肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途的制作方法
专利名称：肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药 物纟且合物的用途，以及涉及一种药物组合物。
背景技术：
至今，在预防和治疗中用于抑制或阻止炎性反应的物质，即所谓 的免疫抑制剂，主要包括两类不同的物质。第一类是天然存在于体内 的激素衍生物，即可的松，和第二类是外源性免疫抑制剂，如环孢菌 素和其衍生物、硫唑嘌呤、环磷酰胺等。所有这些物质都具有抗炎作 用，但是，在长时间治疗中，这些物质表现出很大的副作用。这些副 作用限制了长期治疗的作用，这就是为了将副作用降低到可容忍的水 平或者为了能够实际进行治疗交替或联合应用这些物质的原因。作为 副作用的例子可提及，与可的松有关的病理性骨折，这种骨折是由于 可的松的骨质疏松作用引起的，或者可能由于环孢菌素引起的肾衰 竭。这些副作用对这两类化合物来说是必然的，因此，问题只是治疗 的持续时间和必须停止治疗时的总剂量。
本发明的目的是提供新的药物产品，所述产品适用于阻止或抑制 炎性作用并只具有较小的副作用。另一个目的在于提供长期治疗。
发明内容
下面，本发明的肽的氨基酸用常用的缩写表示，这些氨基酸是a-氨基酸。
"类似物，，是指一种肽，是由血纤蛋白的序列，特别是由优选的 序列，通过衍生化、取代，优选同源取代、缺失和/或插入而衍生的。本发明提供具有通式I (SEQ ID NO 1、 2)肽或蛋白质
<formula>formula see original document page 6</formula>
其中R!和R2相同或不同，表示氢、具有1 - 3个，特别是至多10个
碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，
Zi表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，
Z2表示精氨酸残基、包含起始精氨酸残基的，特别是包含2-30个氨 基酸的肽残基或者蛋白质残基，
及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其 它的物质的混合物，其中特别是只存在L-氨基酸，用于在人和/或兽 医学中治疗性和/或预防性地应用。
完全出人意料的是，所定义的氨基酸序列阻止血流中的细胞在血
本发明提供具有通式II (SEQ ID NO 3-IO)肽或者蛋白质
<formula>formula see original document page 6</formula>
其中R!和R2相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个
碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，
Z,表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，
Arg表示精氨酸残基
Z3表示脯氨酸残基或缬氨酸残基，
Z4表示亮氨酸残基或者缬氨酸残基，
Zs表示蛋白质残基或者肽残基，特别是包含2- 30个氨基酸的肽残基 或者蛋白质残基，
或者含有l-3，特别是至多IO个碳原子的醇基团，
或者有机或无才几碱基团，
及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它的物质的混合物，其中特别是只存在L-氨基酸，用于在人和/或兽医学 中治疗性和/或预防性地应用。
完全令人惊奇的是，血纤蛋白原的部分序列、肽或者片段具有抗 炎作用。不受限于与此相关的理论思考，这种作用可能基于血纤蛋白 通过其Bp链的neo-N-末端结合到内皮细胞上和通过Aa-链的序列与 血流中的细胞结合，由此导致细胞的粘附和向组织中移居。这些化合 物具有副作用并且抑制血纤蛋白形成。但是这种抑制不构成对病人的 潜在危害，因为在不存在血纤蛋白情况下，如果发生轻微的受伤，血 液凝结也是足够的。只是在外科手术时，可能适合的是停止这种治疗。 其它的副作用基本上可以排除，因为这些物质只与天然配体相互作 用。此外，血液中的白细胞不会对天然防御产生相反的影响。这样， 其组成，例如粒细胞、淋巴细胞和单核细胞保持不受影响，因此，天 然的防御过程保持不变并且血液中对感染的抵御保持不变。
血纤蛋白原在肝脏中形成并且这种形式是生物无活性的，其在血 液中的浓度一般为约3g/1。通过酶原凝血酶原的蛋白水解裂解作用 生成凝血酶，它从血纤蛋白原上裂解掉血纤肽A和B。由此血纤蛋白 原被转化成其生物活性的形式，生成血纤蛋白和血纤蛋白裂解产物。
在每一次的血液凝结活化过程中，即每次组织受伤、发生炎症、 夕卜伤或者变性发生(degenerativer Genese)时生成凝血酶，通过血纤 蛋白的调节生成凝血酶是一个主要的保护过程，目的是尽快愈合任何 血管系统的缺损。但是，血纤蛋白的生成也是一个致病过程。血纤蛋 白血栓的形成作为要解决的引起心肌梗塞的起因是人类医学的最重 要的问题之一。
至今还没有或者还没有充分研究血纤蛋白在炎性细胞从血流到 组织的外渗过程中起的作用，这一方面是抵御致病性微生物或存在于 组织中的肿瘤细胞的希望的过程，但是，另一方面，其本身是一个引 起自身组织损伤或者继续损伤的过程。血纤蛋白借助于序列Bf3，通 过其BP的neo-N-末端结合内皮细胞并且借助于序列Aa结合血流中的 细胞，因此导致细胞的粘附和向组织中移居。
本发明的肽或者蛋白质可以抑制血流中的细胞与血管壁的内皮 细胞的粘附和/或抑制随后细胞从血液向组织中的移居。
通式II的本发明的肽或者或者蛋白质，其中Zs表示具有下述氨基酸序列(SEQ ID NO 11)的肽残基:
Asp Lys Ly's Arg GIu'' 'Glu Ala Pro Ser Leu Arg' Pro'-'Ala Pro Pro Pro lie Ser Gly Gly Gly Tyr Arg
和
z,表示组氨酸残基，
Arg表示精氨酸残基，
Z3表示脯氨酸残基，
Z4表示亮氨酸残基，
抑制血纤蛋白片段在血管壁上的沉积和粘附。因此，它使炎性细胞不 能牢固地停留在动脉和静脉血管壁的内皮细胞上，并且阻止了这类细 胞停留在血管壁上，因此阻止了向组织中的进一步渗透。
通式II的肽或者蛋白质，其中Zs表示具有下述氨基酸序列(SEQ ID NO 12)的肽残基
Glu Arg His Gin S.er Ala Cys Lys Asp Ser Asp Trp .Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp Asn Tyr Lys
并且Zi表示脯氨酸残基， Arg表示精氨酸残基， Z3表示缬氨酸残基， Z4表示缬氨酸残基，
具有抑制周围血液的细胞与血纤蛋白或者血纤蛋白片段的粘附的作 用，因此抑制其向组织中的迁移。
所述裂解产物在文献中已知为肽Bp和肽Aa。上述提及的预粘附 和预迁移途径对于控制细胞从血液向组织中迁移的体系完全是新的。 血纤蛋白的这一功能既可以被肽Bp，也可以被肽Aa阻断。
因此，本发明的肽适合用作治疗剂用于人类或动物，以阻断细胞 从血液向组织中的迁移。由于血纤蛋白或者通过蛋白水解裂解产生的 血纤蛋白原的其它产物，例如被尿激酶-血纤蛋白溶酶原-激活剂裂解 的血纤蛋白原，仅特异性和区域性地有限产生，即在炎性、凝结失调、 动脉硬化、血栓形成和/或肺瘤生长位点，对此的所述治疗剂的作用是区域性受限的，即希望不在其它区域发生病理性副作用或者仅在有 限的程度上发生。
