(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯丸剂组合物及其用途的制作方法
专利名称：(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯丸剂组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯有效成分，与药学上可接 受辅料制备的丸剂组合物，其中包括该组合物用于防治老年性痴呆(又称阿尔海末病 Alzheimer’ s disease, AD)的用途。
背景技术：
老年性痴呆又称阿尔海末病Alzheimer，s disease (简称AD)，是一种发生于老年 期或老年前期一种以记忆认知障碍、人格改变为主要特征的慢性神经变性疾病，AD脑内病 理改变主要发生在前脑基底、海马和大脑皮层，其组织病理表现主要为神经原纤维缠结及 大量神经元丢失、颗粒空泡变性、淀粉样蛋白脑血管病、淀粉样蛋白沉着等。进入二十一世纪，全球正步入老龄化时代，老年性痴呆已成为继心脑血管疾病、肿 瘤等之后的第四大疾病。目前，全球65岁以上人群中老年性痴呆患病率约为5%，全球AD 病人估计在2000-2500万左右；与大部分其它疾病不同，老年性痴呆发病机理极其复杂；西 方有专家预言，老年性痴呆将是21世纪人类第一杀手。有专门针对70岁以上老人的认知情况进行了调查，结果发现，每天至少喝两杯到 三杯绿茶的人，老年痴呆症患病率最低。研究人员发现，这与绿茶中所含儿茶素有很大关 系。儿茶素是茶多酚的主要成分，也是一种重要抗氧化物质，可以清除人体内有害自由基， 从而预防和改善老年性痴呆症。茶多酚属水溶性物质，具有很强的扩散能力，其中儿茶素能 顺利透过人体生理屏障，到达中枢神经系统及全身其他器官，增强老年痴呆症预防及治疗 作用。研究人员还指出，每天喝三杯以上绿茶的老人，不仅患老年痴呆症几率比较低，在记 忆力、注意力和语言使用能力上，也要明显高于平时喝绿茶比较少，或不喝绿茶的人。(-)_表没食子儿茶素没食子酸酯印igallocatechin gallate (简称EGCG，下同) 为茶叶中儿茶素类的主要成分，公开的EGCG专利较多，但未见公开的EGCG丸剂组合物专 利及其公开的文献资料报道；查询美国、欧洲及日本等国专利，未见用于防治老年性痴呆的 EGCG丸剂组合物专利。总之，到目前为止，国内外均未见用于预防及治疗老年性痴呆的EGCG丸剂组合物 专利及其它公开资料。
发明内容
本发明目的是提供一种有效成分(-)_表没食子儿茶素没食子酸酯与药学上可接 受辅料制备丸剂组合物以及该组合物用于防治老年性痴呆的用途；本发明另一目的是提供 一种用于防治老年性痴呆丸剂组合物的制备方法。本发明丸剂(pellets)主要为微丸，又称小丸剂，是指直径小于2. 5mm的小丸 ’考 虑到不同需求，本发明也可制备成直径大于2. 5mm的丸剂。本发明EGCG微丸与其他制剂相比，有许多优点，如外形美观，流动性好，填装胶囊 时，无需加入助流剂，比粉末、颗粒填装胶囊的重量差异小，较适合于复方制剂的制备，且
3可避免复方成分在制备过程中的相互作用；微丸含药量大，在制备过程中，由于外力的作 用，使其内部较坚实，在填装胶囊时比粉末或颗粒有较大的装量，药物在微丸中的含量可达 80%以上，因此，单个胶囊的最大剂量可达500mg ；由于微丸为多个分散单元组成，口服后 均可均勻地分散在胃肠道，基本不受胃排空的影响，吸收重现性好，提高了药物的生物利用 度；EGCG微丸比片剂在体内的分布面积大，对同等释药量而言，片剂易造成局部药物浓度 过大，产生局部刺激反应，微丸则以单位小丸广泛地分布在胃肠道中释放药物，有效地避免 了局部药物浓度过大，降低了药物的刺激性。此外，本发明微丸剂也可进一步装胶囊、压制成片剂及包裹特定的衣膜等。需要说明的是，上述微丸组合物除作为药品外也可作为保健食品及食品；有效成 分为EGCG，其含量大于90% ；上述老年性痴呆也包括早老性痴呆和血管性痴呆。文献报道，茶叶中主要成分为黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等 多酚类物质，其中的活性成分主要为(-)_表没食子儿茶素没食子酸酯epigallocatechin gallate (简称EGCG)，(_)_表没食子儿茶素epigallocatechin (EGC)，(_)_表儿茶素没食 子酸酯印icatechin gallate (ECG)，(+)-表儿茶素印icatechin (EC)，(+)_没食子儿茶素 没食子酸酯 gallocatechin gallate (GCG)等。利用多酚类与金属离子形成络合物沉淀，可与水溶性的咖啡碱、单糖、氨基酸等组 分分离，从而富集多酚成分，该方法为沉淀法制备总多酚工艺，其工艺路线茶叶原料一溶 剂提取一过滤一沉淀一转溶一萃取一浓缩一干燥一总多酚粗品；进一步采用硅胶柱层析， 收集EGCG单一组分(HPLC实时检测)，合并，回收溶剂，干燥，即得到灰白色粉末状EGCG原 料，EGCG含量均超过90%以上，最高含量可达到99. 5%，产品质量稳定。EGCG分子结构式 如下我们多次采用硅胶柱层析分离精制EGCG(HPLC实时检测)，收集单一组分，回收溶 剂干燥后，EGCG产品含量均超过90%以上，最高可达到99. 5%，产品质量稳定。除了从茶叶中提取纯化EGCG外，本发明EGCG也可以从其他植物中获得或采用合 成、半合成的方法制得。