含笑内酯脂质微球注射液及其制备方法
专利名称：含笑内酯脂质微球注射液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，更确切的说它是一种含有含笑内酯的注射用脂质微球 (水包油乳剂)的制备及配方。
背景技术：
全球每年癌症新发病例为1000万，因癌症死亡人数为700万，现患者病例2200万 (数据来源中国抗癌协会2005年)。且呈逐年增长趋势，今后20年新患者人数将由目前的每年1000万增加到1500万，因癌症而死亡的人数也将由每年约700万增至1000万。而在我国，每年新发病例220万，因癌症死亡人数为160-170万，现患者病例310万人(数据来源中国抗癌协会2005年)。2006年因癌症而死亡的人数达180万，已经超越心血管疾病的死亡人数，成为我国居民的第一号“杀手”。中国平均4-5个死亡者就有1个是死于癌症，癌症每年给中国造成的经济损失逾千亿元。近年来越来越多的证据显示，癌症的产生、发展、复发与耐药性的根源在于含量极少的癌症干细胞(CSCs，Cancer Stem Cells)。例如白血病，愈后复发就是最大的难题，其根本原因在于白血病患者体内存在LSC，这群数量极少的细胞常常处于静止期，对放化疗不敏感。尽管许多药物能使骨髓中的血病细胞减少到“正常范围”而达到所谓的完全缓解。实际上，LSC很难被触动而根除，一旦条件适合，残留的LSC又可通过增殖与分化引发新的白血病。2009年，Lander等在Cell上报道，用途最广泛的小分子抗癌药物-紫杉醇，尽管可以抑制主体癌细胞的生长，但由于对CSCs没有活性，导致CSCs在癌细胞中的比例增加，反而更容易引发新的肿瘤小球。因此针对肿瘤干细胞的药物研究为彻底治愈癌症提供可能。倍半萜内酯类化合物小白菊内酯(Parthenolide)是从小白菊中提取的化合物， 最初被用来治疗皮肤感染、风湿病以及偏头痛。近期研究表明，小白菊内酯可抑制前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病癌、肾癌、肺癌、结肠腺癌、成神经管细胞瘤等癌细胞的生长，在动物模型上小白菊内酯还能治疗紫外线引起的皮肤癌。对其作用机理研究发现，小白菊内酯能抑制转录因子NF- κ B的激活，其活性可能主要来源于p65/NF- κ B亚基的Cys38上的巯基与小白菊内酯发生了 Michael加成反应，由于NF-k B是调控肿瘤侵袭、转移、药物抗性的重要基因，抑制NF-K B的激活有可能提高肿瘤对于抑瘤剂所引起的细胞凋亡的敏感性。最近，纽约罗切斯特大学医学院的Jordan，C. Τ.博士及其同事发现小白菊内酯能够在基本不损伤正常干细胞的情况下，针对性地消灭引发急性和慢性骨髓性白血病的干细胞，从而有可能根本上遏制白血病复发，小白菊内酯这一独特的作用机制，已引起人们的广泛关注。含笑内酯也属于倍半萜内酯类化合物，为愈创木烷型倍半萜内酯类化合物，已经有文献报道[J. Nat. Prod. 1993，56，90-98 ；Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003，11，1503-1510]。 但由于含笑内酯水溶性、稳定性与生物利用度均较差，这就限制了其在临床上的应用。因此可利用脂质微球技术克服这一缺点，并可起到减少刺激性、降低毒副作用的目的。脂质微球的制备方法是将药物包裹于脂肪乳剂的脂质核心部分，由于该结构亦类似于微球，因此称为脂质微球。一般认为脂质微球是通过将药物溶于脂肪油中，并经磷脂乳化分散于水相后制成，是一种以脂肪油为软基质而被磷脂膜包封的微粒分散体系，平均粒径在200nm左右。脂质微球的特殊的理化特性和低毒性决定了其可以作为脂溶性药物，特别是抗癌药物、麻醉药物及抗炎药物的良好载体①脂溶性药物的良好载体。临床不少药物水溶性差，必须依靠有机溶剂才能发挥作用，而有机溶剂不仅本身有一定毒性，还可能干扰药物效果。②有效增加药物的稳定性。含药脂质微球中，有相当一部分药物分布在油相或油水界面膜中，避免了直接与水接触。对于易水解或对PH变化敏感的药物，这种“隔离”起到了增加稳定性的作用。③药物部分包裹于油相或界面膜中，避免了与体液的直至接触，因而降低了药物自身可能产生的局部及血管刺激性。另外，药物在体内是由油相中缓慢释放，可避免药物在注射用时由于初期浓度过高而引起的不良反应。④粒径在200nm左右的小微粒能被机体的网状组织系统的吞噬细胞所吞噬而滞留在网状组织系统(如肝脏、肺等)中，具有靶向性，这种特点对于抗肿瘤药物提高药效、降低毒副作用尤为重要。