于制备在身体发生感染的情况下治疗或预防局部和/或全身性炎症的 药物组合物，所述感染基于自主免疫反应、基于风湿性疾病、基于免 疫系统紊乱、基于遗传疾病，用于预防和/或治疗器官移植之后发生 的排异反应、动脉硬化、输注损伤、基于动脉硬化和/或血栓疾病和
血纤蛋白沉积增加。这类肽，特别是Bp，也特别适合用于制备将其 它药物递送到人或动物内皮细胞的药物组合物。对此，将要递送的药 物偶联到所述肽的一端，然后通过VE-钩粘着蛋白沉积到血管壁的游 离位点上，即内皮细胞上。
具体实施例方式
下面通过实施例进一步说明本发明。 实施例1:血纤蛋白原裂解产物的制备
血纤蛋白原的非聚合的降解产物是按照Blomback等人(Nature 1968， 218; 130-134)通过用溴化氰分解得到的。如此裂解得到的血 纤蛋白原主要由63 kD的片段，即N-末端二石克桥连接，NDSK组成， 并且包含Aa链1-51、B(3链1-118和y链1-78。为了得到NDSK-II (NDSK 减去血纤肽A和B)，在室温下3小时用凝血酶(20单位/1 pg NDSK) 将Aa和Bp链的N-末端的氨基酸裂解掉，然后用氟磷酸二异丙酯处 理以阻断凝血酶的活性。如此得到的NDSK-II由Aa链17-51、 Bp链 15-118和y链1-78组成。
为了4寻到NDSK—uPA，在37。C下用Technoclone/>司，奥;也矛J维 也纳，的200单位尿激酶-血纤蛋白溶酶原-激活剂(uPA)处理500 pg NDSK 1小时。该反应用5 mM苯基曱基磺酰氟终止。如此得到的 NDSK-uPA是一种NDSK并且不具有血纤肽B。
作为阴性对照，从用溴化氰处理生成的血纤蛋白原裂解产物得到 的第二级分，按照Nie画nhuizen等 (Biochem Biophys Acta 1983， 755;531-533)称为FCB-2。 FCB-2是43 kD大小的蛋白质并且由Aa 链148-208、 Bp链191-305和"/链95-265组成。为了对照，向这种 蛋白质中加入凝血酶和氟磷酸二异丙酯。但是，不导致所述蛋白质的任何变化(在此后称为FCB-2-thr )。
对于其它的阴性对照，将培养基(Life techn. Inc.公司，PaiskyUK的RPMI)用凝血酶如上述处理并且随后灭活(RPMI-thr)或者用uPA按上述处理并且灭活(RPMI-uPA)。
实施例2:
肽Aa (SEQ ID NO 12)相应于血纤蛋白a链的氨基酸1 - 28并且与血纤蛋白原Aa链序列的氨基酸17-45相同
Gy Pro Arg Val Val Glu Arg His Gn Ser Ala Cys LysAsp Ser Asp Trp Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp AsnTyr Lys
肽B|3 (SEQ ID NO ll)相应于血纤蛋白卩链序列的氨基酸1-28，其与血纤蛋白原Bp链序列的氨基酸15-43相同，其具有下述序列
Gly His Arg Pro Leu Asp Lys Lys Arg Glu Glu Ala ProSer Leu Arg Pro Ala Pro Pro Pro lie Ser Gy Gy GyTyr Arg
按照Merrifield R. B. ， J. Amer. Chem. Soc. 1963; 85，2149-2154,用多功能肽合成器，按照Carpino L. A.和Han. G Y， J.Amer. Chem. Soc. 1981; 37; 3404-3409应用药基甲氧基羰基(FMOC)-保护基策略通过固相肽合成合成两种肽。粗品肽的纯化通过制备反相HPLC，用Nucleosil 100-10, C18柱，按照Engelhart H.和Miil lerH.的Chromatography 1984 19: 77以及Henschen A. ， Hupe K. P.和Lottspeich F. High Performance Liquid Chromatography VCH1985进行。用相同长度，但具有无规氨基酸序列的肽作为对照肽。
实施例3: HU-SCID小鼠模型
将人的皮肤移植到SCID小鼠的背部，在两周后将人淋巴细胞注射到腹膜内。这一过程按照Petzelba雨等(J. Invest. Dermatol.1996, 107; 576-581)的方法进行。然后，将15只这样准备的小鼠通过其尾静脉注射:
a)100网人类而k-ii
b)100人类FCB-2
c)100欣 Aa
d)100肽Bp
e)100无^见的Aa
f)100无规的B卩
24小时后，取下人类皮肤并评价炎性位点的数量，用细胞数/O. 3mm'表示，并且测定带有标准偏差的平均值。
对于a:22 +/2. 8
对于b9 +/-2.1
对于c4 +/-1.1
对于d6 +/-1.1
对于e5 +/-1.2
对于f7 +/-1.3
由此可推出，NDSK-II引起炎症，因此，所述蛋白质^皮用作致病物质。其它化合物本身没有表现出炎性细胞量的任何明显的增加。
比较例4:
按照实施例3通过其尾静脉给15只小鼠注射100 ng人NDSK-II和100 pg无规的肽Aa。
按照实施例3继续实施，可测得23 +/- 3. 5个炎性位点/O. 3 mm2。比较例5:
按照实施例3通过其尾静脉给15只小鼠注射100 pg按照实施例1的人NDSK-II和100 pg无关见的肽Bp。
按照实施例3继续实施，可测得24 +/- 2个炎性位点/0. 3 mm2。
实施例6:
按照实施例3给15只小鼠注射100 jag人NDSK-II和100 合成的肽Aa。
按照实施例3继续实施，可测得21 +/- 2. 2个炎性位点/0. 3 mm2。实施例7:
按照实施例3通过其尾静脉给15只小鼠注射100 人NDSK-II和100 合成的肽Bp。
按照实施例3继续实施，可测得14 +/- 2炎性位点/0. 3 mm2。实施例4-7表明，肽Bp阻断淋巴细胞的炎症。
比较例8:
用红色荧光染料(Cell Tracker Orange, 1 |ig/ml， MolecularProbes, Eugene, OR)标记人类的脐静脉内皮细胞(HUVEC)并且接种到股原基质(Collaborative Biomedical Products, Bedford, MA)上。在内皮细胞融合后，重叠用绿荧光染料(Cell Tracker Green， 1Molecular Probes公司，Eugene, Or igon)标记的夕卜周血单核细胞(PBMC) (105个细胞/25 mm2)。此后，在37°C温育细胞12小时。
用激光扫描显微镜给粘附的进入凝胶的细胞照相，并转换成图像(Pixel)并且用"NIH image"按照Gr6ger等(J. Immunol. Method1999; 222: 101-109)进行评价。
每0. 1 mi^的粘附的细胞的数量可例如按在"粘附"下提及的方法进行测定。每0.04 mm3迁入的细胞的数量可例如按照在"迁移"下提及的方法测定。测定具有标准偏差的三次的平均值。粘附 迁移
a) RPMI-uPA0,140+ /-44+ /-3
1,038+ /-25+ /-2
1 0,0(ig/ml32+ /-45+ /-1
b) NDSKo,ipg/ml3 1+ /-1 86+ /-
1,0pg/ml35+ /-1 S+ /-2
i o;opg/ml36+ /-246+ /-3
c) NDSK-II0,1fag/ml55+ /-2 1I 2+ /-5
I，O67+ /-3 I19+ /-
10,0(ig/ml65+ /-3 119+ /-10
d) NDSK-uPA0,1jig/ml58+ /-10+ /-
1,060+ /-3,514+ /-
10,0jig/ml65+ /-31 8+ /-〗.
