰，2H)，8.36-8.38(d，1H)，10.82-10.85(d，2H).
实施例2-53其它化合物其它式I化合物也可以通过上述类似的方法合成。这些化合物包括下列化合物，其中a)、R1是C6H5(CH2)3-，R3是苯基，R4是H并且Y是吡咯烷-1-基，b)、R1是C6H5CH2OCH2-，R3是对位由W取代的苯基，W是苯基，R4是H并且Y是吡咯烷-1-基，c)、R1是吲哚-3-基甲基，R3是对位由W取代的苯基，W是苯基，R4是H并且Y是吡咯烷-1-基，d)、R1是吲哚-3-基甲基，R3是对位由W取代的苯基，W是OCH3，R4是H并且Y是吡咯烷-1-基，e)、R1是C6H5(CH2)3-，R3是对位由W取代的苯基，W是CF3，R4是H并且Y是4-甲基哌啶-1-基，f)、R1是C6H5(CH2)3-，R3是对位由W取代的苯基，W是苯基，R4是H并且Y是吡咯烷-1-基，g)、R1是C6H5(CH2)3-，R3是对位由W取代的苯基，W是F，R4是甲基并且Y是吡咯烷-1-基，h)、R1是C6H5CH2OCH2-，R3是对位由W取代的苯基，W是F，R4是甲基并且Y是吡咯烷-1-基，i)、R1是C6H5(CH2)3-，R3是对位由W取代的苯基，W是F，R4是甲基并且Y是4-甲基哌啶-1-基，j)、R1是C6H5(CH2)3-，R3是2-萘基，R4是甲基并且Y是4-甲基哌啶-1-基，k)、R1是C6H5CH2OCH2-，R3是2-萘基，R4是甲基并且Y是4-甲基哌啶-1-基，l)、R1是C6H5(CH2)3-，R3是对位由W取代的苯基，W是CF3，R4是甲基并且Y是4-甲基哌啶-1-基，并且m)、R1是C6H5CH2OCH2-，R3是苯基，R4是H并且Y是4-甲基哌啶-1-基，
实施例3脑垂体细胞培养物测定生长激素的分泌32只250g雄性Sprague-Dawley鼠用于各测定中。将动物通过断头术处死，分离出垂体前叶并放入冰冷培养基中。将脑垂体切成8片并用胰蛋白酶(Sigma Chemical)进行酶消化使结缔组织变软。将脑垂体细胞通过机械搅拌分散、收集、制成淤桨，然后接种在24孔滴定板(300,000个细胞/孔)中。培养4天后，细胞形成平坦的单层。然后将细胞用培养基洗涤并通过将GH促分泌剂加入培养基中促进细胞分泌。在37℃下15分钟后，除掉培养基并冷冻贮藏直至通过放射性免疫测定方法测定鼠的GH。促分泌剂的剂量一式四份地加入。有代表性的数据在下表1中提供。在上述测定中，本文所公开的化合物是活性的。通过4-参数逻辑方程式计算EC50和功效。如果需要，合并该计算结果并以平均值+/-标准差表示。
表1实施例 GH部分1 分泌实施例# EC50(μM)65.5382.39
权利要求
1.式I化合物或其可药用盐或溶剂化物 其中R1为C6H5CH2OCH2-、C6H5(CH2)3-或吲哚-3-基甲基；Y是吡咯烷基、4-甲基哌啶基或NR2R2；R2各自独立地为C1到C6烷基；R3是2-萘基或对位由W取代的苯基；W是H、F、CF3、C1-C6烷氧基或苯基；并且R4是H或CH3。
2.权利要求1的化合物，其中R4是CH3。
3.权利要求1的化合物，其中所述化合物具有(R，R)立体构型。
4.增加人或动物内源性生长激素水平的方法，它包括给予所述人或动物有效量权利要求1化合物。
5.治疗或预防可通过增加内源性生长激素来调节的生理性疾病的方法，它包括给予需要所述治疗的动物有效量权利要求1化合物或其可药用盐或溶剂化物。
6.一种药物制剂，它包含作为活性组分的权利要求1化合物或其可药用盐或溶剂化物与一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂。
7.权利要求6的药物制剂，它进一步包含一种骨抗吸收剂。
8.权利要求7的方法，它进一步包括给予病人一种骨抗吸收剂。
9.权利要求8的方法，其中所述骨抗吸收剂是膦酸氢盐。
全文摘要
本文所公开的是生长激素促分泌剂及其应用,所述生长激素促分泌剂是式I化合物或其可药用盐或溶剂化物其中R1为C
文档编号A61P43/00GK1347420SQ00803703
公开日2002年5月1日 申请日期2000年2月18日 优先权日1999年2月19日
发明者J·A·道奇, C·W·卢加三世 申请人:伊莱利利公司