经检验合格后EGCG即可作为原料与药学上可接受的辅料制备EGCG丸剂组合物， 药学上可接受的辅料主要包括稀释剂(赋形剂)、粘合剂、润湿剂、阻滞剂、崩解剂、表面活 性剂、抗氧化剂、PH稳定剂、润滑剂等一种或多种组合，其中常用的稀释剂有微晶纤维素 (MCC)、淀粉、糖粉、糊精、淀粉/糖粉/糊精混合使用、乳糖、壳聚糖、甘露醇、硫酸钙、磷酸 氢钙、药用碳酸钙等；粘合剂有羟丙基甲基纤维素的水或乙醇溶液、聚维酮K30 (PVP)的水或乙醇溶液，淀粉浆、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)浆、羟丙纤维素(HPC)浆、甲基纤维素(MC) 浆、乙基纤维素(EC)浆、10% 20%明胶溶液、50% 70%蔗糖溶液等；；润湿剂主要有 水或一定浓度的乙醇溶液；阻滞剂主要有乙基纤维素(EC)、PVC、聚丙烯聚硅氧烷、蜂蜡、 蓖麻蜡、氢化植物油、硬脂酸、巴西棕榈蜡和十八醇等；崩解剂主要有淀粉、羧甲基淀粉钠 (CMS-Na)、羟丙纤维素(L-HPC)、交联聚维酮(交联PVP)、交联羧甲基纤维素钠(CCNa)等； 表面活性剂如月桂醇硫酸镁等；抗氧化剂主要有Butylated hydroxyanisole (BHA)，维生素 E、Butylated hydroxytolune (BHT)、培酸丙酯(Propyl gal late)等；润滑剂主要有滑石粉、 二氧化硅、硬脂酸镁等；PH稳定剂主要为二乙酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、门冬氨酸、甘氨 酸、赖氨酸、磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、油酸、亚麻酸、棕榈酸、L-盐酸赖氨酸、苯甲酸、硼酸、乙 酸等化合物中的任一种或几种以任意比例组合。本发明EGCG丸剂组合物最常用的稀释剂(赋形剂)是微晶纤维素(MCC)，MCC能 较好促进水在湿料的分布和运动，能将水保留在球粒内部空隙处，使物料较易变形。MCC对 EGCG有良好的促进成球作用，所制丸剂均有较好的圆整度，并具有较高的强度和硬度，不会 出现塌崩现象，是制备EGCG丸剂组合物中较理想的辅料。丸剂组合物除以MCC为主要赋形 剂外，还常加入乳糖、壳聚糖或微粉硅胶等辅助MCC调节黏性和吸湿性，其次也选用糊精或 淀粉为主要赋形剂。本发明制备EGCG丸剂组合物的方法主要为挤出滚圆制丸、离心造粒制丸及流化 床喷雾制丸。挤出一滚圆法是目前国际上较为广泛应用的制丸方法之一，具有制粒效率高、颗 粒分布带窄、圆整度高、颗粒表面光滑、生产效率高、劳动强度小、能适合工业生产需要等优 点。挤出一滚圆法制备丸剂是将药物和辅料细粉混合均勻后，加入粘合剂制软材，置于挤出 机中，制得细条状软材，再倒人滚圆机中，在高速旋转的齿板上切断，滚圆，成圆球，干燥，整 丸，即得。对影响EGCG丸剂组合物制备的MCC用量、润湿剂、筛板孔径、挤出速度、滚圆速度 及滚圆时间进行研究，结果润湿剂用量、滚圆速度和滚圆时间是影响该品制备的关键因素， 而筛板孔径和挤出速度对丸剂粉体学性质无显著影响。流化床法制备EGCG丸剂组合物是将药物与辅料置于流化床中，鼓入气流，使之混 勻，再喷入粘合剂，粉末间不断发生凝结形成颗粒直至需要的粒度大小停止喷雾，即可制得 丸剂，所得丸剂可直接在流化床内干燥并包衣；本发明也可是以空白丸芯为载体母核，将其 置于流化床中，鼓入气流，使成悬浮流化状态，将药物以溶液或混悬液的形式和黏合剂混合 后喷入，包裹在空白丸芯表面，干燥，即得。本发明也可采用离心造粒法制备，该方法具有干燥速度快，操作时间短，密闭操 作、无粉尘飞扬、交叉污染小，连续喷雾、可采用程控操作，所制丸剂真球度高等优点。制备好的丸剂，可制成胃溶性薄膜衣丸、肠溶性薄膜衣丸和缓释薄膜衣丸。胃溶 性薄膜衣材料常用包衣材料包括，但不仅限于羟丙甲纤维素(HPMC)、羟丙纤维素、聚维酮 K30 (PVP)、聚乙二醇类(PEG)、聚乙烯缩乙醛二乙胺醋酸酯(AEA)、胃溶性丙烯酸树脂类、欧 巴代(Opadry)、天然高分子材料玉米朊(zein)、聚乙烯-乙烯吡啶共聚体等。包衣溶液常 加入增塑剂、遮光材料混合使用，以起到较满意的包衣效果；肠溶性薄膜衣材料常用丙烯酸 树脂类，如 Eudragit I_30D — 55，Eudragit L100, Eudragit S100 等。包衣膜处方中的增塑剂有水溶性增塑剂和脂溶性增塑剂，常用的水溶性增塑剂主要有柠檬酸三乙酯、甘油、丙 二醇、聚乙二醇类；脂溶性增塑剂有柠檬酸三乙酯、苯二甲酸二甲酯、癸二酸二丁酯、甘油三 醋酸酯、蓖麻油等；此外，包衣处方中常加入滑石粉或微粉硅胶作抗黏剂。含药丸剂包覆缓释衣膜后，也可装入胃溶性硬胶囊中，以胶囊形式给药。包衣液中 常加入致孔剂，常用的致孔剂有聚乙二醇类、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、盐类以及其他水溶性 成膜材料如HPMC、HPC等；另外包衣液中有时还须加着色剂、稳定剂、表面活性剂如十二烷 基硫酸钠、消泡剂如二甲基硅油。本发明丸剂组合物为口服常释制剂，也可为缓控释制剂。缓控释丸剂组合物采用 缓控释辅料制成，如采用不溶性骨架材料如EC、聚乙烯、聚氯乙烯(PVC)、聚丙烯等制成不 溶性骨架缓/控释丸；采用亲水性高分子材料甲基纤维素、HPMC等亲水骨架制成凝胶骨架 缓/控释丸；采用蜡质骨架材料如硬酯酸、巴西棕榈蜡、峰蜡、氢化植物油制成生物溶蚀骨 架丸；也可采用2种以上不溶性蜡质、亲水凝胶骨架材料等相互混合后也可制成混合材料 骨架缓/控释丸。