e) FCB2o,ifig/ml30+ /-266+ /-/j
1,010+ /-103+ /-2
10,0lig/ml21+ /-75+ /-4
f) FCB-2-thr0,1pg/ml20+ /-126+ /-5
i,ofig/ml23+ /-13 7+ /-
I 0,0pg/ml26+ /-1 I4+ /-
g) RPMI-thr0,1(ig/ml29+ /-154+ /-5
1,0Hg/ml26+ /-145+ /-5
10,0jig/ml41+ /-205+/-4
由此可以得出，NDSK-II导致外周血单核细胞(PBMC)的明显迁移比NDSK-uPA程度大，并且因此具有致病活性。对照a)、 b) 、 e) 、 f)和g)均不导致明显的迁移。
实施例9:
将100 pg NDSK-ll和Bp或者无规的B(3加到按照实施例8的含有 PBMC悬浮液的胶原基质中，并按照实施例8继续进行。
粘附迁移
a)不加NDSK-II38+/-156 +/-4
b)仅100 pg NDSK-II73+/-2916 +/--7
c)10 pg Bp + NDSK-II63+ /-337 +/-4
d)100 Bp + NDSK-II47+/-345 +/-4
e)1000 Bp + NDSK-II52+/-2710 +/-.6
f)10 无*见的Bp + NDSK—II77+/-3316 +/-6
g)100 |ug无关见的Bp + NDSK-II86+/-3515 +/-6
h)1000 无*见的Bp + NDSK-II78+/—3113 +/-8
从这些试验结果中可以得出，肽Bp阻断炎症。 实施例10:
将100 NDSK-ll和Aa或者无规的Aa加到按照实施例8的含 有PBMC悬浮液的胶原基质中，并按照实施例8继续进行。
粘附 迁移
a)不力口而K-II42+/-610+/-1
b)仅NDSK-II96+/-1124+/-3
c)10 Aa + NDSK-II69+/-1221+/-4
d)100 Aa + NDSK-II73+/-1315+/-6
e)1000 Aa + NDSK-II70+/-613+/-5
f)10 |ug无关见的Aa + NDSK—II70+/-625+/-2
g)100 无规的Aa + NDSK-II65+/-1624+/-3
h)1000 |ag无规的Aa + NDSK-II70+/-1226+/—3从这些试验结果中可以得出，肽Aa只是部分地阻断PBMC的迁移。 实施例11:
由于PBMC主要由淋巴细胞和单核细胞的混合物构成，所以在实 施例11中用纯的'淋巴细胞代替PBMC(如在实施例8-10中)。
分别将100 pg NDSK-uPA或100 pg NDSK-II和Aa或B卩加到按 照实施例8的含有内皮细胞和淋巴细胞的胶原基质中。
粘附迁移
a)不力口68 +/-816+/_3
b)NDSK-uPA143 +/--1153+/_
c)NDSK-II119 +/--1143+/-4
d)仅100 Bp58 +/-1814+/-1
e)NDSK-uPA + 100 Bp74 +/-819+ /_2
f)NDSK-II + 100 ng B(374 +/-817+/-3
g)仅100 Aa77 +/-418+/-1
h)NDSK-uPA + 100 jig Aa131 +/-.440+/-3
i)NDSK-II + 100 ng Aa131 +/-'444+/-4
j)仅100 g无规的B卩75 +/-19+/_1
k)NDSK-uPA + 100 无规的Bp134 +/-.1346+/-4
1)NDSK-II + 100 无头见的B(3120 +/-.1242+/—4
这些试验结果表明
1) NDSK-II和NDSK-uPA都促进、淋巴细胞的炎症，
2) 肽B(3完全阻断由NDSK-11和NDSK-uPA诱导的淋巴细胞粘附 和迁移，而肽Aa不具有阻断活性，这表明自由的a链对诱导淋巴细 胞的粘附和迁移不是需要的。
实施例12:
按照实施例ll进行操作，但是替代淋巴细胞应用纯的单核细胞。 分别将100 NDSK-uPA或100 NDSK-II加到肽Aa、无规的Aa、 BP或者无规的Bp中。
15粘附迁移
a)不力口43+/-87 +/-1
b)NDSK-uPA48+/-1010 +/--2
c)NDSK-II90+/-1119 +/--6
d)100 (ig Bp59+/-75 +/_1
e)NDSK-uPA + 100 Bp61+/-118 +/-3
f)NDSK-II + 100 Bp70+/_77 +/-
g)100 无规的Bp40+/-76 +/-1
h)NDSK-uPA +100 无规的Bp45+/-8 +/-3
i)NDSK-II + 100 ng无去见的B(392+/-1020 +/--7
j)100 Aa59+/-65 +/-1
k)NDSK-uPA + 100 jag Aa62+/_48 +/-
1)NDSK-II + 100 ng Aa68+/-109 +/-6
m)100 g无规的Aa58+/-76 +/-1
n)NDSK-uPA + 100 jig无规的Aa50+/-1010 +/-■ 4
0)NDSK-II + 100 无规的Aa108:+/--821 +/-.5
这些试验结果表明，仅NDSK-II并且不是NDSK-uPA促进单核细 胞的迁移，即a链和P链必须具有一个游离的N-末端并阻断单核细胞 的迁移。
实施例13:
按照实施例11的步骤进行，应用纯的淋巴细胞。分别将100 NDSK—uPA或100 NDSK—II力口至'J4汙生于Act Gly Pro Arg (Pro)—NH2 乙酸盐(Aa-衍生物)或者衍生于Bp Gly His Arg Pro-OH乙酸盐(B(3-衍生物)的短肽的盐中。
粘附 迁移
a) 不力口 60 +/— 8 14 +/- 1
b) NDSK-uPA 149 +/- 12 57 +/- 5
c) 鹏K-II 121 +/— 11 48 +/— 7d)仅100 |Lig Bp-书f生物58 +/-1012+/-9
e)NDSK-uPA + 100 Bp-衍生物70 +/-816+/-3
f)NDSK-II + 100 Bp-衍生物69 +/-714+/-
g)仅100 Aoc-Ut生物77 +/-418+/-1
h)NDSK-uPA +100 Act-4汙生物134 +/--448+/-5
i)NDSK-II + 100 Aoc-衍生物131 +/--749+ /-6
j)仅100 无规的Bp-衍生物70 +/-14+/-了
k)NDSK-uPA + 100 jig无规的Bp-书t生物130 +/--1249+/-6
1)NDSK-II + 100 |ag无规的Bp-衍生物120 +/--1055+/—8
由这些试验得出，如杲淋巴细胞迁移^^抑制，这些以适当方式连 续加入的短链肽与长链肽具有相同的活性。
实施例14:
按照实施例12进行操作，应用纯的单核细胞。分别将100 NDSK—uPA或100 NDSK—II力口至ij书亍生于Act Gly Pro Arg (Pro)-NH2 乙酸盐(Aa-衍生物)或者衍生于Bp Gly His Arg Pro-OH乙酸盐(Bp-衍生物)的短肽的盐中。
粘附迁移
a)不力口40+/-85 +/-1
b)NDSK-uPA54+/-97 +/-2
c)NDSK-II85+/-1122 +/-匿6
d)100 jxg Bp-纟汙生物52+/-76 +/-1
e)NDSK-uPA + 100 B(3-衍生物61+/-118 +/-3
f)NDSK—II + 100 jig B|3—汙生物68+/-78 +/-4
g)100 ng无规的Bp-衍生物40+/-76 +/-1
h)NDSK-uPA + 100 无规的Bp-衍生物44+/-68 +/-2
i)NDSK-II + 100 无规的B(3-衍生物92+/-1023 +/--7
j)100 pg Aoc-4汙生物50+/-4 +/-4
k)NDSK-uPA + 100 Aa-4汙生物60+/-7 +/-6
1)NDSK-II + 100 Aa-书亍生物64+/—118 +/—2m) 100 ng无规的Act-衍生物 54 +/- 1 06 +/- 3
n) NDSK—uPA + 100 无规的Aa-衍生物 5 0 +/- 10 10 +/- 4 o) NDSK-II + 100 无规的Aa-4汙生物99 +/- 8 21 +/- 7
由这些试验得出，如果单核细胞迁移被抑制，这些以适当方式连 续加入的短链肽与长链肽具有相同的活性。
实施例15:
该试验用220 g- 280 g重的雄性Wistar大鼠进行。给这些大鼠 提供标准的食物和水。为了进行该试验，将大鼠麻醉并进行频率为 70次/分钟的人工呼吸，其中通过1 mm-2 mm水银的超压按照每千 克8 ml - 10 ml给予含有30体积％氧气的气体。给右心动脉安装测
量插管并测定该动脉的血压和心率。测定压力比率，作为该动脉中的 血压和心率的乘积，其量纲为mm水银/分钟/103。在右侧的静脉安装 测量插管用于施加测试物质。在进行外科处理后，向大鼠心脏提供2 ml大鼠血液。30分钟后，将左侧的心动脉闭合。再过25分钟将闭合 +>开，以给缺血区域供血。在此刻，给半数动物静脉施用800 ng/kg 的肽B(3或无规的肽B|3，然后等待2小时。
然后，为了区分受损的和未受损的心肌组织，给左侧心脏动脉提 供浓度为2重量％的evans蓝染料。然后将取下的心脏水平切片成 5部分，去除右静脉壁并用氯化三苯基tetratol(l重量％)在37°C 处理这些切片20分钟，以区分正常组织和梗塞的组织。用电脑控制 的面积法评价这些切片。
由于血管闭合，对照大鼠心脏中心肌的62. 5 %受到威胁，而在 试验大鼠心脏中为60%。在对照大鼠心脏中受到威胁的组织的46 %坏死，相反在试验大鼠心脏中只有29%。这相当于坏死组织降低 了 37% (p < 0. 05)。
按照本发明的物质以及按照本发明的物质的用于制备药物组合 物的用途具有特别的意义
用于治疗由自主反应的淋巴细胞的组织破坏作用引起的疾病中 <吏用的药物组合物。
属于这类的疾病的是自身免疫领域的疾病，例如胶原性疾病、风湿病、牛皮癣和感染后/副感染疾病和由移植物与宿主反应引起的疾 病。产生治愈效果，因为这些药物组合物阻断淋巴细胞迁移到组织中。 因此，这些淋巴细胞停留在血液中并且不能产生自主反应性组织破坏 作用。
在治疗和/或预防器官移植后发生排斥时这些药物产生治愈效 果，因为这些药物阻止淋巴细胞从血液向外来器官中迁移，因此，外 来器官不能被自主反应性淋巴细胞破坏。
在治疗和/或预防器官移植后的动脉硬化时这些药物产生治愈效 果，因为这些药物抑制淋巴细胞和单核细胞向血管壁中的迁移，因此， 阻止了血管壁中细胞的活化。对此，将器官移植后动脉硬化发生率最 小化或者被阻止。