发明内容
本发明的目的是提供一种含有含笑内酯的脂质微球注射液(水包油乳剂)及制备方法。该注射液包含含笑内酯，油相，水和表面活性剂。油相指示一大类生理可接受性物质，如红花油，大豆油，玉米油，中链脂肪酸甘油三酯(MCT)，薏苡仁油，鸦胆子油，及其混合物。优选为大豆油，MCT，薏苡仁油。表面活性剂可为任何表面活性剂，通常为磷脂，吐温(Tween)，普朗尼克 (poloxamer)，油酸钠，油酸，胆酸，去氧胆酸及其混合物。所述磷脂选自卵磷脂，豆磷脂，及其混合物。所述吐温选自吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，吐温85，及其混合物。优选为卵磷脂，豆磷脂，油酸钠，油酸，吐温80，普朗尼克F68，及其混合物。典型地，以制剂质量计本发明的配方组成为
油相5-30%
含笑内酯0. 01-5%
表面活性剂0. 1-5%
甘油0. 1-5%
其余为注射用水
优选配方组成为
油相15-25%
含笑内酯0. 1-2%
表面活性剂2-4%
甘油0. 5-2%
其余为注射用水
本发明也涉及含有含笑内酯的脂质微球注射液和水包油乳剂的制备方法。包含以
下步骤将含笑内酯加入至含有表面活性剂的水溶性介质中，然后与油相混合，经过高速搅拌制备初乳；对初乳进行高压均质，并采用高压旋转灭菌。
具体实施例方式实施例1处方1 注射用大豆油
IOg Ig 2g Ig Ig含笑内酯豆磷脂甘油 Tween-80注射用水加至 IOOml制备方法1 (1)将注射用甘油、F68分散于适量注射用水中，至搅拌中加至60-70 □搅拌至全部溶解；( 注射用豆磷脂、Tween-80、含笑内酯加入至注射用大豆油中，加至60-70 □下搅拌至豆磷脂和含笑内酯完全溶解；⑶将油相加入至水相中，于高速切机搅拌数分，3 ； (4) 调pH至4-9，注射用水释定容至处方量，转移至高压微射均质3-7 ； (5)，封，于高压旋转灭菌中，灭菌。实施例2处方2 大豆油/MCT 15g含笑内酯0.05g卵磷脂Ig甘油0. 5g油酸钠0. 5g注射用水加至 IOOmL制备方法2 (1)将注射用甘油、油酸钠、F68分散于适量注射用水中，至搅拌中加至60-70 □搅拌至全部溶解；(2)注射用卵磷脂、Tween-80、含笑内酯加入至由注射用MCT、注射用大豆油组成的混合油相中，加至60-70 □下搅拌至卵磷脂和含笑内酯完全溶解；C3)将油相加入至水相中，于高速切机搅拌数分，3 ;(4)调pH至4-9，注射用水释定容至处方量，转移至高压微射均质3-7 (5)，封，于高压旋转灭菌中，灭菌。实施例3处方3 注射用薏苡仁油20g含笑内酯2g豆磷脂2. 5g甘油Ig注射用水加至 IOOml制备方法3 (1)将处方量的豆磷脂、甘油与至60-70的适量注射用水进行混合，搅拌至全部溶解；( 注射用豆磷脂、含笑内酯加入至注射用薏苡仁油中，加至60-70 □下搅拌至豆磷脂和含笑内酯完全溶解；(3)将油相加入至水相中，于高速切机搅拌数分，3 ;(4)调pH至4-9， 注射用水释定容至处方量，转移至高压微射均质3-7 ； (5)，封，于高压旋转灭菌中，灭菌。
本发明的脂质微球注射液、用途和方法已经通过具体的实施例进行了述。本领域技术人可以本发明的内容适当变原、条件等来实现相应的其它目的，其相关变没有离本发明的内容，所有类似的和动对于本领域技术人来说是显而易的，被为包在本发明的范围内。
权利要求
1.一种含含笑内酯的脂质微球注射液的组合物。该组合物包含含笑内酯，油相，水和表面活性剂。
2.权利要求1中的脂质微球注射液也可以是一种供静脉输液用的含含笑内酯的水包油乳剂。构成脂质微球注射液的组合物与水包油乳剂的组合物相同。
3.权利要求1中所述油相选自红花油，大豆油，玉米油，中链脂肪酸甘油三酯(MCT)，薏苡仁油，鸦胆子油，及其混合物。优选为大豆油，MCT，薏苡仁油。