缓控释丸剂组合物采用也可采用包衣形式来实现。当微丸粒径一定时， 具有较固定的表面积，且球体具有较好的抗压效果，在胃肠道蠕动挤压中不易破碎，释药面 积较颗粒、片剂恒定，从而具有较稳定的释药速率，吸收均勻，个体间生物利用度差异较小。EGCG在丸剂组合物的重量比为5% 90%，比如取25mg EGCG，加475mg的辅料 制丸，原料在丸剂组合物中的重量比为5% ；如以水为润湿剂，采用全原料EGCG挤出滚圆制 丸，干燥，包衣使增重10%，则原料在丸剂组合物中的重量比为90%。制备EGCG丸剂组合物的方法包括以下特征取EGCG原料，与微晶纤维素、二氧化 硅、磷酸二氢钠适量混合，加75%乙醇适量制软材，挤出滚圆，干燥即得；上述EGCG也可以 与其他药学上可接受的辅料如淀粉、糊精等混合，制粒后挤出滚圆、干燥制得丸剂。以上丸剂组合物，经检验合格后，可置包衣锅或流化床中进行包衣制得EGCG包衣 丸剂。包装时将丸剂装胶囊、装袋或装瓶均可，可为单剂量，也可为多剂量。本发明丸剂组合物装成胶囊、袋或瓶，其单剂量规格(最小包装单元)在0. Ig 8g之间，如丸剂组合物装成胶囊，规格可为0. Ig 0. Sg/粒；如装袋或瓶时，其单剂量规格 可为0. 5g 8g等，具体规格可根据药理药效及临床试验的日剂量而定。按中国药典2005版一部附录VIB对EGCG丸剂组合物进行EGCG鉴别试验取本品 包衣丸lg，研碎，精密称取约20mg，加甲醇20ml超声提取10分钟，滤过，取滤液作为供试品 溶液；另取EGCG对照品，加甲醇溶解制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层 色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶薄层板 上，以甲酸乙酸乙酯甲醇(4 4 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本鉴别试验方法可以根据薄层层析好坏，对层析条件进行调整或改变，如对展开 剂、薄层板、供试品及对照品浓度、点样量等进行调整或改变，以达到最佳层析效果。EGCG丸剂组合物有关物质的检查方法取含量测定项下的供试品作为供试品溶 液，精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释至每ml中含2. 5ug的溶液，作为对照品溶液。 照含量测定项下的色谱条件，取对照品溶液20 μ 1，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主 成分色谱峰的峰高为记录仪满刻度的10% _20%，再精密量取对照品溶液、供试品溶液各 20 μ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，除溶剂峰外，最大杂质峰面积，不得大于对照品主峰面积，即最大单一杂 质< 5. 0%，各杂质峰面积之和不得大于对照品主峰面积1. 6倍，即总杂质< 8. 0%。本发明丸剂组合物有关物质也可单独规定多个单一峰杂质小于规定值，如 (-)_表没食子儿茶素印igallocatechin (EGC)，(_)-表儿茶素没食子酸酯印icatechin gal late (ECG)，(+)_表儿茶素印icatechin (EC)，(+) _没食子儿茶素没食子酸酯 gal locatechin gal late (GCG)等小于2%，总杂质之和小于8%等。本发明制成EGCG 口服常释丸剂组合物时，其溶出度检查如下取本品，照溶出度 测定法(中国药典2005年版二部附录X C第二法)，以0. lmol/L盐酸溶液900ml为溶剂， 转速每分钟50转，依法操作，经45分钟时取溶液IOml滤过，精密量取续滤液2ml，置IOml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇勻，作为供试品溶液；另取EGCG对照品适量，精密称定，用 流动相稀释制成每ImL含0. 05mg的溶液作为对照品溶液。照含量测定项下的方法，精密量 取供试品溶液和对照品溶液各20μ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以主成 份峰面积计算每丸的溶出量，限度为标示量的75%，应符合规定。溶出度测定也可按总多酚 为指标，以紫外分光光度法测定，限度为标示量的75%，应符合规定。本发明丸剂组合物溶 出度较好，制定溶出度限度时可适当调整，如限度为标示量的80%、85%、90%、95%等。采用高效液相色谱法(中国药典05版一部附录VI D)测定丸剂组合物中 EGCG含量的方法如下以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为水甲醇甲酸 (73 23 1)，检测波长278nm，柱温40°C，流速l.Oml/min，理论板数按EGCG计算应不低 于 2000。取本品0. 5g，研碎，精密称定(约相当于25mg EGCG)，置25ml的量瓶中，用流动相 稀释制成每Iml含Img的溶液作为供试品母液，精密量取供试品母液2. 5ml置50ml的量瓶 中，用流动相稀释制成每Iml含0. 05mg的溶液作为供试品溶液；另取EGCG对照品适量，精 密称定，用流动相稀释制成每Iml含0. 05mg的溶液作为对照品溶液。