在治疗和/或预防术后再灌注损伤或者药物引起的血流恢复，例 如心肌梗塞后、中风后、血管手术后、分流术和器官移植后的血流恢 复时这些药物产生治愈效果，因为这些药物抑制淋巴细胞和单核细胞 向血管壁中迁移。再灌注损伤是由于血流恢复过程中存在的血管细胞 由于缺氧/酸中毒引起的并导致其活化。因此，淋巴细胞和单核细胞 粘附到血管壁上并向其中迁移。淋巴细胞和单核细胞在血管壁上的粘 附和向血管壁中的迁移被抑制的事实降低了缺氧/酸中毒引起的损 伤，不会由于随后的炎性反应引起任何永久性血管损伤。
在治疗和/或预防代谢疾病或老化过程之后的动脉硬化时，这些 药物产生治愈效果，因为这些药物抑制淋巴细胞和单核细胞向血管壁 中的迁移，因此，抑制了由此引起的动脉硬化斑的进展。
也可以用本发明的药物组合物转运另一种药物物质。按照本发明
的药物组合物特异性结合到内皮细胞的表面分子。因此，与其偶联的 药物物质可以高浓度与内皮细胞接触，而使它们不会在其它位置引发 副作用。作为实例可提及应用抑制细胞分裂的物质，这些物质被特异 性地引导到内皮细胞之后发挥其抗血管生成作用。在这种情况下对肺 瘤患者有治疗作用，因为通过抑制内皮细胞的增殖和因此通过避免新 血管生成而阻断了肿瘤的生长。序列表
〈110> FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 <140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
<170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0, Office 97 〈210〉 1 〈211〉 32 〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Xaa2 Xaa29〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
<120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170> Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97 〈210〉 2 〈211〉 32 〈212〉肽
<400〉 Gly Pro Arg Xaa2 Xaa29〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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〈170〉 Microsoft Windows NT, Workstation 4.0， Office 97 〈210〉 3 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Pro Val Xaa2 Xaa30序列表
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〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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〈211〉 7 to 32 〈212〉肽
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序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4.0， Office 97 〈210〉 5 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Pro Val Xaa2 Xaa30序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT, Workstation 4.0， Office 97 <210> 6 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Val Val Xaa2 Xaa30序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97 〈210〉 7 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Pro Leu Xaa2 Xaa30序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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〈400〉 Gly His Arg Pro Leu序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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<170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97〈210〉 9<211〉 7 to 35〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Val Leu Xaa2 Xaa30〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
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〈211〉 7 to 35〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Val Leu Xaa2 Xaa30说明书第26/27页
序列表
〈110> F工BREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉〈140〉〈141〉
〈150> AT 2063/2000〈151〉 2000 12 12〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4.0， Office 97〈210〉 11〈211〉 28〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Pro Leu Asp Lys Lys Arg Glu GluAla Pro Ser Leu Arg Pro Ala Pro Pro Pro lieSer Gly Gly Gly Tyr Arg〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97 〈210〉 12 〈211〉 28 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Val Val Glu Arg His Gin Ser Ala Cys Lys Asp Ser Asp Trp Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp Asn Tyr Lys
权利要求
1.通式I(SEQ ID NO 1、2)的肽或蛋白质其中R1和R2相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，Z1表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，Z2表示精氨酸残基、包含起始精氨酸残基的，特别是包含2-30个氨基酸的肽残基或者蛋白质残基，及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它的用于人和/或兽医学中的用于治疗性和/或预防性应用的物质的混合物。
2.按照权利要求1的具有通式II (SEQ ID NO 3 -IO)的肽或 者蛋白质<formula>formula see original document page 2</formula>其中l和R2相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，Zi表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，Arg表示精氨酸残基Z3表示脯氨酸残基或缬氨酸残基，Z4表示亮氨酸残基或者缬氨酸残基，Z5表示蛋白质残基或者肽残基，特别是包含2 - 30个氨基酸的肽残基 或者蛋白质残基，或者含有l-3，特别是至多IO个碳原子的醇基团，或者有机或无机碱基团，及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它的 用于人和/或兽医学中的用于治疗性和/或预防性应用的物质的混合 物。
3. 按照权利要求2的肽或者蛋白质，其中Zs是衍生于血纤蛋白 Aa-链的肽残基。
4. 按照权利要求2的肽或者蛋白质，其中Zs是衍生于血纤蛋白 Bp-链的肽残基。
5. 按照权利要求2通式II的肽或者蛋白质，其中Zs是具有下述 氨基酸序列(SEQ ID NO ll)的肽残基Asp Lys Lys Arg Gu Glu Ala ProSer Leu Arg Pro Ala Pro Pro Pro lie Ser GIy Gly Gly Tyr Arg并且Z,表示组氨酸残基， Arg表示精氨酸残基， Z3表示脯氨酸残基， Z4表示亮氨酸残基。
6. 按照权利要求2的通式II的肽或者蛋白质，其中Z5是具有下 述氨基酸序列(SEQ ID NO 12)的肽残基Glu Arg His Gin Ser Ala Cys Lys Asp Ser Asp Trp Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp Asn Tyr Lys并且Zi表示脯氨酸残基， Arg表示精氨酸残基， Z3表示缬氨酸残基， Z^表示缬氨酸残基。
7. 按照权利要求1-6任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗感染引起的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
8. 按照权利要求1-7任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于自身免疫反应的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
9. 按照权利要求1 - 8任一項的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于风湿病的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
10. 按照权利要求l-9任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于免疫系统紊乱的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