4.权利要求1中所述表面活性剂选自磷脂，吐温(Tween)，普朗尼克(poloxamer)F68， 油酸钠，油酸，胆酸，去氧胆酸及其混合物。
5.权利要求4中所述磷脂选自卵磷脂，豆磷脂，或者是二者混合物。
6.权利要求4中所述吐温选自吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，吐温85，或者是以上不同规格的任意比例混合物。优选为吐温80。
7.权利要求1中的组合物还可能含有甘油，山梨醇，甘露醇，葡萄糖，及其混合物。
8.权利要求1中的组合物还可能含有氢氧化钠，盐酸，及其混合物。
9.权利要求1中所述油相以制剂计用量为约5-30%。优选为15-25%。
10.权利要求1中所述含笑内酯以制剂计用量为约0.01-5%。优选为0.1-2%。
11.权利要求1中所述表面活性剂以制剂计用量为约0.1%-5%。优选为2-4%。
12.权利要求7中所述甘油以制剂计用量为约0.至约5%。优选为0.5-2%。
13.权利要求1中所述含笑内酯脂质微球注射液制备方法如下将含笑内酯加入至含有表面活性剂的水溶性介质中，然后与油相混合，经过高速搅拌制备初乳；对初乳进行高压均质，并采用高压旋转灭菌。
全文摘要
本发明涉及含笑内酯脂质微球注射液及制备工艺，该含笑内酯脂质微球的主要成分及配比为油相5-30％，含笑内酯0.01-5％，表面活性剂0.1-5％，甘油0.1-5％，其余为注射用水。粒径范围，＜1μm。本发明含笑内酯脂质微球用于癌症治疗，特别是治疗急性白血病，对急性淋巴细胞白血病和急性粒细胞性白血病，可作为首选药物；对淋巴肉瘤、神经母细胞瘤、横纹肌肉瘤等也有明显治疗效果；也可以和其它药物联合使用。
文档编号A61K9/16GK102258466SQ20101018421
公开日2011年11月30日 申请日期2010年5月27日 优先权日2010年5月27日
发明者卢亚欣, 张泉, 翟佳黛, 陈悦 申请人:南开大学, 天津尚德药缘科技有限公司
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，更确切的说它是一种含有含笑内酯的注射用脂质微球 (水包油乳剂)的制备及配方。
背景技术：
全球每年癌症新发病例为1000万，因癌症死亡人数为700万，现患者病例2200万 (数据来源中国抗癌协会2005年)。且呈逐年增长趋势，今后20年新患者人数将由目前的每年1000万增加到1500万，因癌症而死亡的人数也将由每年约700万增至1000万。而在我国，每年新发病例220万，因癌症死亡人数为160-170万，现患者病例310万人(数据来源中国抗癌协会2005年)。2006年因癌症而死亡的人数达180万，已经超越心血管疾病的死亡人数，成为我国居民的第一号“杀手”。中国平均4-5个死亡者就有1个是死于癌症，癌症每年给中国造成的经济损失逾千亿元。近年来越来越多的证据显示，癌症的产生、发展、复发与耐药性的根源在于含量极少的癌症干细胞(CSCs，Cancer Stem Cells)。例如白血病，愈后复发就是最大的难题，其根本原因在于白血病患者体内存在LSC，这群数量极少的细胞常常处于静止期，对放化疗不敏感。尽管许多药物能使骨髓中的血病细胞减少到“正常范围”而达到所谓的完全缓解。实际上，LSC很难被触动而根除，一旦条件适合，残留的LSC又可通过增殖与分化引发新的白血病。2009年，Lander等在Cell上报道，用途最广泛的小分子抗癌药物-紫杉醇，尽管可以抑制主体癌细胞的生长，但由于对CSCs没有活性，导致CSCs在癌细胞中的比例增加，反而更容易引发新的肿瘤小球。因此针对肿瘤干细胞的药物研究为彻底治愈癌症提供可能。倍半萜内酯类化合物小白菊内酯(Parthenolide)是从小白菊中提取的化合物， 最初被用来治疗皮肤感染、风湿病以及偏头痛。近期研究表明，小白菊内酯可抑制前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病癌、肾癌、肺癌、结肠腺癌、成神经管细胞瘤等癌细胞的生长，在动物模型上小白菊内酯还能治疗紫外线引起的皮肤癌。