精密量取20 μ 1注入 液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以主成分峰面积计算，即得。按目前最新《药品注册管理办法》(局令第28号)规定，当单一有效成分EGCG含 量大于90%，达到中药新药1类(有效成分)原料要求，制成丸剂组合物为中药新药1类制 剂；如按保健食品报批则不按上述类别限制。本发明提供一种能预防及治疗老年性痴呆有效剂量的EGCG的口服丸剂组合物， 以EGCG为原料，其成人每天有效剂量(以EGCG含量计)在50mg至4000mg之间，最终丸剂 组合物有效量根据药理药效及临床试验结果而确定。本发明除制成用于预防和治疗老年性痴呆药品外，也包括保健食品(或功能性食 品)以及食品。为了解EGCG的急性毒性情况，我们将小鼠分5组(每组10只)，EGCG与水1 1 稀释灌胃，连续观测7d，计算茶多酚LD5tlt5结果EGCG的LD5tl为2. 6g/kg。该剂量相当于成 人临床拟用量(0.7g/60kg/日)的100倍以上，提示EGCG毒性较低，临床用药安全。试药EGCG由上海强圣医药科技有限公司提供，符合EGCG申报临床研究质量标 准。动物昆明种小鼠，体重20士2g，II级(清洁级)。取小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，每组10只。给药前禁食12h，不禁水。通 过预试找出最大致死量为5.6g/kg，最小致死量为1.8g/kg，按EGCG与水重量比1 1溶解。分别按预定的剂量给5组小鼠1日1次灌胃。灌胃后即刻观察动物进食、活动、毛发、粪便 等行为学活动情况，连续7d。记录动物毒性反应情况和死亡动物分布。动物死亡后及时进 行尸检，若肉眼观察异常时则进行病理检查，LD5tl测定结果经电脑统计结果。结果EGCG给药灌胃后，部分小鼠先后出现四肢紫绀，呼吸短促，最后呼吸停止死 亡。经解剖肉眼观察肝、肾、肺等内脏均未见明显异常改变。按Bliss法经电脑计算，测得 EGCG的LD50为2. 6g/kg (见表1)。LD50的95%可信限为2. 17 3. 2g/kg，相当于成人(60kg) 每天临床拟给药量(0. 7g)的100倍以上。表IBliss 法测定 EGCG 的 LD50
权利要求
一种( ) 表没食子儿茶素没食子酸酯丸剂组合物及其用途，为活性成分( ) 表没食子儿茶素没食子酸酯(简称EGCG，下同)与药学上可接受辅料制成丸剂组合物以及该组合物用于防治老年性痴呆的用途。
2.如权利要求1所述的活性成分EGCG，其特征在于EGCG原料的纯度为90.0 % 99. 5%，其结构式如下
3.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于药学上可接受的辅料包括稀释剂(赋 形剂)、阻滞剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂、抗氧化剂、PH稳定剂、润滑剂等一种 或多种组合。
4.如权利要求3所述的pH稳定剂，其特征在于pH稳定剂为二乙酸、磷酸二氢钠、磷酸 二氢钾、门冬氨酸、甘氨酸、赖氨酸、磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、油酸、亚麻酸、棕榈酸、L-盐酸赖 氨酸、苯甲酸、硼酸、乙酸等化合物中的任一种或几种以任意比例组合。
5.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于进一步包括丸剂上的包衣。
6.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物为口服常释制剂及口服缓 控制剂中的一种。
7.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于EGCG在丸剂组合物中的重量比为 5% 90%。
8.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物的成人(60kg)—天剂量 (以 EGCG 计)为 50mg 至 4000mg。
9.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于单剂量丸剂组合物的规格(最小包装 单元)为0. Ig 8g。
10.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物质量标准中有关物质检 查，最大单一杂质峰< 5.0% (最大单一杂质< 5.0% )，总杂质峰之和< 8.0% (总杂质^ 8. 0% ) ο
11.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物用于预防及治疗老年性痴呆。
12.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征包括该丸剂组合物的制备方法。
全文摘要
本发明公开了一种有效成分(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯与药学上可接受辅料制备丸剂组合物以及该组合物用于防治老年性痴呆的用途，本发明的突出特点是为老年性痴呆患者提供了一种安全有效、质量可控、使用方便的口服丸剂组合物。
文档编号A61K9/20GK101940558SQ20091016451
公开日2011年1月12日 申请日期2009年7月5日 优先权日2009年7月5日