11. 按照权利要求1 - 10任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于遗传疾病的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
12. 按照权利要求1-11任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗器官移植后发生的排斥反应、动脉硬化、再灌注损伤、动脉硬化疾病和/或在衰老过程中血纤蛋白沉积增多的药物组合物的用途。
13. 按照权利要求1 - 12任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗器官移植后动脉硬化的药物组合物的用途。
14. 按照权利要求1 - 13任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗再灌注损伤的药物组合物的用途。
15. 按照权利要求1 - 14任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗动脉硬化和/或血栓疾病的药物组合物的用途。
16. 按照权利要求1-15任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗衰老过程中血纤蛋白沉积增多的药物组合物的用途。
17. 按照权利要求1-16任一项的肽和/或蛋白质用于制备用于向人或动物内皮细胞递送一种其它药物的药物组合物的用途。
18. —种药物组合物，含有至少一种权利要求l-17任一项的肽和/或蛋白质。
19. 按照权利要求1 - 18任一项的药物组合物，这些药物组合物为适于注射的形式。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的肽或蛋白质及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它物质的混合物用于人和/或兽医学中治疗性和/或预防性应用，其中R<sub>1</sub>和R<sub>2</sub>相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，Z<sub>1</sub>表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，Z<sub>2</sub>表示精氨酸残基、具有起始精氨酸末端的，特别是包含2-30个氨基酸的肽残基或者蛋白质残基。
文档编号A61P37/00GK101676299SQ20091016355
公开日2010年3月24日 申请日期2001年12月7日 优先权日2000年12月12日
发明者P·佩策尔保尔 申请人:菲布雷克斯医疗研究及开发有限责任公司
技术领域：
本发明涉及肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药 物纟且合物的用途，以及涉及一种药物组合物。
背景技术：
至今，在预防和治疗中用于抑制或阻止炎性反应的物质，即所谓 的免疫抑制剂，主要包括两类不同的物质。第一类是天然存在于体内 的激素衍生物，即可的松，和第二类是外源性免疫抑制剂，如环孢菌 素和其衍生物、硫唑嘌呤、环磷酰胺等。所有这些物质都具有抗炎作 用，但是，在长时间治疗中，这些物质表现出很大的副作用。这些副 作用限制了长期治疗的作用，这就是为了将副作用降低到可容忍的水 平或者为了能够实际进行治疗交替或联合应用这些物质的原因。作为 副作用的例子可提及，与可的松有关的病理性骨折，这种骨折是由于 可的松的骨质疏松作用引起的，或者可能由于环孢菌素引起的肾衰 竭。这些副作用对这两类化合物来说是必然的，因此，问题只是治疗 的持续时间和必须停止治疗时的总剂量。
本发明的目的是提供新的药物产品，所述产品适用于阻止或抑制 炎性作用并只具有较小的副作用。另一个目的在于提供长期治疗。
发明内容
下面，本发明的肽的氨基酸用常用的缩写表示，这些氨基酸是a-氨基酸。
"类似物，，是指一种肽，是由血纤蛋白的序列，特别是由优选的 序列，通过衍生化、取代，优选同源取代、缺失和/或插入而衍生的。本发明提供具有通式I (SEQ ID NO 1、 2)肽或蛋白质
<formula>formula see original document page 6</formula>
其中R!和R2相同或不同，表示氢、具有1 - 3个，特别是至多10个
碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，
Zi表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，
Z2表示精氨酸残基、包含起始精氨酸残基的，特别是包含2-30个氨 基酸的肽残基或者蛋白质残基，
及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其 它的物质的混合物，其中特别是只存在L-氨基酸，用于在人和/或兽 医学中治疗性和/或预防性地应用。
完全出人意料的是，所定义的氨基酸序列阻止血流中的细胞在血
本发明提供具有通式II (SEQ ID NO 3-IO)肽或者蛋白质
<formula>formula see original document page 6</formula>
其中R!和R2相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个
碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，
Z,表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，
Arg表示精氨酸残基
Z3表示脯氨酸残基或缬氨酸残基，
Z4表示亮氨酸残基或者缬氨酸残基，
Zs表示蛋白质残基或者肽残基，特别是包含2- 30个氨基酸的肽残基 或者蛋白质残基，
或者含有l-3，特别是至多IO个碳原子的醇基团，
或者有机或无才几碱基团，
及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它的物质的混合物，其中特别是只存在L-氨基酸，用于在人和/或兽医学 中治疗性和/或预防性地应用。
完全令人惊奇的是，血纤蛋白原的部分序列、肽或者片段具有抗 炎作用。不受限于与此相关的理论思考，这种作用可能基于血纤蛋白 通过其Bp链的neo-N-末端结合到内皮细胞上和通过Aa-链的序列与 血流中的细胞结合，由此导致细胞的粘附和向组织中移居。这些化合 物具有副作用并且抑制血纤蛋白形成。但是这种抑制不构成对病人的 潜在危害，因为在不存在血纤蛋白情况下，如果发生轻微的受伤，血 液凝结也是足够的。只是在外科手术时，可能适合的是停止这种治疗。 其它的副作用基本上可以排除，因为这些物质只与天然配体相互作 用。此外，血液中的白细胞不会对天然防御产生相反的影响。这样， 其组成，例如粒细胞、淋巴细胞和单核细胞保持不受影响，因此，天 然的防御过程保持不变并且血液中对感染的抵御保持不变。
血纤蛋白原在肝脏中形成并且这种形式是生物无活性的，其在血 液中的浓度一般为约3g/1。通过酶原凝血酶原的蛋白水解裂解作用 生成凝血酶，它从血纤蛋白原上裂解掉血纤肽A和B。由此血纤蛋白 原被转化成其生物活性的形式，生成血纤蛋白和血纤蛋白裂解产物。
在每一次的血液凝结活化过程中，即每次组织受伤、发生炎症、 夕卜伤或者变性发生(degenerativer Genese)时生成凝血酶，通过血纤 蛋白的调节生成凝血酶是一个主要的保护过程，目的是尽快愈合任何 血管系统的缺损。但是，血纤蛋白的生成也是一个致病过程。血纤蛋 白血栓的形成作为要解决的引起心肌梗塞的起因是人类医学的最重 要的问题之一。
至今还没有或者还没有充分研究血纤蛋白在炎性细胞从血流到 组织的外渗过程中起的作用，这一方面是抵御致病性微生物或存在于 组织中的肿瘤细胞的希望的过程，但是，另一方面，其本身是一个引 起自身组织损伤或者继续损伤的过程。血纤蛋白借助于序列Bf3，通 过其BP的neo-N-末端结合内皮细胞并且借助于序列Aa结合血流中的 细胞，因此导致细胞的粘附和向组织中移居。
本发明的肽或者蛋白质可以抑制血流中的细胞与血管壁的内皮 细胞的粘附和/或抑制随后细胞从血液向组织中的移居。
通式II的本发明的肽或者或者蛋白质，其中Zs表示具有下述氨基酸序列(SEQ ID NO 11)的肽残基:
Asp Lys Ly's Arg GIu'' 'Glu Ala Pro Ser Leu Arg' Pro'-'Ala Pro Pro Pro lie Ser Gly Gly Gly Tyr Arg
和
z,表示组氨酸残基，
Arg表示精氨酸残基，
Z3表示脯氨酸残基，
Z4表示亮氨酸残基，
抑制血纤蛋白片段在血管壁上的沉积和粘附。因此，它使炎性细胞不 能牢固地停留在动脉和静脉血管壁的内皮细胞上，并且阻止了这类细 胞停留在血管壁上，因此阻止了向组织中的进一步渗透。
通式II的肽或者蛋白质，其中Zs表示具有下述氨基酸序列(SEQ ID NO 12)的肽残基
Glu Arg His Gin S.er Ala Cys Lys Asp Ser Asp Trp .Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp Asn Tyr Lys
并且Zi表示脯氨酸残基， Arg表示精氨酸残基， Z3表示缬氨酸残基， Z4表示缬氨酸残基，
具有抑制周围血液的细胞与血纤蛋白或者血纤蛋白片段的粘附的作 用，因此抑制其向组织中的迁移。
所述裂解产物在文献中已知为肽Bp和肽Aa。上述提及的预粘附 和预迁移途径对于控制细胞从血液向组织中迁移的体系完全是新的。 血纤蛋白的这一功能既可以被肽Bp，也可以被肽Aa阻断。
因此，本发明的肽适合用作治疗剂用于人类或动物，以阻断细胞 从血液向组织中的迁移。由于血纤蛋白或者通过蛋白水解裂解产生的 血纤蛋白原的其它产物，例如被尿激酶-血纤蛋白溶酶原-激活剂裂解 的血纤蛋白原，仅特异性和区域性地有限产生，即在炎性、凝结失调、 动脉硬化、血栓形成和/或肺瘤生长位点，对此的所述治疗剂的作用是区域性受限的，即希望不在其它区域发生病理性副作用或者仅在有 限的程度上发生。
于制备在身体发生感染的情况下治疗或预防局部和/或全身性炎症的 药物组合物，所述感染基于自主免疫反应、基于风湿性疾病、基于免 疫系统紊乱、基于遗传疾病，用于预防和/或治疗器官移植之后发生 的排异反应、动脉硬化、输注损伤、基于动脉硬化和/或血栓疾病和
血纤蛋白沉积增加。这类肽，特别是Bp，也特别适合用于制备将其 它药物递送到人或动物内皮细胞的药物组合物。对此，将要递送的药 物偶联到所述肽的一端，然后通过VE-钩粘着蛋白沉积到血管壁的游 离位点上，即内皮细胞上。
具体实施例方式