对其作用机理研究发现，小白菊内酯能抑制转录因子NF- κ B的激活，其活性可能主要来源于p65/NF- κ B亚基的Cys38上的巯基与小白菊内酯发生了 Michael加成反应，由于NF-k B是调控肿瘤侵袭、转移、药物抗性的重要基因，抑制NF-K B的激活有可能提高肿瘤对于抑瘤剂所引起的细胞凋亡的敏感性。最近，纽约罗切斯特大学医学院的Jordan，C. Τ.博士及其同事发现小白菊内酯能够在基本不损伤正常干细胞的情况下，针对性地消灭引发急性和慢性骨髓性白血病的干细胞，从而有可能根本上遏制白血病复发，小白菊内酯这一独特的作用机制，已引起人们的广泛关注。含笑内酯也属于倍半萜内酯类化合物，为愈创木烷型倍半萜内酯类化合物，已经有文献报道[J. Nat. Prod. 1993，56，90-98 ；Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003，11，1503-1510]。 但由于含笑内酯水溶性、稳定性与生物利用度均较差，这就限制了其在临床上的应用。因此可利用脂质微球技术克服这一缺点，并可起到减少刺激性、降低毒副作用的目的。脂质微球的制备方法是将药物包裹于脂肪乳剂的脂质核心部分，由于该结构亦类似于微球，因此称为脂质微球。一般认为脂质微球是通过将药物溶于脂肪油中，并经磷脂乳化分散于水相后制成，是一种以脂肪油为软基质而被磷脂膜包封的微粒分散体系，平均粒径在200nm左右。脂质微球的特殊的理化特性和低毒性决定了其可以作为脂溶性药物，特别是抗癌药物、麻醉药物及抗炎药物的良好载体①脂溶性药物的良好载体。临床不少药物水溶性差，必须依靠有机溶剂才能发挥作用，而有机溶剂不仅本身有一定毒性，还可能干扰药物效果。②有效增加药物的稳定性。含药脂质微球中，有相当一部分药物分布在油相或油水界面膜中，避免了直接与水接触。对于易水解或对PH变化敏感的药物，这种“隔离”起到了增加稳定性的作用。③药物部分包裹于油相或界面膜中，避免了与体液的直至接触，因而降低了药物自身可能产生的局部及血管刺激性。另外，药物在体内是由油相中缓慢释放，可避免药物在注射用时由于初期浓度过高而引起的不良反应。④粒径在200nm左右的小微粒能被机体的网状组织系统的吞噬细胞所吞噬而滞留在网状组织系统(如肝脏、肺等)中，具有靶向性，这种特点对于抗肿瘤药物提高药效、降低毒副作用尤为重要。
发明内容
本发明的目的是提供一种含有含笑内酯的脂质微球注射液(水包油乳剂)及制备方法。该注射液包含含笑内酯，油相，水和表面活性剂。油相指示一大类生理可接受性物质，如红花油，大豆油，玉米油，中链脂肪酸甘油三酯(MCT)，薏苡仁油，鸦胆子油，及其混合物。优选为大豆油，MCT，薏苡仁油。表面活性剂可为任何表面活性剂，通常为磷脂，吐温(Tween)，普朗尼克 (poloxamer)，油酸钠，油酸，胆酸，去氧胆酸及其混合物。所述磷脂选自卵磷脂，豆磷脂，及其混合物。所述吐温选自吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，吐温85，及其混合物。优选为卵磷脂，豆磷脂，油酸钠，油酸，吐温80，普朗尼克F68，及其混合物。典型地，以制剂质量计本发明的配方组成为
油相5-30%
含笑内酯0. 01-5%
表面活性剂0. 1-5%
甘油0. 1-5%
其余为注射用水
优选配方组成为
油相15-25%
含笑内酯0. 1-2%
表面活性剂2-4%
甘油0. 5-2%
其余为注射用水
本发明也涉及含有含笑内酯的脂质微球注射液和水包油乳剂的制备方法。包含以
下步骤将含笑内酯加入至含有表面活性剂的水溶性介质中，然后与油相混合，经过高速搅拌制备初乳；对初乳进行高压均质，并采用高压旋转灭菌。
具体实施例方式实施例1处方1 注射用大豆油