发明者饶品昌, 黎俊 申请人:上海强圣医药科技有限公司
技术领域：
本发明涉及一种(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯有效成分，与药学上可接 受辅料制备的丸剂组合物，其中包括该组合物用于防治老年性痴呆(又称阿尔海末病 Alzheimer’ s disease, AD)的用途。
背景技术：
老年性痴呆又称阿尔海末病Alzheimer，s disease (简称AD)，是一种发生于老年 期或老年前期一种以记忆认知障碍、人格改变为主要特征的慢性神经变性疾病，AD脑内病 理改变主要发生在前脑基底、海马和大脑皮层，其组织病理表现主要为神经原纤维缠结及 大量神经元丢失、颗粒空泡变性、淀粉样蛋白脑血管病、淀粉样蛋白沉着等。进入二十一世纪，全球正步入老龄化时代，老年性痴呆已成为继心脑血管疾病、肿 瘤等之后的第四大疾病。目前，全球65岁以上人群中老年性痴呆患病率约为5%，全球AD 病人估计在2000-2500万左右；与大部分其它疾病不同，老年性痴呆发病机理极其复杂；西 方有专家预言，老年性痴呆将是21世纪人类第一杀手。有专门针对70岁以上老人的认知情况进行了调查，结果发现，每天至少喝两杯到 三杯绿茶的人，老年痴呆症患病率最低。研究人员发现，这与绿茶中所含儿茶素有很大关 系。儿茶素是茶多酚的主要成分，也是一种重要抗氧化物质，可以清除人体内有害自由基， 从而预防和改善老年性痴呆症。茶多酚属水溶性物质，具有很强的扩散能力，其中儿茶素能 顺利透过人体生理屏障，到达中枢神经系统及全身其他器官，增强老年痴呆症预防及治疗 作用。研究人员还指出，每天喝三杯以上绿茶的老人，不仅患老年痴呆症几率比较低，在记 忆力、注意力和语言使用能力上，也要明显高于平时喝绿茶比较少，或不喝绿茶的人。(-)_表没食子儿茶素没食子酸酯印igallocatechin gallate (简称EGCG，下同) 为茶叶中儿茶素类的主要成分，公开的EGCG专利较多，但未见公开的EGCG丸剂组合物专 利及其公开的文献资料报道；查询美国、欧洲及日本等国专利，未见用于防治老年性痴呆的 EGCG丸剂组合物专利。总之，到目前为止，国内外均未见用于预防及治疗老年性痴呆的EGCG丸剂组合物 专利及其它公开资料。
发明内容
本发明目的是提供一种有效成分(-)_表没食子儿茶素没食子酸酯与药学上可接 受辅料制备丸剂组合物以及该组合物用于防治老年性痴呆的用途；本发明另一目的是提供 一种用于防治老年性痴呆丸剂组合物的制备方法。本发明丸剂(pellets)主要为微丸，又称小丸剂，是指直径小于2. 5mm的小丸 ’考 虑到不同需求，本发明也可制备成直径大于2. 5mm的丸剂。本发明EGCG微丸与其他制剂相比，有许多优点，如外形美观，流动性好，填装胶囊 时，无需加入助流剂，比粉末、颗粒填装胶囊的重量差异小，较适合于复方制剂的制备，且
3可避免复方成分在制备过程中的相互作用；微丸含药量大，在制备过程中，由于外力的作 用，使其内部较坚实，在填装胶囊时比粉末或颗粒有较大的装量，药物在微丸中的含量可达 80%以上，因此，单个胶囊的最大剂量可达500mg ；由于微丸为多个分散单元组成，口服后 均可均勻地分散在胃肠道，基本不受胃排空的影响，吸收重现性好，提高了药物的生物利用 度；EGCG微丸比片剂在体内的分布面积大，对同等释药量而言，片剂易造成局部药物浓度 过大，产生局部刺激反应，微丸则以单位小丸广泛地分布在胃肠道中释放药物，有效地避免 了局部药物浓度过大，降低了药物的刺激性。此外，本发明微丸剂也可进一步装胶囊、压制成片剂及包裹特定的衣膜等。需要说明的是，上述微丸组合物除作为药品外也可作为保健食品及食品；有效成 分为EGCG，其含量大于90% ；上述老年性痴呆也包括早老性痴呆和血管性痴呆。文献报道，茶叶中主要成分为黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等 多酚类物质，其中的活性成分主要为(-)_表没食子儿茶素没食子酸酯epigallocatechin gallate (简称EGCG)，(_)_表没食子儿茶素epigallocatechin (EGC)，(_)_表儿茶素没食 子酸酯印icatechin gallate (ECG)，(+)-表儿茶素印icatechin (EC)，(+)_没食子儿茶素 没食子酸酯 gallocatechin gallate (GCG)等。利用多酚类与金属离子形成络合物沉淀，可与水溶性的咖啡碱、单糖、氨基酸等组 分分离，从而富集多酚成分，该方法为沉淀法制备总多酚工艺，其工艺路线茶叶原料一溶 剂提取一过滤一沉淀一转溶一萃取一浓缩一干燥一总多酚粗品；进一步采用硅胶柱层析， 收集EGCG单一组分(HPLC实时检测)，合并，回收溶剂，干燥，即得到灰白色粉末状EGCG原 料，EGCG含量均超过90%以上，最高含量可达到99. 5%，产品质量稳定。EGCG分子结构式 如下我们多次采用硅胶柱层析分离精制EGCG(HPLC实时检测)，收集单一组分，回收溶 剂干燥后，EGCG产品含量均超过90%以上，最高可达到99. 5%，产品质量稳定。除了从茶叶中提取纯化EGCG外，本发明EGCG也可以从其他植物中获得或采用合 成、半合成的方法制得。