下面通过实施例进一步说明本发明。 实施例1:血纤蛋白原裂解产物的制备
血纤蛋白原的非聚合的降解产物是按照Blomback等人(Nature 1968， 218; 130-134)通过用溴化氰分解得到的。如此裂解得到的血 纤蛋白原主要由63 kD的片段，即N-末端二石克桥连接，NDSK组成， 并且包含Aa链1-51、B(3链1-118和y链1-78。为了得到NDSK-II (NDSK 减去血纤肽A和B)，在室温下3小时用凝血酶(20单位/1 pg NDSK) 将Aa和Bp链的N-末端的氨基酸裂解掉，然后用氟磷酸二异丙酯处 理以阻断凝血酶的活性。如此得到的NDSK-II由Aa链17-51、 Bp链 15-118和y链1-78组成。
为了4寻到NDSK—uPA，在37。C下用Technoclone/>司，奥;也矛J维 也纳，的200单位尿激酶-血纤蛋白溶酶原-激活剂(uPA)处理500 pg NDSK 1小时。该反应用5 mM苯基曱基磺酰氟终止。如此得到的 NDSK-uPA是一种NDSK并且不具有血纤肽B。
作为阴性对照，从用溴化氰处理生成的血纤蛋白原裂解产物得到 的第二级分，按照Nie画nhuizen等 (Biochem Biophys Acta 1983， 755;531-533)称为FCB-2。 FCB-2是43 kD大小的蛋白质并且由Aa 链148-208、 Bp链191-305和"/链95-265组成。为了对照，向这种 蛋白质中加入凝血酶和氟磷酸二异丙酯。但是，不导致所述蛋白质的任何变化(在此后称为FCB-2-thr )。
对于其它的阴性对照，将培养基(Life techn. Inc.公司，PaiskyUK的RPMI)用凝血酶如上述处理并且随后灭活(RPMI-thr)或者用uPA按上述处理并且灭活(RPMI-uPA)。
实施例2:
肽Aa (SEQ ID NO 12)相应于血纤蛋白a链的氨基酸1 - 28并且与血纤蛋白原Aa链序列的氨基酸17-45相同
Gy Pro Arg Val Val Glu Arg His Gn Ser Ala Cys LysAsp Ser Asp Trp Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp AsnTyr Lys
肽B|3 (SEQ ID NO ll)相应于血纤蛋白卩链序列的氨基酸1-28，其与血纤蛋白原Bp链序列的氨基酸15-43相同，其具有下述序列
Gly His Arg Pro Leu Asp Lys Lys Arg Glu Glu Ala ProSer Leu Arg Pro Ala Pro Pro Pro lie Ser Gy Gy GyTyr Arg
按照Merrifield R. B. ， J. Amer. Chem. Soc. 1963; 85，2149-2154,用多功能肽合成器，按照Carpino L. A.和Han. G Y， J.Amer. Chem. Soc. 1981; 37; 3404-3409应用药基甲氧基羰基(FMOC)-保护基策略通过固相肽合成合成两种肽。粗品肽的纯化通过制备反相HPLC，用Nucleosil 100-10, C18柱，按照Engelhart H.和Miil lerH.的Chromatography 1984 19: 77以及Henschen A. ， Hupe K. P.和Lottspeich F. High Performance Liquid Chromatography VCH1985进行。用相同长度，但具有无规氨基酸序列的肽作为对照肽。
实施例3: HU-SCID小鼠模型
将人的皮肤移植到SCID小鼠的背部，在两周后将人淋巴细胞注射到腹膜内。这一过程按照Petzelba雨等(J. Invest. Dermatol.1996, 107; 576-581)的方法进行。然后，将15只这样准备的小鼠通过其尾静脉注射:
a)100网人类而k-ii
b)100人类FCB-2
c)100欣 Aa
d)100肽Bp
e)100无^见的Aa
f)100无规的B卩
24小时后，取下人类皮肤并评价炎性位点的数量，用细胞数/O. 3mm'表示，并且测定带有标准偏差的平均值。
对于a:22 +/2. 8
对于b9 +/-2.1
对于c4 +/-1.1
对于d6 +/-1.1
对于e5 +/-1.2
对于f7 +/-1.3
由此可推出，NDSK-II引起炎症，因此，所述蛋白质^皮用作致病物质。其它化合物本身没有表现出炎性细胞量的任何明显的增加。
比较例4:
按照实施例3通过其尾静脉给15只小鼠注射100 ng人NDSK-II和100 pg无规的肽Aa。
按照实施例3继续实施，可测得23 +/- 3. 5个炎性位点/O. 3 mm2。比较例5:
按照实施例3通过其尾静脉给15只小鼠注射100 pg按照实施例1的人NDSK-II和100 pg无关见的肽Bp。
按照实施例3继续实施，可测得24 +/- 2个炎性位点/0. 3 mm2。
实施例6:
按照实施例3给15只小鼠注射100 jag人NDSK-II和100 合成的肽Aa。
按照实施例3继续实施，可测得21 +/- 2. 2个炎性位点/0. 3 mm2。实施例7:
按照实施例3通过其尾静脉给15只小鼠注射100 人NDSK-II和100 合成的肽Bp。
按照实施例3继续实施，可测得14 +/- 2炎性位点/0. 3 mm2。实施例4-7表明，肽Bp阻断淋巴细胞的炎症。
比较例8:
用红色荧光染料(Cell Tracker Orange, 1 |ig/ml， MolecularProbes, Eugene, OR)标记人类的脐静脉内皮细胞(HUVEC)并且接种到股原基质(Collaborative Biomedical Products, Bedford, MA)上。在内皮细胞融合后，重叠用绿荧光染料(Cell Tracker Green， 1Molecular Probes公司，Eugene, Or igon)标记的夕卜周血单核细胞(PBMC) (105个细胞/25 mm2)。此后，在37°C温育细胞12小时。
用激光扫描显微镜给粘附的进入凝胶的细胞照相，并转换成图像(Pixel)并且用"NIH image"按照Gr6ger等(J. Immunol. Method1999; 222: 101-109)进行评价。
每0. 1 mi^的粘附的细胞的数量可例如按在"粘附"下提及的方法进行测定。每0.04 mm3迁入的细胞的数量可例如按照在"迁移"下提及的方法测定。测定具有标准偏差的三次的平均值。粘附 迁移
a) RPMI-uPA0,140+ /-44+ /-3
1,038+ /-25+ /-2
1 0,0(ig/ml32+ /-45+ /-1
b) NDSKo,ipg/ml3 1+ /-1 86+ /-
1,0pg/ml35+ /-1 S+ /-2
i o;opg/ml36+ /-246+ /-3
c) NDSK-II0,1fag/ml55+ /-2 1I 2+ /-5
I，O67+ /-3 I19+ /-
10,0(ig/ml65+ /-3 119+ /-10
d) NDSK-uPA0,1jig/ml58+ /-10+ /-
1,060+ /-3,514+ /-
10,0jig/ml65+ /-31 8+ /-〗.
e) FCB2o,ifig/ml30+ /-266+ /-/j
1,010+ /-103+ /-2
10,0lig/ml21+ /-75+ /-4
f) FCB-2-thr0,1pg/ml20+ /-126+ /-5
i,ofig/ml23+ /-13 7+ /-
I 0,0pg/ml26+ /-1 I4+ /-
g) RPMI-thr0,1(ig/ml29+ /-154+ /-5
1,0Hg/ml26+ /-145+ /-5
10,0jig/ml41+ /-205+/-4
由此可以得出，NDSK-II导致外周血单核细胞(PBMC)的明显迁移比NDSK-uPA程度大，并且因此具有致病活性。对照a)、 b) 、 e) 、 f)和g)均不导致明显的迁移。
实施例9:
将100 pg NDSK-ll和Bp或者无规的B(3加到按照实施例8的含有 PBMC悬浮液的胶原基质中，并按照实施例8继续进行。
粘附迁移
a)不加NDSK-II38+/-156 +/-4
b)仅100 pg NDSK-II73+/-2916 +/--7
c)10 pg Bp + NDSK-II63+ /-337 +/-4
d)100 Bp + NDSK-II47+/-345 +/-4
e)1000 Bp + NDSK-II52+/-2710 +/-.6
f)10 无*见的Bp + NDSK—II77+/-3316 +/-6
g)100 |ug无关见的Bp + NDSK-II86+/-3515 +/-6
h)1000 无*见的Bp + NDSK-II78+/—3113 +/-8
从这些试验结果中可以得出，肽Bp阻断炎症。 实施例10:
将100 NDSK-ll和Aa或者无规的Aa加到按照实施例8的含 有PBMC悬浮液的胶原基质中，并按照实施例8继续进行。
粘附 迁移
a)不力口而K-II42+/-610+/-1
b)仅NDSK-II96+/-1124+/-3
c)10 Aa + NDSK-II69+/-1221+/-4
d)100 Aa + NDSK-II73+/-1315+/-6
e)1000 Aa + NDSK-II70+/-613+/-5
f)10 |ug无关见的Aa + NDSK—II70+/-625+/-2
g)100 无规的Aa + NDSK-II65+/-1624+/-3
h)1000 |ag无规的Aa + NDSK-II70+/-1226+/—3从这些试验结果中可以得出，肽Aa只是部分地阻断PBMC的迁移。 实施例11:
由于PBMC主要由淋巴细胞和单核细胞的混合物构成，所以在实 施例11中用纯的'淋巴细胞代替PBMC(如在实施例8-10中)。
分别将100 pg NDSK-uPA或100 pg NDSK-II和Aa或B卩加到按 照实施例8的含有内皮细胞和淋巴细胞的胶原基质中。
粘附迁移
a)不力口68 +/-816+/_3
b)NDSK-uPA143 +/--1153+/_
c)NDSK-II119 +/--1143+/-4
d)仅100 Bp58 +/-1814+/-1
e)NDSK-uPA + 100 Bp74 +/-819+ /_2
f)NDSK-II + 100 ng B(374 +/-817+/-3
g)仅100 Aa77 +/-418+/-1
h)NDSK-uPA + 100 jig Aa131 +/-.440+/-3
i)NDSK-II + 100 ng Aa131 +/-'444+/-4
j)仅100 g无规的B卩75 +/-19+/_1
k)NDSK-uPA + 100 无规的Bp134 +/-.1346+/-4
1)NDSK-II + 100 无头见的B(3120 +/-.1242+/—4
这些试验结果表明
1) NDSK-II和NDSK-uPA都促进、淋巴细胞的炎症，