IOg Ig 2g Ig Ig含笑内酯豆磷脂甘油 Tween-80注射用水加至 IOOml制备方法1 (1)将注射用甘油、F68分散于适量注射用水中，至搅拌中加至60-70 □搅拌至全部溶解；( 注射用豆磷脂、Tween-80、含笑内酯加入至注射用大豆油中，加至60-70 □下搅拌至豆磷脂和含笑内酯完全溶解；⑶将油相加入至水相中，于高速切机搅拌数分，3 ； (4) 调pH至4-9，注射用水释定容至处方量，转移至高压微射均质3-7 ； (5)，封，于高压旋转灭菌中，灭菌。实施例2处方2 大豆油/MCT 15g含笑内酯0.05g卵磷脂Ig甘油0. 5g油酸钠0. 5g注射用水加至 IOOmL制备方法2 (1)将注射用甘油、油酸钠、F68分散于适量注射用水中，至搅拌中加至60-70 □搅拌至全部溶解；(2)注射用卵磷脂、Tween-80、含笑内酯加入至由注射用MCT、注射用大豆油组成的混合油相中，加至60-70 □下搅拌至卵磷脂和含笑内酯完全溶解；C3)将油相加入至水相中，于高速切机搅拌数分，3 ;(4)调pH至4-9，注射用水释定容至处方量，转移至高压微射均质3-7 (5)，封，于高压旋转灭菌中，灭菌。实施例3处方3 注射用薏苡仁油20g含笑内酯2g豆磷脂2. 5g甘油Ig注射用水加至 IOOml制备方法3 (1)将处方量的豆磷脂、甘油与至60-70的适量注射用水进行混合，搅拌至全部溶解；( 注射用豆磷脂、含笑内酯加入至注射用薏苡仁油中，加至60-70 □下搅拌至豆磷脂和含笑内酯完全溶解；(3)将油相加入至水相中，于高速切机搅拌数分，3 ;(4)调pH至4-9， 注射用水释定容至处方量，转移至高压微射均质3-7 ； (5)，封，于高压旋转灭菌中，灭菌。
本发明的脂质微球注射液、用途和方法已经通过具体的实施例进行了述。本领域技术人可以本发明的内容适当变原、条件等来实现相应的其它目的，其相关变没有离本发明的内容，所有类似的和动对于本领域技术人来说是显而易的，被为包在本发明的范围内。
权利要求
1.一种含含笑内酯的脂质微球注射液的组合物。该组合物包含含笑内酯，油相，水和表面活性剂。
2.权利要求1中的脂质微球注射液也可以是一种供静脉输液用的含含笑内酯的水包油乳剂。构成脂质微球注射液的组合物与水包油乳剂的组合物相同。
3.权利要求1中所述油相选自红花油，大豆油，玉米油，中链脂肪酸甘油三酯(MCT)，薏苡仁油，鸦胆子油，及其混合物。优选为大豆油，MCT，薏苡仁油。
4.权利要求1中所述表面活性剂选自磷脂，吐温(Tween)，普朗尼克(poloxamer)F68， 油酸钠，油酸，胆酸，去氧胆酸及其混合物。
5.权利要求4中所述磷脂选自卵磷脂，豆磷脂，或者是二者混合物。
6.权利要求4中所述吐温选自吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，吐温85，或者是以上不同规格的任意比例混合物。优选为吐温80。
7.权利要求1中的组合物还可能含有甘油，山梨醇，甘露醇，葡萄糖，及其混合物。
8.权利要求1中的组合物还可能含有氢氧化钠，盐酸，及其混合物。
9.权利要求1中所述油相以制剂计用量为约5-30%。优选为15-25%。
10.权利要求1中所述含笑内酯以制剂计用量为约0.01-5%。优选为0.1-2%。
11.权利要求1中所述表面活性剂以制剂计用量为约0.1%-5%。优选为2-4%。
12.权利要求7中所述甘油以制剂计用量为约0.至约5%。优选为0.5-2%。
13.权利要求1中所述含笑内酯脂质微球注射液制备方法如下将含笑内酯加入至含有表面活性剂的水溶性介质中，然后与油相混合，经过高速搅拌制备初乳；对初乳进行高压均质，并采用高压旋转灭菌。
全文摘要
本发明涉及含笑内酯脂质微球注射液及制备工艺，该含笑内酯脂质微球的主要成分及配比为油相5-30％，含笑内酯0.01-5％，表面活性剂0.1-5％，甘油0.1-5％，其余为注射用水。粒径范围，＜1μm。本发明含笑内酯脂质微球用于癌症治疗，特别是治疗急性白血病，对急性淋巴细胞白血病和急性粒细胞性白血病，可作为首选药物；对淋巴肉瘤、神经母细胞瘤、横纹肌肉瘤等也有明显治疗效果；也可以和其它药物联合使用。
文档编号A61K9/16GK102258466SQ20101018421
公开日2011年11月30日 申请日期2010年5月27日 优先权日2010年5月27日
发明者卢亚欣, 张泉, 翟佳黛, 陈悦 申请人:南开大学, 天津尚德药缘科技有限公司
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