经检验合格后EGCG即可作为原料与药学上可接受的辅料制备EGCG丸剂组合物， 药学上可接受的辅料主要包括稀释剂(赋形剂)、粘合剂、润湿剂、阻滞剂、崩解剂、表面活 性剂、抗氧化剂、PH稳定剂、润滑剂等一种或多种组合，其中常用的稀释剂有微晶纤维素 (MCC)、淀粉、糖粉、糊精、淀粉/糖粉/糊精混合使用、乳糖、壳聚糖、甘露醇、硫酸钙、磷酸 氢钙、药用碳酸钙等；粘合剂有羟丙基甲基纤维素的水或乙醇溶液、聚维酮K30 (PVP)的水或乙醇溶液，淀粉浆、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)浆、羟丙纤维素(HPC)浆、甲基纤维素(MC) 浆、乙基纤维素(EC)浆、10% 20%明胶溶液、50% 70%蔗糖溶液等；；润湿剂主要有 水或一定浓度的乙醇溶液；阻滞剂主要有乙基纤维素(EC)、PVC、聚丙烯聚硅氧烷、蜂蜡、 蓖麻蜡、氢化植物油、硬脂酸、巴西棕榈蜡和十八醇等；崩解剂主要有淀粉、羧甲基淀粉钠 (CMS-Na)、羟丙纤维素(L-HPC)、交联聚维酮(交联PVP)、交联羧甲基纤维素钠(CCNa)等； 表面活性剂如月桂醇硫酸镁等；抗氧化剂主要有Butylated hydroxyanisole (BHA)，维生素 E、Butylated hydroxytolune (BHT)、培酸丙酯(Propyl gal late)等；润滑剂主要有滑石粉、 二氧化硅、硬脂酸镁等；PH稳定剂主要为二乙酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、门冬氨酸、甘氨 酸、赖氨酸、磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、油酸、亚麻酸、棕榈酸、L-盐酸赖氨酸、苯甲酸、硼酸、乙 酸等化合物中的任一种或几种以任意比例组合。本发明EGCG丸剂组合物最常用的稀释剂(赋形剂)是微晶纤维素(MCC)，MCC能 较好促进水在湿料的分布和运动，能将水保留在球粒内部空隙处，使物料较易变形。MCC对 EGCG有良好的促进成球作用，所制丸剂均有较好的圆整度，并具有较高的强度和硬度，不会 出现塌崩现象，是制备EGCG丸剂组合物中较理想的辅料。丸剂组合物除以MCC为主要赋形 剂外，还常加入乳糖、壳聚糖或微粉硅胶等辅助MCC调节黏性和吸湿性，其次也选用糊精或 淀粉为主要赋形剂。本发明制备EGCG丸剂组合物的方法主要为挤出滚圆制丸、离心造粒制丸及流化 床喷雾制丸。挤出一滚圆法是目前国际上较为广泛应用的制丸方法之一，具有制粒效率高、颗 粒分布带窄、圆整度高、颗粒表面光滑、生产效率高、劳动强度小、能适合工业生产需要等优 点。挤出一滚圆法制备丸剂是将药物和辅料细粉混合均勻后，加入粘合剂制软材，置于挤出 机中，制得细条状软材，再倒人滚圆机中，在高速旋转的齿板上切断，滚圆，成圆球，干燥，整 丸，即得。对影响EGCG丸剂组合物制备的MCC用量、润湿剂、筛板孔径、挤出速度、滚圆速度 及滚圆时间进行研究，结果润湿剂用量、滚圆速度和滚圆时间是影响该品制备的关键因素， 而筛板孔径和挤出速度对丸剂粉体学性质无显著影响。流化床法制备EGCG丸剂组合物是将药物与辅料置于流化床中，鼓入气流，使之混 勻，再喷入粘合剂，粉末间不断发生凝结形成颗粒直至需要的粒度大小停止喷雾，即可制得 丸剂，所得丸剂可直接在流化床内干燥并包衣；本发明也可是以空白丸芯为载体母核，将其 置于流化床中，鼓入气流，使成悬浮流化状态，将药物以溶液或混悬液的形式和黏合剂混合 后喷入，包裹在空白丸芯表面，干燥，即得。本发明也可采用离心造粒法制备，该方法具有干燥速度快，操作时间短，密闭操 作、无粉尘飞扬、交叉污染小，连续喷雾、可采用程控操作，所制丸剂真球度高等优点。制备好的丸剂，可制成胃溶性薄膜衣丸、肠溶性薄膜衣丸和缓释薄膜衣丸。胃溶 性薄膜衣材料常用包衣材料包括，但不仅限于羟丙甲纤维素(HPMC)、羟丙纤维素、聚维酮 K30 (PVP)、聚乙二醇类(PEG)、聚乙烯缩乙醛二乙胺醋酸酯(AEA)、胃溶性丙烯酸树脂类、欧 巴代(Opadry)、天然高分子材料玉米朊(zein)、聚乙烯-乙烯吡啶共聚体等。包衣溶液常 加入增塑剂、遮光材料混合使用，以起到较满意的包衣效果；肠溶性薄膜衣材料常用丙烯酸 树脂类，如 Eudragit I_30D — 55，Eudragit L100, Eudragit S100 等。包衣膜处方中的增塑剂有水溶性增塑剂和脂溶性增塑剂，常用的水溶性增塑剂主要有柠檬酸三乙酯、甘油、丙 二醇、聚乙二醇类；脂溶性增塑剂有柠檬酸三乙酯、苯二甲酸二甲酯、癸二酸二丁酯、甘油三 醋酸酯、蓖麻油等；此外，包衣处方中常加入滑石粉或微粉硅胶作抗黏剂。含药丸剂包覆缓释衣膜后，也可装入胃溶性硬胶囊中，以胶囊形式给药。包衣液中 常加入致孔剂，常用的致孔剂有聚乙二醇类、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、盐类以及其他水溶性 成膜材料如HPMC、HPC等；另外包衣液中有时还须加着色剂、稳定剂、表面活性剂如十二烷 基硫酸钠、消泡剂如二甲基硅油。本发明丸剂组合物为口服常释制剂，也可为缓控释制剂。缓控释丸剂组合物采用 缓控释辅料制成，如采用不溶性骨架材料如EC、聚乙烯、聚氯乙烯(PVC)、聚丙烯等制成不 溶性骨架缓/控释丸；采用亲水性高分子材料甲基纤维素、HPMC等亲水骨架制成凝胶骨架 缓/控释丸；采用蜡质骨架材料如硬酯酸、巴西棕榈蜡、峰蜡、氢化植物油制成生物溶蚀骨 架丸；也可采用2种以上不溶性蜡质、亲水凝胶骨架材料等相互混合后也可制成混合材料 骨架缓/控释丸。缓控释丸剂组合物采用也可采用包衣形式来实现。