2) 肽B(3完全阻断由NDSK-11和NDSK-uPA诱导的淋巴细胞粘附 和迁移，而肽Aa不具有阻断活性，这表明自由的a链对诱导淋巴细 胞的粘附和迁移不是需要的。
实施例12:
按照实施例ll进行操作，但是替代淋巴细胞应用纯的单核细胞。 分别将100 NDSK-uPA或100 NDSK-II加到肽Aa、无规的Aa、 BP或者无规的Bp中。
15粘附迁移
a)不力口43+/-87 +/-1
b)NDSK-uPA48+/-1010 +/--2
c)NDSK-II90+/-1119 +/--6
d)100 (ig Bp59+/-75 +/_1
e)NDSK-uPA + 100 Bp61+/-118 +/-3
f)NDSK-II + 100 Bp70+/_77 +/-
g)100 无规的Bp40+/-76 +/-1
h)NDSK-uPA +100 无规的Bp45+/-8 +/-3
i)NDSK-II + 100 ng无去见的B(392+/-1020 +/--7
j)100 Aa59+/-65 +/-1
k)NDSK-uPA + 100 jag Aa62+/_48 +/-
1)NDSK-II + 100 ng Aa68+/-109 +/-6
m)100 g无规的Aa58+/-76 +/-1
n)NDSK-uPA + 100 jig无规的Aa50+/-1010 +/-■ 4
0)NDSK-II + 100 无规的Aa108:+/--821 +/-.5
这些试验结果表明，仅NDSK-II并且不是NDSK-uPA促进单核细 胞的迁移，即a链和P链必须具有一个游离的N-末端并阻断单核细胞 的迁移。
实施例13:
按照实施例11的步骤进行，应用纯的淋巴细胞。分别将100 NDSK—uPA或100 NDSK—II力口至'J4汙生于Act Gly Pro Arg (Pro)—NH2 乙酸盐(Aa-衍生物)或者衍生于Bp Gly His Arg Pro-OH乙酸盐(B(3-衍生物)的短肽的盐中。
粘附 迁移
a) 不力口 60 +/— 8 14 +/- 1
b) NDSK-uPA 149 +/- 12 57 +/- 5
c) 鹏K-II 121 +/— 11 48 +/— 7d)仅100 |Lig Bp-书f生物58 +/-1012+/-9
e)NDSK-uPA + 100 Bp-衍生物70 +/-816+/-3
f)NDSK-II + 100 Bp-衍生物69 +/-714+/-
g)仅100 Aoc-Ut生物77 +/-418+/-1
h)NDSK-uPA +100 Act-4汙生物134 +/--448+/-5
i)NDSK-II + 100 Aoc-衍生物131 +/--749+ /-6
j)仅100 无规的Bp-衍生物70 +/-14+/-了
k)NDSK-uPA + 100 jig无规的Bp-书t生物130 +/--1249+/-6
1)NDSK-II + 100 |ag无规的Bp-衍生物120 +/--1055+/—8
由这些试验得出，如杲淋巴细胞迁移^^抑制，这些以适当方式连 续加入的短链肽与长链肽具有相同的活性。
实施例14:
按照实施例12进行操作，应用纯的单核细胞。分别将100 NDSK—uPA或100 NDSK—II力口至ij书亍生于Act Gly Pro Arg (Pro)-NH2 乙酸盐(Aa-衍生物)或者衍生于Bp Gly His Arg Pro-OH乙酸盐(Bp-衍生物)的短肽的盐中。
粘附迁移
a)不力口40+/-85 +/-1
b)NDSK-uPA54+/-97 +/-2
c)NDSK-II85+/-1122 +/-匿6
d)100 jxg Bp-纟汙生物52+/-76 +/-1
e)NDSK-uPA + 100 B(3-衍生物61+/-118 +/-3
f)NDSK—II + 100 jig B|3—汙生物68+/-78 +/-4
g)100 ng无规的Bp-衍生物40+/-76 +/-1
h)NDSK-uPA + 100 无规的Bp-衍生物44+/-68 +/-2
i)NDSK-II + 100 无规的B(3-衍生物92+/-1023 +/--7
j)100 pg Aoc-4汙生物50+/-4 +/-4
k)NDSK-uPA + 100 Aa-4汙生物60+/-7 +/-6
1)NDSK-II + 100 Aa-书亍生物64+/—118 +/—2m) 100 ng无规的Act-衍生物 54 +/- 1 06 +/- 3
n) NDSK—uPA + 100 无规的Aa-衍生物 5 0 +/- 10 10 +/- 4 o) NDSK-II + 100 无规的Aa-4汙生物99 +/- 8 21 +/- 7
由这些试验得出，如果单核细胞迁移被抑制，这些以适当方式连 续加入的短链肽与长链肽具有相同的活性。
实施例15:
该试验用220 g- 280 g重的雄性Wistar大鼠进行。给这些大鼠 提供标准的食物和水。为了进行该试验，将大鼠麻醉并进行频率为 70次/分钟的人工呼吸，其中通过1 mm-2 mm水银的超压按照每千 克8 ml - 10 ml给予含有30体积％氧气的气体。给右心动脉安装测
量插管并测定该动脉的血压和心率。测定压力比率，作为该动脉中的 血压和心率的乘积，其量纲为mm水银/分钟/103。在右侧的静脉安装 测量插管用于施加测试物质。在进行外科处理后，向大鼠心脏提供2 ml大鼠血液。30分钟后，将左侧的心动脉闭合。再过25分钟将闭合 +>开，以给缺血区域供血。在此刻，给半数动物静脉施用800 ng/kg 的肽B(3或无规的肽B|3，然后等待2小时。
然后，为了区分受损的和未受损的心肌组织，给左侧心脏动脉提 供浓度为2重量％的evans蓝染料。然后将取下的心脏水平切片成 5部分，去除右静脉壁并用氯化三苯基tetratol(l重量％)在37°C 处理这些切片20分钟，以区分正常组织和梗塞的组织。用电脑控制 的面积法评价这些切片。
由于血管闭合，对照大鼠心脏中心肌的62. 5 %受到威胁，而在 试验大鼠心脏中为60%。在对照大鼠心脏中受到威胁的组织的46 %坏死，相反在试验大鼠心脏中只有29%。这相当于坏死组织降低 了 37% (p < 0. 05)。
按照本发明的物质以及按照本发明的物质的用于制备药物组合 物的用途具有特别的意义
用于治疗由自主反应的淋巴细胞的组织破坏作用引起的疾病中 <吏用的药物组合物。
属于这类的疾病的是自身免疫领域的疾病，例如胶原性疾病、风湿病、牛皮癣和感染后/副感染疾病和由移植物与宿主反应引起的疾 病。产生治愈效果，因为这些药物组合物阻断淋巴细胞迁移到组织中。 因此，这些淋巴细胞停留在血液中并且不能产生自主反应性组织破坏 作用。
在治疗和/或预防器官移植后发生排斥时这些药物产生治愈效 果，因为这些药物阻止淋巴细胞从血液向外来器官中迁移，因此，外 来器官不能被自主反应性淋巴细胞破坏。
在治疗和/或预防器官移植后的动脉硬化时这些药物产生治愈效 果，因为这些药物抑制淋巴细胞和单核细胞向血管壁中的迁移，因此， 阻止了血管壁中细胞的活化。对此，将器官移植后动脉硬化发生率最 小化或者被阻止。
在治疗和/或预防术后再灌注损伤或者药物引起的血流恢复，例 如心肌梗塞后、中风后、血管手术后、分流术和器官移植后的血流恢 复时这些药物产生治愈效果，因为这些药物抑制淋巴细胞和单核细胞 向血管壁中迁移。再灌注损伤是由于血流恢复过程中存在的血管细胞 由于缺氧/酸中毒引起的并导致其活化。因此，淋巴细胞和单核细胞 粘附到血管壁上并向其中迁移。淋巴细胞和单核细胞在血管壁上的粘 附和向血管壁中的迁移被抑制的事实降低了缺氧/酸中毒引起的损 伤，不会由于随后的炎性反应引起任何永久性血管损伤。
在治疗和/或预防代谢疾病或老化过程之后的动脉硬化时，这些 药物产生治愈效果，因为这些药物抑制淋巴细胞和单核细胞向血管壁 中的迁移，因此，抑制了由此引起的动脉硬化斑的进展。
也可以用本发明的药物组合物转运另一种药物物质。按照本发明
的药物组合物特异性结合到内皮细胞的表面分子。因此，与其偶联的 药物物质可以高浓度与内皮细胞接触，而使它们不会在其它位置引发 副作用。作为实例可提及应用抑制细胞分裂的物质，这些物质被特异 性地引导到内皮细胞之后发挥其抗血管生成作用。在这种情况下对肺 瘤患者有治疗作用，因为通过抑制内皮细胞的增殖和因此通过避免新 血管生成而阻断了肿瘤的生长。序列表
〈110> FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 <140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
<170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0, Office 97 〈210〉 1 〈211〉 32 〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Xaa2 Xaa29〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
<120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
<130〉 <140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170> Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97 〈210〉 2 〈211〉 32 〈212〉肽
<400〉 Gly Pro Arg Xaa2 Xaa29〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 <141>
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 <160> 12
〈170〉 Microsoft Windows NT, Workstation 4.0， Office 97 〈210〉 3 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Pro Val Xaa2 Xaa30序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 〈141〉
<150〉 AT 2063/2000
〈151〉 2000 12 12
〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT, Workstation 4.0， Office 97
〈210〉 4
〈211〉 7 to 32 〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Val Val Xaa2 Xaa30说明书第20/27页