当微丸粒径一定时， 具有较固定的表面积，且球体具有较好的抗压效果，在胃肠道蠕动挤压中不易破碎，释药面 积较颗粒、片剂恒定，从而具有较稳定的释药速率，吸收均勻，个体间生物利用度差异较小。EGCG在丸剂组合物的重量比为5% 90%，比如取25mg EGCG，加475mg的辅料 制丸，原料在丸剂组合物中的重量比为5% ；如以水为润湿剂，采用全原料EGCG挤出滚圆制 丸，干燥，包衣使增重10%，则原料在丸剂组合物中的重量比为90%。制备EGCG丸剂组合物的方法包括以下特征取EGCG原料，与微晶纤维素、二氧化 硅、磷酸二氢钠适量混合，加75%乙醇适量制软材，挤出滚圆，干燥即得；上述EGCG也可以 与其他药学上可接受的辅料如淀粉、糊精等混合，制粒后挤出滚圆、干燥制得丸剂。以上丸剂组合物，经检验合格后，可置包衣锅或流化床中进行包衣制得EGCG包衣 丸剂。包装时将丸剂装胶囊、装袋或装瓶均可，可为单剂量，也可为多剂量。本发明丸剂组合物装成胶囊、袋或瓶，其单剂量规格(最小包装单元)在0. Ig 8g之间，如丸剂组合物装成胶囊，规格可为0. Ig 0. Sg/粒；如装袋或瓶时，其单剂量规格 可为0. 5g 8g等，具体规格可根据药理药效及临床试验的日剂量而定。按中国药典2005版一部附录VIB对EGCG丸剂组合物进行EGCG鉴别试验取本品 包衣丸lg，研碎，精密称取约20mg，加甲醇20ml超声提取10分钟，滤过，取滤液作为供试品 溶液；另取EGCG对照品，加甲醇溶解制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层 色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶薄层板 上，以甲酸乙酸乙酯甲醇(4 4 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本鉴别试验方法可以根据薄层层析好坏，对层析条件进行调整或改变，如对展开 剂、薄层板、供试品及对照品浓度、点样量等进行调整或改变，以达到最佳层析效果。EGCG丸剂组合物有关物质的检查方法取含量测定项下的供试品作为供试品溶 液，精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释至每ml中含2. 5ug的溶液，作为对照品溶液。 照含量测定项下的色谱条件，取对照品溶液20 μ 1，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主 成分色谱峰的峰高为记录仪满刻度的10% _20%，再精密量取对照品溶液、供试品溶液各 20 μ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，除溶剂峰外，最大杂质峰面积，不得大于对照品主峰面积，即最大单一杂 质< 5. 0%，各杂质峰面积之和不得大于对照品主峰面积1. 6倍，即总杂质< 8. 0%。本发明丸剂组合物有关物质也可单独规定多个单一峰杂质小于规定值，如 (-)_表没食子儿茶素印igallocatechin (EGC)，(_)-表儿茶素没食子酸酯印icatechin gal late (ECG)，(+)_表儿茶素印icatechin (EC)，(+) _没食子儿茶素没食子酸酯 gal locatechin gal late (GCG)等小于2%，总杂质之和小于8%等。本发明制成EGCG 口服常释丸剂组合物时，其溶出度检查如下取本品，照溶出度 测定法(中国药典2005年版二部附录X C第二法)，以0. lmol/L盐酸溶液900ml为溶剂， 转速每分钟50转，依法操作，经45分钟时取溶液IOml滤过，精密量取续滤液2ml，置IOml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇勻，作为供试品溶液；另取EGCG对照品适量，精密称定，用 流动相稀释制成每ImL含0. 05mg的溶液作为对照品溶液。照含量测定项下的方法，精密量 取供试品溶液和对照品溶液各20μ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以主成 份峰面积计算每丸的溶出量，限度为标示量的75%，应符合规定。溶出度测定也可按总多酚 为指标，以紫外分光光度法测定，限度为标示量的75%，应符合规定。本发明丸剂组合物溶 出度较好，制定溶出度限度时可适当调整，如限度为标示量的80%、85%、90%、95%等。采用高效液相色谱法(中国药典05版一部附录VI D)测定丸剂组合物中 EGCG含量的方法如下以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为水甲醇甲酸 (73 23 1)，检测波长278nm，柱温40°C，流速l.Oml/min，理论板数按EGCG计算应不低 于 2000。取本品0. 5g，研碎，精密称定(约相当于25mg EGCG)，置25ml的量瓶中，用流动相 稀释制成每Iml含Img的溶液作为供试品母液，精密量取供试品母液2. 5ml置50ml的量瓶 中，用流动相稀释制成每Iml含0. 05mg的溶液作为供试品溶液；另取EGCG对照品适量，精 密称定，用流动相稀释制成每Iml含0. 05mg的溶液作为对照品溶液。精密量取20 μ 1注入 液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以主成分峰面积计算，即得。