序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4.0， Office 97 〈210〉 5 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Pro Val Xaa2 Xaa30序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT, Workstation 4.0， Office 97 <210> 6 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Val Val Xaa2 Xaa30序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97 〈210〉 7 〈211〉 7 to 35 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Pro Leu Xaa2 Xaa30序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉
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〈150〉 AT 2063/2000〈151〉 2000 12 12〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4.0， Office 97〈210〉 8〈211〉 7 to 35〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Pro Leu序列表
〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉〈140>〈141>
〈150〉 AT 2063/2000〈151〉 2000 12 12〈160〉 12
<170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97〈210〉 9<211〉 7 to 35〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Val Leu Xaa2 Xaa30〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉〈140〉〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000
〈151〉 2000 12 12
〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4.0， Office 97
〈210〉 10
〈211〉 7 to 35〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Val Leu Xaa2 Xaa30说明书第26/27页
序列表
〈110> F工BREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉〈140〉〈141〉
〈150> AT 2063/2000〈151〉 2000 12 12〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4.0， Office 97〈210〉 11〈211〉 28〈212〉肽
〈400〉 Gly His Arg Pro Leu Asp Lys Lys Arg Glu GluAla Pro Ser Leu Arg Pro Ala Pro Pro Pro lieSer Gly Gly Gly Tyr Arg〈110〉 FIBREX医学研究和发展公司/Petzelbauer Peter
〈120〉肽和/或蛋白质及其用于制备治疗性和/或预防性药物组合物的用途
〈130〉 〈140〉 〈141〉
〈150〉 AT 2063/2000 〈151〉 2000 12 12 〈160〉 12
〈170〉 Microsoft Windows NT， Workstation 4. 0， Office 97 〈210〉 12 〈211〉 28 〈212〉肽
〈400〉 Gly Pro Arg Val Val Glu Arg His Gin Ser Ala Cys Lys Asp Ser Asp Trp Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp Asn Tyr Lys
权利要求
1.通式I(SEQ ID NO 1、2)的肽或蛋白质其中R1和R2相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，Z1表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，Z2表示精氨酸残基、包含起始精氨酸残基的，特别是包含2-30个氨基酸的肽残基或者蛋白质残基，及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它的用于人和/或兽医学中的用于治疗性和/或预防性应用的物质的混合物。
2.按照权利要求1的具有通式II (SEQ ID NO 3 -IO)的肽或 者蛋白质<formula>formula see original document page 2</formula>其中l和R2相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，Zi表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，Arg表示精氨酸残基Z3表示脯氨酸残基或缬氨酸残基，Z4表示亮氨酸残基或者缬氨酸残基，Z5表示蛋白质残基或者肽残基，特别是包含2 - 30个氨基酸的肽残基 或者蛋白质残基，或者含有l-3，特别是至多IO个碳原子的醇基团，或者有机或无机碱基团，及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它的 用于人和/或兽医学中的用于治疗性和/或预防性应用的物质的混合 物。
3. 按照权利要求2的肽或者蛋白质，其中Zs是衍生于血纤蛋白 Aa-链的肽残基。
4. 按照权利要求2的肽或者蛋白质，其中Zs是衍生于血纤蛋白 Bp-链的肽残基。
5. 按照权利要求2通式II的肽或者蛋白质，其中Zs是具有下述 氨基酸序列(SEQ ID NO ll)的肽残基Asp Lys Lys Arg Gu Glu Ala ProSer Leu Arg Pro Ala Pro Pro Pro lie Ser GIy Gly Gly Tyr Arg并且Z,表示组氨酸残基， Arg表示精氨酸残基， Z3表示脯氨酸残基， Z4表示亮氨酸残基。
6. 按照权利要求2的通式II的肽或者蛋白质，其中Z5是具有下 述氨基酸序列(SEQ ID NO 12)的肽残基Glu Arg His Gin Ser Ala Cys Lys Asp Ser Asp Trp Pro Phe Cys Ser Asp Glu Asp Trp Asn Tyr Lys并且Zi表示脯氨酸残基， Arg表示精氨酸残基， Z3表示缬氨酸残基， Z^表示缬氨酸残基。
7. 按照权利要求1-6任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗感染引起的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
8. 按照权利要求1-7任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于自身免疫反应的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
9. 按照权利要求1 - 8任一項的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于风湿病的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
10. 按照权利要求l-9任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于免疫系统紊乱的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
11. 按照权利要求1 - 10任一项的肽和/或蛋白质用于制备治疗基于遗传疾病的身体局部和/或全身炎症的药物组合物的用途。
12. 按照权利要求1-11任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗器官移植后发生的排斥反应、动脉硬化、再灌注损伤、动脉硬化疾病和/或在衰老过程中血纤蛋白沉积增多的药物组合物的用途。
13. 按照权利要求1 - 12任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗器官移植后动脉硬化的药物组合物的用途。
14. 按照权利要求1 - 13任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗再灌注损伤的药物组合物的用途。
15. 按照权利要求1 - 14任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗动脉硬化和/或血栓疾病的药物组合物的用途。
16. 按照权利要求1-15任一项的肽和/或蛋白质用于制备预防和/或治疗衰老过程中血纤蛋白沉积增多的药物组合物的用途。
17. 按照权利要求1-16任一项的肽和/或蛋白质用于制备用于向人或动物内皮细胞递送一种其它药物的药物组合物的用途。
18. —种药物组合物，含有至少一种权利要求l-17任一项的肽和/或蛋白质。
19. 按照权利要求1 - 18任一项的药物组合物，这些药物组合物为适于注射的形式。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的肽或蛋白质及其盐，以及例如酰胺，或者相互的混合物和/或与至少一种其它物质的混合物用于人和/或兽医学中治疗性和/或预防性应用，其中R<sub>1</sub>和R<sub>2</sub>相同或不同，表示氢、具有1-3个，特别是至多10个碳原子的饱和的或者不饱和的烃基，Z<sub>1</sub>表示组氨酸残基或者脯氨酸残基，Z<sub>2</sub>表示精氨酸残基、具有起始精氨酸末端的，特别是包含2-30个氨基酸的肽残基或者蛋白质残基。
文档编号A61P37/00GK101676299SQ20091016355
公开日2010年3月24日 申请日期2001年12月7日 优先权日2000年12月12日
发明者P·佩策尔保尔 申请人:菲布雷克斯医疗研究及开发有限责任公司
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