按目前最新《药品注册管理办法》(局令第28号)规定，当单一有效成分EGCG含 量大于90%，达到中药新药1类(有效成分)原料要求，制成丸剂组合物为中药新药1类制 剂；如按保健食品报批则不按上述类别限制。本发明提供一种能预防及治疗老年性痴呆有效剂量的EGCG的口服丸剂组合物， 以EGCG为原料，其成人每天有效剂量(以EGCG含量计)在50mg至4000mg之间，最终丸剂 组合物有效量根据药理药效及临床试验结果而确定。本发明除制成用于预防和治疗老年性痴呆药品外，也包括保健食品(或功能性食 品)以及食品。为了解EGCG的急性毒性情况，我们将小鼠分5组(每组10只)，EGCG与水1 1 稀释灌胃，连续观测7d，计算茶多酚LD5tlt5结果EGCG的LD5tl为2. 6g/kg。该剂量相当于成 人临床拟用量(0.7g/60kg/日)的100倍以上，提示EGCG毒性较低，临床用药安全。试药EGCG由上海强圣医药科技有限公司提供，符合EGCG申报临床研究质量标 准。动物昆明种小鼠，体重20士2g，II级(清洁级)。取小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，每组10只。给药前禁食12h，不禁水。通 过预试找出最大致死量为5.6g/kg，最小致死量为1.8g/kg，按EGCG与水重量比1 1溶解。分别按预定的剂量给5组小鼠1日1次灌胃。灌胃后即刻观察动物进食、活动、毛发、粪便 等行为学活动情况，连续7d。记录动物毒性反应情况和死亡动物分布。动物死亡后及时进 行尸检，若肉眼观察异常时则进行病理检查，LD5tl测定结果经电脑统计结果。结果EGCG给药灌胃后，部分小鼠先后出现四肢紫绀，呼吸短促，最后呼吸停止死 亡。经解剖肉眼观察肝、肾、肺等内脏均未见明显异常改变。按Bliss法经电脑计算，测得 EGCG的LD50为2. 6g/kg (见表1)。LD50的95%可信限为2. 17 3. 2g/kg，相当于成人(60kg) 每天临床拟给药量(0. 7g)的100倍以上。表IBliss 法测定 EGCG 的 LD50
权利要求
一种( ) 表没食子儿茶素没食子酸酯丸剂组合物及其用途，为活性成分( ) 表没食子儿茶素没食子酸酯(简称EGCG，下同)与药学上可接受辅料制成丸剂组合物以及该组合物用于防治老年性痴呆的用途。
2.如权利要求1所述的活性成分EGCG，其特征在于EGCG原料的纯度为90.0 % 99. 5%，其结构式如下
3.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于药学上可接受的辅料包括稀释剂(赋 形剂)、阻滞剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂、抗氧化剂、PH稳定剂、润滑剂等一种 或多种组合。
4.如权利要求3所述的pH稳定剂，其特征在于pH稳定剂为二乙酸、磷酸二氢钠、磷酸 二氢钾、门冬氨酸、甘氨酸、赖氨酸、磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、油酸、亚麻酸、棕榈酸、L-盐酸赖 氨酸、苯甲酸、硼酸、乙酸等化合物中的任一种或几种以任意比例组合。
5.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于进一步包括丸剂上的包衣。
6.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物为口服常释制剂及口服缓 控制剂中的一种。
7.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于EGCG在丸剂组合物中的重量比为 5% 90%。
8.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物的成人(60kg)—天剂量 (以 EGCG 计)为 50mg 至 4000mg。
9.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于单剂量丸剂组合物的规格(最小包装 单元)为0. Ig 8g。
10.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物质量标准中有关物质检 查，最大单一杂质峰< 5.0% (最大单一杂质< 5.0% )，总杂质峰之和< 8.0% (总杂质^ 8. 0% ) ο
11.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征在于丸剂组合物用于预防及治疗老年性痴呆。
12.如权利要求1所述的丸剂组合物，其特征包括该丸剂组合物的制备方法。
全文摘要
本发明公开了一种有效成分(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯与药学上可接受辅料制备丸剂组合物以及该组合物用于防治老年性痴呆的用途，本发明的突出特点是为老年性痴呆患者提供了一种安全有效、质量可控、使用方便的口服丸剂组合物。
文档编号A61K9/20GK101940558SQ20091016451
公开日2011年1月12日 申请日期2009年7月5日 优先权日2009年7月5日
发明者饶品昌, 黎俊 申请人:上海强圣医药科技有限公司
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